姚文娟，周 軍，陳 琪

（湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院輸血科，湖北十堰442000）

·個案與短篇·

微柱凝膠法檢出AxB亞型1例報告

姚文娟，周 軍△，陳 琪

（湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院輸血科，湖北十堰442000）

白血病患者入院輸血，交叉配血時復(fù)查血型，鑒定血型時正反定型不符，為確保輸血安全準(zhǔn)確鑒定血型，運用了血型血清學(xué)與分子生物學(xué)檢測方法進行鑒定，結(jié)果為AxB亞型所致，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 患者來院 本院住院患者。

1.2 儀器與試劑 BaSo2005－1離心機、FYQ免疫微柱孵育機、血型血清學(xué)用離心機TD－3A。實驗所用人源性抗－A血清、抗－B、抗－AB、抗－H血清以及抗人球蛋白試劑均由上海市血液中心生產(chǎn)；ABO、RHD血型定型檢測卡（單克隆抗體）交叉配血卡等微柱凝膠卡和不規(guī)則抗體篩選細(xì)胞由長春博訊生物技術(shù)有限公司提供；反定型用A型紅細(xì)胞（Ae）、B型紅細(xì)胞（Be）、0型紅細(xì)胞（Oe）、自身紅細(xì)胞（ze）和均由本實驗室自制。

1.3 方法

1.3.1 血型血清學(xué)試驗方法 首先排除人為因素，重新采集血液樣本鑒定血型，采用試管法和微柱凝膠卡法常規(guī)檢測ABO血型和不規(guī)則抗體，并進一步做吸收放散試驗；在此期間嚴(yán)格核對試劑有效期、離心機轉(zhuǎn)速、時間和離心力，檢查其他器材有無污染，嚴(yán)格按照操作規(guī)程和注意事項［2］進行操作。

1.3.2 分子生物學(xué)實驗 送往上海血液中心檢測。

2 結(jié) 果

2.1 微柱凝膠卡法血型鑒定 正定型為B型，反定型為AB型。由于患者屬白血病患者，應(yīng)考慮會影響到紅細(xì)胞凝集的因素，因此在做微柱凝膠卡法血型鑒定前，先利用0.9%生理鹽水將該患者EDTA抗凝紅細(xì)胞洗4次，配置成0.8%的紅細(xì)胞懸液，再進行試驗。ABO、RhD血型定型檢測卡（單克隆抗體）正反定型結(jié)果不一致，不能直接確定血型。由于所有試驗嚴(yán)格按照操作規(guī)程進行，排除了試劑和人為操作因素，結(jié)果可信，該患者血型無法鑒定。由于我科試劑有限，重新采集標(biāo)本送市中心血站檢測，見表2～4（見《國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”）。

2.2 交叉配血試驗結(jié)果 同時取3份B型獻(xiàn)血員血樣和該患者血樣進行交叉配血試驗，結(jié)果顯示主側(cè)不凝集次側(cè)弱凝集；分別與3個O型獻(xiàn)血員血樣做交叉配血試驗次側(cè)均呈強凝集現(xiàn)象；另取3人份AB型獻(xiàn)血員血樣做交叉配血試驗，主次側(cè)均不凝集，患者血樣自身對照無凝集，抗體篩查及直接抗球蛋白試驗均呈陰性。由此判斷該患者血型非B型，有可能血型為：（1）AB型（A抗原減弱）；（2）AxB亞型。

2.3 分子生物學(xué)結(jié)果 通過把該標(biāo)本送往上海血液中心，抽取標(biāo)本白膜層進行分子生物學(xué)測序證實確實存在A基因。進一步證實為AxB亞型。

3 討 論

臨床輸血安全的保障依賴著ABO血型鑒定的準(zhǔn)確性，血型鑒定一旦出現(xiàn)差錯，將嚴(yán)重威脅患者的生命安全［3］。當(dāng)發(fā)現(xiàn)血型正反定型結(jié)果不一致時，筆者第一時間查找原因，在排除人為操作及試劑因素后，結(jié)合臨床以及輔助血清學(xué)試驗做進一步鑒定。

患者本人為粒細(xì)胞性白血患者，易導(dǎo)致弱抗原或抗原缺失。查閱相關(guān)資料證明粒細(xì)胞性白血病時由于H轉(zhuǎn)移酶缺乏或合成受抑制，使血型抗原減弱?；颊哐驼炊ㄐ徒Y(jié)果不一致可能因為血型抗原減弱引起［4］，但不能排除亞型的可能。

ABO血型亞型又稱ABO變異型，經(jīng)血型血清學(xué)檢查試驗，顯示正反定型不符以及抗原性減弱為主要特征的多種表現(xiàn)型。此患者常規(guī)血型鑒定ABO血型正定為B型，反定型為AB型，而在交叉配血時發(fā)現(xiàn)該患者與多個B型獻(xiàn)血員配血次側(cè)弱凝集；與O型血樣配血試驗次側(cè)凝集；與AB型血樣配血主次側(cè)均不凝集；患者血樣自身對照無凝集；抗體篩查及直接抗球蛋白試驗均呈陰性。說明患者血型非B型，有可能血型為：（1）AB型（A抗原減弱），（2）AxB亞型。

本例患者血清學(xué)試驗均顯示B抗原正常，A抗原明顯減弱或陰性而吸收放射試驗論證患者紅細(xì)胞上存在1＋A抗原，抗－A人源血清不發(fā)生凝集，與O型人的抗A1B發(fā)生凝集符合AxB亞型血清學(xué)特征，提示為亞型。標(biāo)本送往上海血液中心進行分子生物學(xué)測序證實確實存在A基因，進一步證實為AxB亞型。AxB亞型較為罕見，在常規(guī)血型鑒定時很容易被定錯血型，引起交叉配血不合，若輸血科人員疏忽大意可造成嚴(yán)重的輸血事故，因此常規(guī)ABO血型定型應(yīng)該做正反定型，兩種血型鑒定結(jié)果相互驗證可以防止某些A、B亞型的漏檢及其錯誤結(jié)果，使血型鑒定結(jié)果更為準(zhǔn)確可靠，從而保證臨床輸血安全。對于ABO正反定型不符的疑難血型，除了做血型血清學(xué)檢測外，還應(yīng)進一步通過測序做分子生物學(xué)檢測，兩者相結(jié)合正確鑒定血型。

［1］胡麗華.臨床輸血學(xué)檢驗［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2012：19.

［2］范瑾，張玨.ABO血型鑒定中正反定型不一致時的分析與探討［J］.上海醫(yī)藥，2013，34（17）：37－39.

［3］范瑾.輸血前不規(guī)則抗體篩查的臨床意義［J］.上海醫(yī)藥，2012，33（7）：24－25.

［4］曹奎杰，何鳴鏑，劉峰，等.再障引起A型血型抗原減弱1例［J］.臨床血液學(xué)雜志：輸血與檢驗版，2007，4（4）：187－188.

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.073

C

1673－4130（2015）03－0432－02

2014－09－25）

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