邱敏，寧志豐，劉復(fù)興

(湖北科技學(xué)院，湖北咸寧437100)

食管癌腫瘤標(biāo)志物研究的新進(jìn)展*

邱敏，寧志豐，劉復(fù)興＊＊

(湖北科技學(xué)院，湖北咸寧437100)

食管癌;腫瘤標(biāo)志物;進(jìn)展

食管癌是惡性程度較高的腫瘤之一，在全球惡性腫瘤的發(fā)病率中排第7位，腫瘤死亡率排第5，5年生存率在20%～40%之間［1］。多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)食管癌時(shí)已是中晚期，盡管手術(shù)治療和放化療技術(shù)在提高，臨床上仍有較高的復(fù)發(fā)率且預(yù)后較差，因此尋找有效的腫瘤標(biāo)志物，能早期診斷食管癌，指導(dǎo)治療，判斷預(yù)后和監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)，將對(duì)食管癌患者的治療具有十分重要的意義。本文就近年來報(bào)道的食管癌腫瘤標(biāo)志物作一綜述，分別從蛋白、基因等角度進(jìn)行介紹。

1 特異性蛋白的異常表達(dá)

高遷移率蛋白(High－mobility group box－1，HMGB1)是一種真核生物細(xì)胞內(nèi)的非組蛋白染色體結(jié)合蛋白，陳傳貴等［2，3］運(yùn)用免疫組化方法對(duì)72例食管鱗癌標(biāo)本進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)HMGB1在食管鱗癌組織中高表達(dá)，陽性率高達(dá)69.44%，在正常組織中很少表達(dá)，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織中表達(dá)率為81.82%。隨后的實(shí)驗(yàn)中，作者檢測(cè)78例食管癌患者術(shù)前血清HMGB1，其中陽性率為84.6%，并且HMGB1濃度與腫瘤大小，浸潤(rùn)深度，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤分期明顯相關(guān)。與傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物CEA、Cyfra21－1和SCC比較，HMGB1的敏感性和特異性更高，因此，HMGB1可作為食管鱗癌診斷、判斷預(yù)后和監(jiān)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)的一個(gè)標(biāo)志物。

突觸核伽瑪?shù)鞍?SNCG)是神經(jīng)元蛋白家族核蛋白的一員，在正常組織中低表達(dá)，在多種腫瘤組織中高表達(dá)。Tastekin等［4］通過免疫組化測(cè)量73例食管癌患者組織中SNCG水平，運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示SNCG陽性與不良預(yù)后明顯相關(guān)，因此，SNCG可作為食管癌患者不良預(yù)后的標(biāo)志物。

Kuo等［5］檢測(cè)154例食管癌患者中有73例(47.4%)低表達(dá)SOX17蛋白，且預(yù)后不良。SOX17在食管癌細(xì)胞中再表達(dá)后，集落形成減少和細(xì)胞遷移能力下降，在食管癌動(dòng)物模型中，腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移均下降。敲除SOX17基因后則食管癌細(xì)胞和正常的食管細(xì)胞的集落形成均增加。所以，SOX17蛋白的低表達(dá)是食管鱗癌的一個(gè)預(yù)后標(biāo)志物，并且可以作為一個(gè)潛在的治療靶點(diǎn)。

Zheng等［6］meta分析血清CRP水平與不良總體生存率明顯相關(guān)(HR 2.09，95%CI 1.52～2.87，P＜0.01)，CRP水平的升高與TNM分期成正相關(guān)，因此血清CRP水平也可以作為一個(gè)有效的預(yù)后預(yù)測(cè)標(biāo)志物。

2 酶的異常表達(dá)

蛋白激酶D1(PRKD1)是調(diào)節(jié)涉及增殖、凋亡、細(xì)胞粘附和侵襲的很多通路的一種酶。Xie等［7］采用RT－PCR法測(cè)定178例ESCC患者組織中PRKD1 mRNA的表達(dá)，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)癌組織的PRKD1 mRNA較對(duì)應(yīng)的癌旁組織表達(dá)上調(diào)，在重度吸煙患者中普遍高表達(dá)，多變量分析PRKD1 mRNA是ESCC患者術(shù)后的一個(gè)獨(dú)立的預(yù)后因子，可作為重度吸煙的食管癌患者的一個(gè)獨(dú)立的預(yù)后標(biāo)志物。

基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP－2)和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑2(TIMP－2)在食管癌組織中表達(dá)，且與腫瘤分期、臨床病理特征和患者生存率相關(guān)。Groblewska等［8］通過測(cè)定53例EC患者和92名健康對(duì)照組的血清MMP－2和TIMP－2，并與傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物CEA和SCC比較，發(fā)現(xiàn)MMP－2和TIMP－2的血清濃度較CEA和SCC低，其中TIMP－2的診斷敏感性為57%，且與SCC聯(lián)合檢測(cè)時(shí)增加到70%。因此可將TIMP－2與SCC聯(lián)合使用來輔助診斷食管癌。

3 細(xì)胞因子及受體

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)是促進(jìn)血管生成的主要原因之一，目前已經(jīng)在很多種腫瘤及細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)VEGF通過生成和維持血管網(wǎng)從而促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)和增殖。Chen等［9］系統(tǒng)回顧31篇研究2387例食管癌患者，meta分析結(jié)果顯示高表達(dá)VEGF，則患者死亡風(fēng)險(xiǎn)提高1.82倍，且VEGF水平與腫瘤體積、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)，多因素分析顯示VEGF高表達(dá)是一項(xiàng)獨(dú)立的預(yù)后因素。因此VEGF可作為食管癌的一個(gè)不良預(yù)后標(biāo)志物。

巨噬細(xì)胞集落刺激因子(macrophage－colony stimulating factor，M－CSF)在很多腫瘤細(xì)胞中異常表達(dá)，對(duì)腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)展起著重要的調(diào)控作用。Mroczko等［10］通過檢測(cè)80例食管癌患者和30例健康對(duì)照測(cè)試者的血清M－CSF、CEA、SCC－Ag的濃度，發(fā)現(xiàn)食管癌患者血清M－CSF、CEA、SCC－Ag的濃度較健康測(cè)試者明顯升高，且M－CSF的濃度隨腫瘤浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)數(shù)目及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移而增長(zhǎng)，與SCC－Ag聯(lián)合檢測(cè)時(shí)陽性率增高。因此M－CSF可作為食管癌的一個(gè)潛在的血清腫瘤標(biāo)志物。

Mrkuuchi等［11］通過對(duì)37例患者經(jīng)過相同放化療治療及手術(shù)治療的療效進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)30例療效不佳的患者血清可溶性白介素6受體(sIL6R)明顯升高，多變量分析sIL6R是個(gè)不良預(yù)后因子，因此血清sIL6R升高意味著術(shù)前放化療效果不佳，從而能指導(dǎo)進(jìn)行個(gè)體化治療，避免不必要的放化療。

4 基因的異常表達(dá)

再生基因4(Regenerating gene IV，Reg IV)與消化道上皮細(xì)胞增殖、炎癥反應(yīng)及腫瘤生成密切相關(guān)。Oue等［12］運(yùn)用免疫組化檢測(cè)269例食管癌組織Reg IV的表達(dá)，并且測(cè)量65例食管鱗癌患者的血清Reg IV濃度，其中255例SCC和4例小細(xì)胞癌組織中沒有發(fā)現(xiàn)Reg IV，而10例食管腺癌組織中有4例檢測(cè)到Reg IV，食管鱗癌患者的血清Reg IV濃度較健康對(duì)照組明顯增高。結(jié)果提示Reg IV對(duì)食管腺癌的有較高的特異性，因此Reg IV可作為食管癌的一個(gè)潛在的血清腫瘤標(biāo)志物。

長(zhǎng)鏈非編碼RNA HOTAIR在多種腫瘤組織中表達(dá)上調(diào)，發(fā)揮著癌基因的作用。Lv等［13］在食管癌組織中發(fā)現(xiàn)HOTAIR表達(dá)水平顯著增高，食管癌患者中高表達(dá)HOTAIR與臨床時(shí)期、TNM分期、組織分化明顯成正相關(guān)。HOTAIR是個(gè)獨(dú)立預(yù)后因子，高表達(dá)HOTAIR則總體5年生存率明顯低于HOTAIR陰性患者。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)HOTAIR在食管癌細(xì)胞株中參與增殖、克隆形成和遷移能力。因此，HOTAIR可作為食管癌的一個(gè)潛在的預(yù)后標(biāo)志物。

Numb基因在多種腫瘤組織中表達(dá)降低，且與腫瘤分期、分級(jí)及預(yù)后相關(guān)，發(fā)揮著抑癌基因的作用。Hong等［14］通過比較75例食管鱗癌患者的癌組織與癌旁組織的NUMB－1 mRNA，發(fā)現(xiàn)癌組織UMB－1 mRNA的下調(diào)66.7%，且NUMB－1的低表達(dá)與腫瘤的高復(fù)發(fā)及術(shù)后總體低生存率相關(guān)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)NUMB－1通過誘導(dǎo)G2/M相停止從而抑制細(xì)胞增長(zhǎng)，過表達(dá)NUMB－1抑制了上皮－間質(zhì)化轉(zhuǎn)化，抑制細(xì)胞侵襲和NOTCH通路。因此，我們可以認(rèn)為NUMB－1是一種腫瘤的抑制因子，能作為食管癌患者的預(yù)后標(biāo)志物。

Hibino等［15］發(fā)現(xiàn)DENND2D mRNA在ESCC細(xì)胞株(8/9)和手術(shù)標(biāo)本(59/65)中表達(dá)下調(diào)，在癌組織中較對(duì)應(yīng)的癌旁組織表達(dá)下調(diào)，多變量分析DENND2D mRNA在食管癌組織中是個(gè)獨(dú)立的預(yù)后因子，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)DENND2D在食管癌中通過啟動(dòng)子甲基化被滅活，因此，DENND2D是食管鱗癌的一個(gè)抑癌基因，可作為食管鱗癌的一個(gè)新的標(biāo)志物。

5 miRNA

miRNA是一種內(nèi)源性的小分子功能性RNA，不編碼蛋白質(zhì)，參與基因的調(diào)控。miRNA與腫瘤組織密切相關(guān)，可發(fā)揮抑癌基因作用或癌基因作用。Wang等［16］檢測(cè)46例相同時(shí)期的食管癌術(shù)后患者的miR－197，以對(duì)應(yīng)的癌旁組織作為對(duì)照，分析miR－197的表達(dá)和臨床病理特征的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)miR－197表達(dá)低的患者預(yù)后更差，高表達(dá)則存活時(shí)間更長(zhǎng)，說明miR－197可作為食管癌的抑癌基因和預(yù)后標(biāo)志物。Liu等［17］發(fā)現(xiàn)miR－139－5p在食管鱗癌中通過靶向抑制癌基因NR5A2從而誘導(dǎo)細(xì)胞周期停止在G0/G1期，抑制了食管癌細(xì)胞的增殖和侵襲能力，且miR－139－5p水平的下降與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，說明miR－139－5p在食管鱗癌組織中發(fā)揮著抑癌基因的作用，能作為食管癌早期診斷、預(yù)后和治療的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。

6 甲基化

甲基化是復(fù)制后及轉(zhuǎn)錄后的一種重要修飾，DNA甲基化能關(guān)閉某些基因的活性，去甲基化則誘導(dǎo)了基因的重新活化和表達(dá)。Das等［18］檢測(cè)100例食管癌患者血清的MGMT甲基化狀態(tài)，其中70%的患者存在MGMT基因啟動(dòng)子的異常甲基化。分析顯示MGMT甲基化的增加與當(dāng)?shù)厝顺闊煛⒔罊壚频纫蛩赜嘘P(guān)，而MGMT甲基化使MGMT基因沉默從而導(dǎo)致食管癌的發(fā)生和發(fā)展。因此MGMT甲基化可作為篩選食管癌高風(fēng)險(xiǎn)人群的一個(gè)標(biāo)志物。內(nèi)皮因子(ENG)是個(gè)跨膜蛋白，功能上作為轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子－受體的一部分，ENG啟動(dòng)子高甲基化在很多腫瘤中已經(jīng)報(bào)道了。Jin等［19］發(fā)現(xiàn)ENG甲基化值在食管鱗癌中明顯高于正常組織，ENG高甲基化在食管鱗癌組織中頻率為46.2%，正常食管組織中頻率為11.9%。因此ENG啟動(dòng)子甲基化有希望成為早期檢測(cè)食管癌的一個(gè)潛在的標(biāo)志物。

7 其他標(biāo)志物

Fujishiro等［20］運(yùn)用肝臟CT灌注成像，對(duì)45例食管癌患者進(jìn)行術(shù)前檢查，通過軟件分析動(dòng)脈血流(AF)、肝門血流(PF)和灌流指數(shù)(PI=AF/ AF+PF×100)，這些參數(shù)與病理分期和預(yù)后相比較，平均隨訪17個(gè)月，有9例患者復(fù)發(fā)，這9例患者的PI值明顯高于其余的沒有復(fù)發(fā)的36例患者。患者分成如下兩組，高PI組(＞20)和低PI組(＜20)，低PI組的無復(fù)發(fā)生存率明顯高于高PI組，多變量分析顯示高PI是復(fù)發(fā)的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。因此，術(shù)前肝臟灌流值PI可作為預(yù)測(cè)食管癌患者復(fù)發(fā)的一個(gè)有效的影像學(xué)標(biāo)志物。

8 結(jié)語

食管癌是最常見的消化系統(tǒng)腫瘤之一，惡性程度高，預(yù)后較差。目前食管癌的確診仍依賴影像學(xué)及病理檢查，尚無特異性的食管癌標(biāo)志物在臨床上使用，因此尋找特異性的腫瘤標(biāo)志物，能檢測(cè)食管癌的早期變化，提高早期診斷率，改善中晚期患者的治療及監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，將具有十分重要的意義。

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R735.1

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2095－4646(2015)01－0079－04

2014－11－23)

湖北省教育廳重點(diǎn)項(xiàng)目(D20122802)

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