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        微柱凝膠法檢出AxB亞型1例報告

        2015-03-21 05:39:58姚文娟
        國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志 2015年3期

        姚文娟,周 軍,陳 琪

        (湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院輸血科,湖北十堰442000)

        ·個案與短篇·

        微柱凝膠法檢出AxB亞型1例報告

        姚文娟,周 軍△,陳 琪

        (湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院輸血科,湖北十堰442000)

        白血病患者入院輸血,交叉配血時復(fù)查血型,鑒定血型時正反定型不符,為確保輸血安全準(zhǔn)確鑒定血型,運用了血型血清學(xué)與分子生物學(xué)檢測方法進行鑒定,結(jié)果為AxB亞型所致,現(xiàn)報道如下。

        1 資料與方法

        1.1 患者來院 本院住院患者。

        1.2 儀器與試劑 BaSo2005-1離心機、FYQ免疫微柱孵育機、血型血清學(xué)用離心機TD-3A。實驗所用人源性抗-A血清、抗-B、抗-AB、抗-H血清以及抗人球蛋白試劑均由上海市血液中心生產(chǎn);ABO、RHD血型定型檢測卡(單克隆抗體)交叉配血卡等微柱凝膠卡和不規(guī)則抗體篩選細(xì)胞由長春博訊生物技術(shù)有限公司提供;反定型用A型紅細(xì)胞(Ae)、B型紅細(xì)胞(Be)、0型紅細(xì)胞(Oe)、自身紅細(xì)胞(ze)和均由本實驗室自制。

        1.3 方法

        1.3.1 血型血清學(xué)試驗方法 首先排除人為因素,重新采集血液樣本鑒定血型,采用試管法和微柱凝膠卡法常規(guī)檢測ABO血型和不規(guī)則抗體,并進一步做吸收放散試驗;在此期間嚴(yán)格核對試劑有效期、離心機轉(zhuǎn)速、時間和離心力,檢查其他器材有無污染,嚴(yán)格按照操作規(guī)程和注意事項[2]進行操作。

        1.3.2 分子生物學(xué)實驗 送往上海血液中心檢測。

        2 結(jié) 果

        2.1 微柱凝膠卡法血型鑒定 正定型為B型,反定型為AB型。由于患者屬白血病患者,應(yīng)考慮會影響到紅細(xì)胞凝集的因素,因此在做微柱凝膠卡法血型鑒定前,先利用0.9%生理鹽水將該患者EDTA抗凝紅細(xì)胞洗4次,配置成0.8%的紅細(xì)胞懸液,再進行試驗。ABO、RhD血型定型檢測卡(單克隆抗體)正反定型結(jié)果不一致,不能直接確定血型。由于所有試驗嚴(yán)格按照操作規(guī)程進行,排除了試劑和人為操作因素,結(jié)果可信,該患者血型無法鑒定。由于我科試劑有限,重新采集標(biāo)本送市中心血站檢測,見表2~4(見《國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。

        2.2 交叉配血試驗結(jié)果 同時取3份B型獻(xiàn)血員血樣和該患者血樣進行交叉配血試驗,結(jié)果顯示主側(cè)不凝集次側(cè)弱凝集;分別與3個O型獻(xiàn)血員血樣做交叉配血試驗次側(cè)均呈強凝集現(xiàn)象;另取3人份AB型獻(xiàn)血員血樣做交叉配血試驗,主次側(cè)均不凝集,患者血樣自身對照無凝集,抗體篩查及直接抗球蛋白試驗均呈陰性。由此判斷該患者血型非B型,有可能血型為:(1)AB型(A抗原減弱);(2)AxB亞型。

        2.3 分子生物學(xué)結(jié)果 通過把該標(biāo)本送往上海血液中心,抽取標(biāo)本白膜層進行分子生物學(xué)測序證實確實存在A基因。進一步證實為AxB亞型。

        3 討 論

        臨床輸血安全的保障依賴著ABO血型鑒定的準(zhǔn)確性,血型鑒定一旦出現(xiàn)差錯,將嚴(yán)重威脅患者的生命安全[3]。當(dāng)發(fā)現(xiàn)血型正反定型結(jié)果不一致時,筆者第一時間查找原因,在排除人為操作及試劑因素后,結(jié)合臨床以及輔助血清學(xué)試驗做進一步鑒定。

        患者本人為粒細(xì)胞性白血患者,易導(dǎo)致弱抗原或抗原缺失。查閱相關(guān)資料證明粒細(xì)胞性白血病時由于H轉(zhuǎn)移酶缺乏或合成受抑制,使血型抗原減弱?;颊哐驼炊ㄐ徒Y(jié)果不一致可能因為血型抗原減弱引起[4],但不能排除亞型的可能。

        ABO血型亞型又稱ABO變異型,經(jīng)血型血清學(xué)檢查試驗,顯示正反定型不符以及抗原性減弱為主要特征的多種表現(xiàn)型。此患者常規(guī)血型鑒定ABO血型正定為B型,反定型為AB型,而在交叉配血時發(fā)現(xiàn)該患者與多個B型獻(xiàn)血員配血次側(cè)弱凝集;與O型血樣配血試驗次側(cè)凝集;與AB型血樣配血主次側(cè)均不凝集;患者血樣自身對照無凝集;抗體篩查及直接抗球蛋白試驗均呈陰性。說明患者血型非B型,有可能血型為:(1)AB型(A抗原減弱),(2)AxB亞型。

        本例患者血清學(xué)試驗均顯示B抗原正常,A抗原明顯減弱或陰性而吸收放射試驗論證患者紅細(xì)胞上存在1+A抗原,抗-A人源血清不發(fā)生凝集,與O型人的抗A1B發(fā)生凝集符合AxB亞型血清學(xué)特征,提示為亞型。標(biāo)本送往上海血液中心進行分子生物學(xué)測序證實確實存在A基因,進一步證實為AxB亞型。AxB亞型較為罕見,在常規(guī)血型鑒定時很容易被定錯血型,引起交叉配血不合,若輸血科人員疏忽大意可造成嚴(yán)重的輸血事故,因此常規(guī)ABO血型定型應(yīng)該做正反定型,兩種血型鑒定結(jié)果相互驗證可以防止某些A、B亞型的漏檢及其錯誤結(jié)果,使血型鑒定結(jié)果更為準(zhǔn)確可靠,從而保證臨床輸血安全。對于ABO正反定型不符的疑難血型,除了做血型血清學(xué)檢測外,還應(yīng)進一步通過測序做分子生物學(xué)檢測,兩者相結(jié)合正確鑒定血型。

        [1]胡麗華.臨床輸血學(xué)檢驗[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2012:19.

        [2]范瑾,張玨.ABO血型鑒定中正反定型不一致時的分析與探討[J].上海醫(yī)藥,2013,34(17):37-39.

        [3]范瑾.輸血前不規(guī)則抗體篩查的臨床意義[J].上海醫(yī)藥,2012,33(7):24-25.

        [4]曹奎杰,何鳴鏑,劉峰,等.再障引起A型血型抗原減弱1例[J].臨床血液學(xué)雜志:輸血與檢驗版,2007,4(4):187-188.

        10.3969/j.issn.1673-4130.2015.03.073

        C

        1673-4130(2015)03-0432-02

        2014-09-25)

        △通訊作者,E-mail:363615397@qq.com。

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