楊麗靜，銀吉卓瑪，巫全桂

（青海省大通縣紅十字醫(yī)院檢驗科，青海 西寧 810100）

1 176例血培養(yǎng)檢出真菌及細菌的耐藥性分析

楊麗靜，銀吉卓瑪，巫全桂

（青海省大通縣紅十字醫(yī)院檢驗科，青海 西寧 810100）

目的調(diào)查2010～2013年醫(yī)院常見真菌、細菌的耐藥性，為臨床用藥提供依據(jù)。方法用BacT/Alert 3D全自動血培養(yǎng)儀進行培養(yǎng)，用VITEK鑒定系統(tǒng)進行細菌鑒定和藥敏試驗，用WHONET5.4統(tǒng)計結(jié)果。結(jié)果1 176例送檢標本中陽性標本108例，陽性率為9.18%。分離病原菌123株，革蘭陽性菌60株（48.78%），革蘭陰性菌為47株（38.21%），真菌為16株（13.01%）。前5位病原菌依次為凝固酶陰性葡萄球菌（44株）、大腸埃希菌（18株）、肺炎克雷伯菌（15株）、白色念珠菌（10株）、金黃色葡萄球菌（7株）。耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）、金黃色葡萄球菌（MRSA）檢出率分別為72.73%（32/44）、57.14%（4/7），MRSA和MRCNS較MSSA和MSCNS對抗菌藥物耐藥率高，未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素及利奈唑胺耐藥的葡萄球菌。酮康唑、氟康唑、咪康唑?qū)Π咨钪榫舾新矢?。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β－內(nèi)酰胺酶（ESBLs）率分別為50.00%、40.00%，亞胺培南和美羅培南敏感率為100.00%。頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦對腸桿菌科細菌、銅綠假單胞菌敏感率較高。結(jié)論血培養(yǎng)以凝固酶陰性葡萄球菌為主，分離菌的耐藥性較強，應加強血培養(yǎng)，指導臨床合理用藥。

血培養(yǎng)； 細菌； 真菌； 耐藥性； 藥敏試驗

因免疫抑制劑、化療藥物、廣譜抗菌藥物的使用，條件致病菌引發(fā)的感染也日益突出，臨床分離病原菌的耐藥性日趨嚴重。血流感染因起病急、病死率高、嚴重威脅患者生命［1］。因此，監(jiān)測血培養(yǎng)中細菌分布及耐藥性的變遷十分重要，現(xiàn)回顧性分析本院2011年1月至2013年12月的血培養(yǎng)陽性結(jié)果，報道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 2010年1月至2013年12月，剔除同一患者相同部位的重復分離菌株。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃葡葡萄球菌ATCC25923和白色念珠菌ATCC90028。

1.2 細菌培養(yǎng)、鑒定及藥敏試驗 臨床科室在有感染體征的患者于抗菌藥物使用前采集靜脈血標本，成人血量8～10mL，兒童3～5mL，每次采集一套（需氧瓶及厭氧瓶），用BacT/A－lert3D全自動血培養(yǎng)儀（配套瓶）培養(yǎng)。陽性標本操作規(guī)程轉(zhuǎn)種［2］，用VITEK微生自動鑒定藥敏儀鑒定細菌和藥敏試驗判斷標準參照美國臨床實驗室標準化協(xié)會（CLSI）的相關(guān)文件［3］。真菌藥敏試劑盒為珠海銀科產(chǎn)品。

1.3 統(tǒng)計學處理 數(shù)據(jù)記錄及分析采用WHONET5.4軟件。

2 結(jié) 果

2.1 病原菌分布 2010～2013年共接收血培養(yǎng)1 176例，分離菌株陽性標本108例，標本分離陽性率為9.18%。共分離菌株123株，其中革蘭陽性菌占48.78%（60/123），革蘭陰性菌占38.21%（47/123），真菌占13.01%（16/123）。檢出例數(shù)排前5位的病原菌依次為凝固酶陰性葡萄球菌（44例）、大腸埃希菌（18例）、肺炎克雷伯菌（15例）、白色念珠菌（10例）、金黃色葡萄球菌（7例），見表1。

2.2 臨床主要分離菌對常用抗菌藥物的耐藥性

2.2.1 白色念珠菌 白色念珠菌對酮康唑、氟康唑、咪康唑敏感，其敏感率分別為90.00%、90.00%和80.00%。白色念珠菌對益康唑和制菌霉素的敏感性均為50.00%，對二性霉素B、伊曲康唑的敏感性差，分別為40.00%、30.00%。

2.2.2 革蘭陽性菌 耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）檢出率分別為72.73%（32/44）、57.14%（4/7）。耐甲氧西林菌株（MRSA和MRCNS）較甲氧西林敏感株［甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（MSSA）和甲氧西林敏感凝固酶陰性葡萄球菌（MSCNS）］對抗菌藥物耐藥率更高，特別對左氧氟沙星和慶大霉素的耐藥率升高。未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素耐藥或中介的葡萄球菌，所有檢出的葡萄球菌對利奈唑胺敏感率為100.00%，見表2。

2.2.3 革蘭陰性菌 腸桿菌科大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β－內(nèi)酰胺酶（ESBLs）率分別為50.00%（9/18）、40.00%（6/15）。桿菌科細菌對亞胺培南、美羅培南、頭孢吡肟、頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦的腸敏感性較高。銅綠假單胞菌對頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦兩種復合劑敏感性較高，對亞胺培南、美羅培南有一定的敏感性，見表3。

3 討 論

在血流感染中，有文獻報道檢出的病原菌以革蘭陰性桿菌為主［1，4］，也有報道以革蘭陽性球菌為主，特別是以凝固酶陰性葡萄球菌為主［5－6］。本研究中，血培養(yǎng)的細菌檢出率為9.18%，以革蘭陽性菌為主（占48.78%），尤其是凝固酶陰性葡萄球菌（占35.77%），與文獻［5－6］的報道一致。革蘭陰性菌（占38.21%）中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌分別為檢出率排第二、三位的細菌。真菌檢出率為13.01%，高于文獻報道，表明不同地區(qū)、不同醫(yī)院或不同病區(qū)病原菌的分布存在一定的差異。

本研究中，白色念珠菌對酮康唑、氟康唑、咪康唑的敏感率高，當快速診斷或涂片檢查有真菌感染時，可首選這些藥物進行經(jīng)驗性用藥治療。

在分離的病原菌中，凝固酶陰性葡萄球菌排第一位，可能與采血過程中污染、條件致病感染增加有關(guān)，有報道存在血流感染凝固酶陰性葡萄球菌污染問題［7－8］，因此加強采血管理是減少血培養(yǎng)中污染的一個重要環(huán)節(jié)，同時血液培養(yǎng)中檢出凝固酶陰性葡萄球菌時，臨床還需結(jié)合患者臨床體征、其他檢查結(jié)果、患者是否有插管、血管內(nèi)置管及血液培養(yǎng)報警時間進行綜合判斷，分析患者為血流感染還是污染［7－8］。藥敏試驗發(fā)現(xiàn)，耐甲氧西林菌株（MRSA和MRCNS）較甲氧西林菌敏感菌株（MSSA和MSCNS）對抗菌藥物的耐藥率高，因此需加強對耐甲氧西林葡萄球菌的檢測與報告。目前，本院未檢出對萬古霉素和利奈唑胺耐藥及中介的葡萄球菌株，但鑒于國外有耐萬古霉素株（VRSA）的報道［9］，國內(nèi)有對萬古霉素株敏感性下降菌株、中介菌株及利奈唑胺抑制環(huán)變小的趨勢報道［10］，因此，應警惕菌株對這兩種菌株耐藥性的增加并密切監(jiān)測。

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs株分別占50.00%和40.00%，與藏婉等［1］的結(jié)果相差較大，這可能與地域、病區(qū)、患者用藥及疾病的嚴重程度有關(guān)。由于ESBLs容易引起多重耐藥，中國大腸埃希菌對第三代頭孢耐藥率達60%以上，這與中國國情，臨床好用第三代頭孢類藥物并導致ESBLs變異有關(guān)［10］。有文獻報道產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對多種抗菌藥物的耐藥率明顯高于不產(chǎn)ESBLs的菌株［1，6］。本研究未發(fā)現(xiàn)腸桿菌科細菌對亞胺培南或美羅培南耐藥，且頭孢哌酮/舒巴坦敏感率較高，提示本院重度感染腸桿菌科菌株的患者，可首選碳青酶烯類抗菌藥物治療。另外，腸桿菌科菌株對哌拉西林/他唑巴坦的敏感性也較高，因為他唑巴坦能強有力地抑制常見的CTX－M型ESBLs及DHA、CMY、ACT型質(zhì)粒AmpC酶［11］。本研究中銅綠假單胞菌只對頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦敏感率高，對其他常規(guī)檢測藥物耐藥率高，對亞胺培南和美羅培南的耐藥率也較高，這些需引起重視。

總之，抗菌藥物的使用與細菌耐藥性的產(chǎn)生有關(guān)，只有連續(xù)監(jiān)測不同細菌的耐藥情況并研究其耐藥機制才能提出有效的治療方案，指導臨床用藥。

［1］臧婉，陳偉，魯衛(wèi)平，等.321例ICU血培養(yǎng)標本常見病原菌分布及耐藥性分析［J］.重慶醫(yī)學，2012，41（28）：2927－2929.

［2］ 葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程［M］.3版.南京：東南大學出版社，2006：715－753.

［3］Clinical and Laboratory Standards Institute.MS18－M100Performance standards for antimicrobial susceptibility testing；eighteenth informational supplement［S］.Wayne，PA，USA：CLSI，2010.

［4］Lakshmi KS，Jayashree M，Singhi S，et al.Study of nosocomial primary bloodstream infections in a pediatric intensive care unit［J］.J Trop Pediatr，2007，53（2）：87－92.

［5］Passerini R，Ghezzi T，Sandri M，et al.Ten－year surveillance of nosocomial bloodstream infections：trends of aetiology and antimicrobial resistance in a comprehensive Cancer centre［J］.Ecancermedicalscience，2011，5（1）：191.

［6］ 王艷海，殷寶生，趙娜，等.血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析［J］.中華醫(yī)院感染學雜志，2013，23（20）：5054－5056.

［7］ 王堅鏹，湯瑾，莊亦暉，等.雙套血培養(yǎng)對提高血流感染檢出率和鑒別污染的評價［J］.中國感染與化療雜志，2012，12（6）：440－442.

［8］ 張紅升.血培養(yǎng)凝固酶陰性葡萄球菌陽性的評價［J］.醫(yī)藥論壇雜志，2007，28（5）：9－11.

［9］Limbago BM，Kallen AJ，Zhu W，et al.Report of the 13th vancomycin－resistant Staphylococcus aureus isolate from the United States［J］.J Clin Microbiol，2014，52（3）：998－1002.

［10］汪復，朱德妹，胡付品，等.2009年中國CHINET細菌耐藥性監(jiān)測［J］.中國感染與化療雜志，2010，10（5）：325－334.

［11］Livermore DM，Mushtaq S，Ge Y.Chequerboard titration of cephalosporin CXA－101（FR264205）and tazobactam versus beta－lactamase－producing Enterobacteriaceae［J］.J Antimicrob Chemother，2010，65（9）：1972－1974.

Analysis of drug resistance of fungi and bacteria detected by using blood culture in 1 176 cases

Yang Lijing，Yinji Zhuoma，Wu Quangui
（Department of Clinical Laboratory，Datong County Red Cross Hospital，Xining，Qinghai 810100，China）

ObjectiveTo investigate the drug resistance of fungi and bacteria detected by using blood culture from 2010to 2013.MethodsBacT/Alert 3Dblood culture system was used，Then VITEK microbiological analyzer was used to identify the bacteria and perform drug sensitivity test，the results were analyzed using WHONET5.4software.ResultsThere were 108positive specimens among 1 176samples，the detection rate was 9.18%.Among 123isolates，60strains were gram positive（48.78%），47strains were gram negative（38.21%），16strains was fungus（13.01%）.The major five kinds of pathogenic bacteria were coagulase negative staphylococcus（CNS，44strains），Escherichia coli（18strains），Klebsiella pneumoniae（15strains），candida albicans（10 strains）and Staphylococcus aureus（7strains）.The detection rate of methicillin resistant coagulase negative staphylococci（MRCNS）and Staphylococcus aureus（MRSA）were 72.73%（32/44）in CNS strains and 57.14%（4/7）in Staphylococcus aureus strains，the antibiotic resistance rates of MRSA and MRCNS were significantly higher than that of MSSA and MSCNS，none of Staphylococcus aureus strain was resistant to vancomycin and linezolid.The sensitive rate of Candida albicans to fluconazole，ketoconazole and miconazole was high.50%of Escherichia coli strains and 40%percent of Klebsiella pneumoniae strains produced extended spectrum beta－lactamases（ESBLs）.The sensitive rate of Enterobacteriaceae to imipenem and meropenem were both 100.00%.The sensitive rate of Pseudomonas aeruginosa to cefoperazone/shubatan，piperacillin/tazobactam were both high.ConclusionCNS is the major kind of bacteria in blood culture.The antibiotic resistance of bacteria is increasing and it is necessary to pay attention to blood culture results in order to guide the clinical use of drugs.

blood culture； bacteria； fungus； drug resistance； drug sensitivity test

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.007

A

1673－4130（2015）03－0303－03

楊麗靜，女，主管檢驗技師，主要從事臨床微生物學與檢驗的研究。

2014－12－15）