耿學(xué)麗， 張秀琴， 陳向華， 宗春光， 肖麗君， 宋鴻儒＊＊

(1.承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科， 河北 承德 067000 2.承 德 醫(yī) 學(xué) 院， 河北 承德 067000)

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者類風(fēng)濕因子抗環(huán)瓜氨酸抗體抗角蛋白抗體聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義*

耿學(xué)麗1， 張秀琴1， 陳向華1， 宗春光1， 肖麗君2， 宋鴻儒2＊＊

(1.承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科， 河北 承德 067000 2.承 德 醫(yī) 學(xué) 院， 河北 承德 067000)

目的:探討類風(fēng)濕因子(RF)、抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體)、抗角蛋白抗體(AKA)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)的診斷價(jià)值，及IgG、IgA、IgM、C3、C4在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中的意義。方法:采用免疫散射比濁法檢測(cè)RF、IgG、IgA、IgM、C3、C4，采用ELISA法檢測(cè)抗CCP抗體，間接免疫熒光法檢測(cè)AKA的水平，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:RA患者組RF、抗CCP抗體、AKA、IgG、IgA、IgM、C3、C4的水平均高于健康對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);RF、抗CCP抗體、AKA在RA診斷中的敏感度為95%、83.3%、68.3%，特異度為81.2%、96.9%、100%;RF、抗CCP抗體、AKA聯(lián)合檢測(cè)串聯(lián)實(shí)驗(yàn)的敏感性為58.3%，特異性為100%;RF、抗CCP抗體、AKA聯(lián)合檢測(cè)并聯(lián)實(shí)驗(yàn)的敏感性為98.3%，特異性為78.1%。結(jié)論:以上指標(biāo)對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷具有參考價(jià)值;聯(lián)合檢測(cè)在一定程度上避免了抗CCP抗體跟AKA的敏感度低，以及RF的特異性低而造成的漏診，為臨床早期診斷斷提供依據(jù)。

類風(fēng)濕因子; 抗環(huán)瓜氨酸肽抗體; 抗角蛋白抗體; 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種以累及周圍關(guān)節(jié)為主的自身免疫性疾病。目前，RA的診斷主要依靠臨床癥狀、血清類風(fēng)濕因子(RF)的檢測(cè)及影像學(xué)的檢查，但符合上述標(biāo)準(zhǔn)的患者已經(jīng)錯(cuò)過(guò)了最好的治療時(shí)機(jī)。類風(fēng)濕因子是最早應(yīng)用于RA診斷的自身抗體，但由于其特異性不高，在臨床診斷中具有一定的局限性。有研究發(fā)現(xiàn)，抗CCP抗體，AKA對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷具有較高的特異性，并在疾病的早期就可能出現(xiàn)［1］。我們對(duì)60例RA患者的RF、抗CCP抗體、抗角蛋白抗體、IgG、IgA、IgM、C3、C4進(jìn)行了檢測(cè)分析，探討這些指標(biāo)在RA診斷中的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料:RA患者60例，均為2012年5月至2013年1月承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院門診及住院患者，均符合美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)(ACR)1987年修訂的RA診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］，并排除急性感染、腫瘤及其他自身免疫性疾病等。其中男13例，女47例，年齡22～87歲，平均年齡(56.22±12.903)歲。另設(shè)正常對(duì)照組32例，其中男9例，女23例，年齡31～66歲，平均年齡(52.53±7.903)歲，均為我院體檢中心接受體檢的健康成年人(排除感染、免疫等可能與RA相關(guān)的一些疾病人群。所有受試者于研究前3個(gè)月內(nèi)均未服用過(guò)任何免疫抑制劑及激素。

1.2 標(biāo)本收集:所有受試者均于晨起空腹抽取肘靜脈血5mL，常溫自然凝固1h后，4000r/min離心10min，分離血清，－20℃冰箱保存，用于測(cè)定RF、抗CCP抗體、AKA、IgG、IgA、IgM、C3、C4的水平。

1.3 方法:以Bwckman公司生產(chǎn)的Array360特種蛋白分析儀檢測(cè)RF、IgG、IgA、IgM、C3、C4的水平，試劑由Bwckman公司提供，采用ELISA法檢測(cè)抗CCP抗體，試劑由歐盟公司提供;采用間接免疫熒光法檢測(cè)抗角蛋白抗體，試劑由歐盟公司提供，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:所有數(shù)據(jù)資料均采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料比較采用wilcoxon秩和檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;聯(lián)合檢測(cè)同時(shí)采用串聯(lián)聯(lián)和并聯(lián)的方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，RF＞20U/mL為陽(yáng)性。

2 結(jié)果

2.1 RA患者組RF、抗CCP抗體、AKA、IgG、IgA、IgM、C3、C4的水平高于健康對(duì)照組，且存在顯著性差異，見(jiàn)表1。

表1 不同組別RF、抗CCP抗體、AKA、IgG、IgA、IgM、C3、C4測(cè)定結(jié)果比較

2.2 RF、抗CCP抗體、AKA的敏感性分別為90%、83.3%，68.3%，特異性分別為81.2%，96.9，100%;聯(lián)合檢測(cè)串聯(lián)實(shí)驗(yàn)的敏感性為58.3%，特異性為100%;聯(lián)合檢測(cè)并聯(lián)實(shí)驗(yàn)的敏感性為98.3%，特異性為78.1%，見(jiàn)表2。

表2 三種指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)診斷RA的效能評(píng)價(jià) (%)

3 討 論

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一種以關(guān)節(jié)炎癥為主要臨床表現(xiàn)的自身免疫性疾病，目前，臨床上診斷RA還是以臨床癥狀為主的綜合型判斷，至今仍缺乏敏感性好，特異性高的指標(biāo)。RF是一種抗人或動(dòng)物IgG分子Fc片段抗原決定簇的抗體，它被作為1987年ACR關(guān)于RA分類標(biāo)準(zhǔn)中唯一的血清學(xué)指標(biāo)，但是早期陽(yáng)性率比較低，特異度也不高［3］，臨床實(shí)踐中，常發(fā)現(xiàn)符合標(biāo)準(zhǔn)診斷［4］的患者大多已出現(xiàn)了不可逆轉(zhuǎn)的關(guān)節(jié)損害。因此，為了更好地診斷和治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，我們需要跟其他指標(biāo)聯(lián)合檢查?？笴CP抗體是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的對(duì)診斷RA具有特異性的抗體［5］，有研究發(fā)現(xiàn)，抗CCP抗體在RA患者發(fā)病早期即可陽(yáng)性，而抗CCP抗體陽(yáng)性的患者與抗CCP陰性患者相比更易發(fā)展為侵襲性的疾?。?］，抗角蛋白抗體又稱抗絲集蛋白抗體，對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎診斷的特異性高達(dá)95～99%。AKA可以再RA發(fā)病以前若干年出現(xiàn)，對(duì)早期診斷RA有重要的臨床意義。本研究表明RA患者組RF、抗CCP抗體、AKA的水平均高于健康對(duì)照組，表明其在RA的診斷中具有一定的臨床意義;RF、抗CCP抗體、AKA串聯(lián)實(shí)驗(yàn)在RA診斷中的特異性為100%，并聯(lián)實(shí)驗(yàn)在RA診斷中的敏感性為98.3%，從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出，聯(lián)合檢測(cè)這三種抗體比單獨(dú)檢測(cè)的敏感性和特異性均有顯著提高，故聯(lián)合檢測(cè)有助于RA的早期診斷和病情預(yù)測(cè)。

IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是血液和細(xì)胞外液的主要抗體，也是機(jī)體再次免疫應(yīng)答的主要抗體。IgA是參與黏膜局部免疫的主要抗體，IgM是抗原刺激誘導(dǎo)的體液免疫中最早出現(xiàn)的抗體。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，RA患者血清中3種免疫球蛋白均高于正常對(duì)照組，表明體液免疫參與了RA的發(fā)病過(guò)程。補(bǔ)體在維持機(jī)體的免疫自穩(wěn)及在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病過(guò)程中具有重要的作用，本研究表明，RA患者補(bǔ)體的水平均低于正常對(duì)照組，與相關(guān)的研究相吻合，這可能是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者中補(bǔ)體消耗而導(dǎo)致的補(bǔ)體水平降低，對(duì)臨床診療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎具有一定的參考價(jià)值。

［1］劉冰，郝鐵，陳霞，等.聯(lián)合檢測(cè)ANA、AKA、抗－CCP和RF在診斷類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中的臨床意義［J］.標(biāo)記免疫分析與臨床，2013，20(2):109～110.

［2］Arnett FC，Edworthy SM，Bloch DA，et al.The american rheumatism association 1987 revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis［J］.Arthritis Heum，1988，31 (18):315～324.

［3］Shin Ys，Choi JH，et al.Rheumatoid factor is a marker of disease severity in Korean rheumatoid arthritis［J］.Yonsei Med，2005，(46):464～470.

［4］Song YW，Kang EH.Autoantibodis in rheumatoid arthritis rheumatoid factors and anticitrullinated protein antibodies［J］.QJM，2010，103(3):139～146.

［5］曾瑜，陳明，蔡美珠，等.抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和類風(fēng)濕因子聯(lián)合檢測(cè)對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷價(jià)值［J］.中國(guó)臨床醫(yī)學(xué)，2006，13(6):1022.

［6］Alenius GM，Berglin E，Rantap，et al.Antibodies against cyclic citrullinated petide(CCP)in psoriatic patients with or without joint inflammation［J］.Ann Rheum Dis，2006，65 (3):398～400.

［7］馬海芳，張文蘭，胡同平.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者免疫指標(biāo)的檢測(cè)分析［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7(11):1116～1117.

Diagnostic Value of Combined Determination of anti－CCP AKA in Patients with Rheumatoid Arthritis

GENG Xueli， ZHANG Xiuqin， CHEN Xianghua， et al
(The Affiliated Hospital of Chengde Medical College，Hebei Chengde067000，China)

Objective:To evaluate the diagnostic value of combined determination of rheumatoid factor (RF)，anti－cyclic citrulline peptide(anti－CCP)antibody，and antikeratin antibody(AKA)in patients with rheumatoid arthritis(RA)，and significance of IgG，IgA，IgM，C3 and C4 in rheumatoid arthritis.Method:Scattering method adopts immune turbidimetry was used to detect the level of RF，IgG，IgA，IgM，C3，C4 and measured the levels of anti–CCP by ELISA and measured the levels of AKA indirect immunofluorescence method，and the results were analyzed statisticy.Result:The level of RF，anti－CCP antibody，AKA，IgG，IgA，IgM，C3 and C4 in the serum of RA patients was higher than the normal control group，and the difference was statistically significant(P＜0.05)，the diagnostic sensitivity of The RF，anti－CCP antibody，AKA were 95%，83.3%，68.3%respectively，The specificity were 81.2%，96.9%，100%;sensitivity of series experiments was 58.3%and the specificity was 100%with combined determination of RF，anti－CCP antibody，AKA，sensitivity of parallel experiment was 98.3%and the specificity was 78.1%with combined determination of RF，anti－CCP antibody，AKA.Conclusion:It has reference value to the diagnosis of rheumatoid arthritis.It＇s certain extent to avoid the low sensitivity of anti－CCP antibody and AKA with joint detection，and RF occur due to the specificity of diagnosis，It provids the basis for early diagnosis of RA.

Rheumatoid factor; Anti－cyclic citrulline peptide antibody; Antikeratin antibody; Rheumatoid arthritis

B

10.3969/j.issn.1006－6233.2015.05.010

1006－6233(2015)05－0736－04

河北省承德市科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目，(編號(hào):20132059)

＊＊ 通訊作者