伊 潔，鄭力勝，竇亞玲(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100730)

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·論 著·

血漿1,3-β-D葡聚糖對(duì)卡氏肺孢子菌肺炎的診斷價(jià)值

伊 潔，鄭力勝，竇亞玲△
(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100730)

目的 探討應(yīng)用血漿1,3-β-D葡聚糖(BG)用于診斷卡氏肺孢子菌肺炎的臨床價(jià)值。方法 選取確診卡氏肺孢子菌肺炎(PCP)的患者50例， 卡氏肺孢子菌(PC)定植的患者50例及同期非PC定植的患者50例，檢測(cè)其血漿中的BG濃度。結(jié)果 PCP患者血漿BG的中位數(shù)是698.5 pg/mL[四分位距(IQR)：184.4～1 256.0 pg/mL] ，高于PC定植患者和非PC定植患者的血漿BG中位數(shù)66.5pg/mL(IQR：50.0～91.0 pg/mL)、135.9 pg/mL(IQR：54.0～556.3 pg/mL)。PCP患者血漿BG的平均水平是(1 022.8±982.6)pg/mL，明顯高于PC定植[(74.7±33.6)pg/mL]和非PC定植[(562.7±934.9)pg/mL]患者血漿BG的平均水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。以151.5 pg/mL為陽性臨界值時(shí)，血漿BG診斷PCP的敏感性、特異性、陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別是96.0%、74.0%、64.9%和97.4%。以血漿BG作為PCP的診斷方法時(shí)，AUC為0.89。 結(jié)論 血漿BG可以作為PCP的一個(gè)早期診斷指標(biāo)，同時(shí)可以根據(jù)BG結(jié)果鑒別PCP或PC定植。

1,3-β-D葡聚糖； 卡氏肺孢子菌肺炎； 卡氏肺孢子菌定植

卡氏肺孢子菌(PC)是一種機(jī)會(huì)感染性真菌，在使用免疫抑制劑患者及艾滋病等免疫缺陷患者中，PC所致的卡氏肺孢子菌肺炎(PCP)是最常見的感染和致死原因之一[1]。由于PC難以培養(yǎng)，因此傳統(tǒng)的PCP診斷是通過涂片鏡檢進(jìn)行的。但是由于其敏感性不高，有時(shí)檢查甚至是有創(chuàng)的[2-4]，因此近年來出現(xiàn)敏感性較高的PCR診斷方法，而PCR的弊端是無法分辨PC是定植還是感染[5]。有國(guó)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)，檢測(cè)血漿1,3-β-D葡聚糖(BG)濃度對(duì)深部真菌感染的早期診斷具有重要參考價(jià)值[6-8]。本研究通過分析50例PCP患者、50例PC定植患者以及50例非PC定植患者血漿BG水平，評(píng)價(jià)血漿BG水平作為診斷PC及鑒別PCP與PC定植的臨床價(jià)值，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 研究對(duì)象 選取2012年12月至2014年12月北京協(xié)和醫(yī)院收治住院的確診PCP患者50例，PC定植患者50例，非PC定植患者50例。50例PCP患者中男30例、女20例，平均(57.2±15.8)歲；50例PC定植患者中男23例、女27例，平均(56.6±18.2)歲；50例非PC定植患者中男34例、女16例，平均(51.8±20.3)歲。三組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.1.2 入組標(biāo)準(zhǔn) 以六胺銀染色鏡檢痰或支氣管肺泡灌洗液(BALF)發(fā)現(xiàn)PC孢子確診為PCP；痰或BALF標(biāo)本中PC DNA檢測(cè)到PC但是六胺銀染色鏡檢未檢測(cè)到PC孢子被認(rèn)為是PC定植。痰或BALF標(biāo)本中PC DNA和六胺銀染色鏡檢均未檢測(cè)到PC被認(rèn)為是非PC定植。所有患者均有肺炎癥狀(包括不正常的胸部X線片結(jié)果或咳嗽)或發(fā)熱。

1.2 方法

1.2.1 血漿BG檢測(cè) 采用湛江安度斯BG檢測(cè)試劑，檢測(cè)方法按照說明書進(jìn)行。結(jié)果判斷：血漿BG<100.5 pg/mL為陰性，100.5～150.5pg/mL為可疑，≥151.5 pg/mL為陽性。

1.2.2 PC DNA檢測(cè) 采用PCR進(jìn)行PC DNA的檢測(cè)[9]，PCR產(chǎn)物經(jīng)2%凝膠電泳分析，陽性產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序驗(yàn)證。

2 結(jié) 果

2.1 各組患者血漿BG檢測(cè)結(jié)果比較PCP組與PC定植組和非PC定植血漿BG平均水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

2.2 血漿BG敏感性與特異性 以151.5pg/mL為PCP的陽性臨界值時(shí)，該試驗(yàn)的敏感性是96.0%(48/50)，特異性是74.0%(74/100)，陽性預(yù)測(cè)值是64.9%(48/74)，陰性預(yù)測(cè)值是97.4%(74/76)。不同BG水平患者例數(shù)分布見表2。

2.3ROC曲線 以血漿BG作為PCP的診斷方法時(shí)，ROC曲線AUC為0.89，見圖1。

表1 三組患者的BG結(jié)果比較(pg/mL)

表2 不同BG水平患者例數(shù)分布比較[n(%)]

圖1 1,3-β-D-葡聚糖作為PCP診斷方法的ROC曲線

3 討 論

PC存在感染與定植兩種情況，Damiani等[10]人發(fā)現(xiàn)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR可以根據(jù)PC拷貝數(shù)不同來區(qū)分PC感染或定植，但是拷貝數(shù)的臨界值很難確定。血漿BG是酵母及絲狀真菌細(xì)胞壁的多聚糖成分，不存在于人體中，病毒及其他原核生物也不攜帶，血漿中BG水平與PCP的關(guān)系值得探討。本研究將患者分為3組， 即PCP組、PC定植組和非PC定植組，分別進(jìn)行血漿BG水平檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PCP組患者血漿BG水平為(1 022.8±982.6)pg/mL，遠(yuǎn)高于PC定植和非PC定植組(P<0.05)，這與之前的研究是一致的[11-12]。非PC組中患者可能患有其他的侵襲性真菌感染，因此血漿BG較PC定植組高，但是卻低于PCP組。PCP組血漿BG的中位數(shù)是698.5pg/mL，也高于非PC感染組和PC定植組，說明PCP患者血漿BG普遍偏高。因此血漿BG可以很好地區(qū)分PCP和PC定植，當(dāng)血漿BG水平異常高時(shí)要高度懷疑PCP。由于血漿BG檢測(cè)試劑不同，結(jié)果不同，因此陽性結(jié)果的臨界值也不同。本研究以試劑生產(chǎn)商提供的151.5pg/mL為陽性臨界值，評(píng)估了血漿BG水平檢測(cè)判斷PCP的敏感性、特異性、陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值。結(jié)果發(fā)現(xiàn)血漿BG水平檢測(cè)的敏感性達(dá)96.0%，高于六胺銀染色鏡檢結(jié)果(55.0%)[2]。有2例PCP患者血漿BG檢測(cè)結(jié)果介于100.5～151.5pg/mL，屬于弱陽性需要繼續(xù)觀察。血漿BG并不是一種針對(duì)PCP的特異檢測(cè)方法，曲霉菌、念珠菌、鐮刀菌等感染均會(huì)導(dǎo)致其陽性結(jié)果。血漿BG診斷PCP的特異性(74.0%)低于六胺銀染色鏡檢結(jié)果(99.0%)[2]，陽性預(yù)測(cè)值為64.9%，因此其并不能很好地區(qū)分PCP和其他真菌感染。但是血漿BG陰性預(yù)測(cè)值可達(dá)到97.4%，這對(duì)于排除PCP的診斷價(jià)值較高。ROC曲線AUC為0.89，表明血漿BG水平檢測(cè)判斷作為PCP的總體診斷價(jià)值較好。由于血漿BG檢測(cè)容易受到干擾因素的影響，使用某些抗生素會(huì)導(dǎo)致BG實(shí)驗(yàn)數(shù)值升高，本研究中檢測(cè)血漿BG水平時(shí)，根據(jù)試劑生產(chǎn)商的說明書，遇到假陽性時(shí)將標(biāo)本進(jìn)行稀釋重新進(jìn)行檢測(cè)，盡可能地排除干擾因素的影響。

總之，血漿BG水平檢測(cè)作為一種非侵入性檢驗(yàn)方法，可以早期有效地輔助診斷PCP，并將PCP與PC定植區(qū)分開來。當(dāng)血漿BG檢測(cè)結(jié)果為陽性且數(shù)值較高且PCDNA檢測(cè)陽性時(shí)，臨床醫(yī)生要結(jié)合患者的臨床癥狀來判斷是否是PCP，當(dāng)BG檢測(cè)結(jié)果為陰性時(shí)基本可以排除PCP，既避免了有創(chuàng)性的檢查給患者帶來的痛苦，又減少了因PC定植而導(dǎo)致的誤診可能性。

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Clinical value of plasma 1,3-β-D glucan in diagnosis of Pneumocystis carinii pneumonia

YIJie,ZHENGLi-sheng,DOUYa-ling△
(DepartmentofClinicalLaboratory,PekingUnionMedicalCollegeHospital,ChineseAcademyofMedicalSciences,Beijing100730,China)

Objective To explore the clinical value of plasma 1,3-β-D glucan in the diagnosis of Pneumocystis carinii pneumonia(PCP).Methods 50 patients with PCP,50 patients with Pneumocystis carinii(PC) colonization and contemporaneous 50 patients without PC colonization were recruited as the study subjects and tested for plasma 1,3-β-D glucan(BG).Results Median plasma BG in the PCP patients was 698.5 pg/mL[interquartile range(IQR):184.4-1 256.0 pg/mL],which was higher than 66.5 pg/mL(IQR:50.0-91.0 pg/mL) in the PC colonization and 135.9 pg/mL(IQR:54.0-556.3 pg/mL) in the PC noncolonization patients,respectively.The average level of plasma BG in the PCP patients was (1 022.8±982.6)pg/mL,which was also higher than (74.7±33.6)pg/mL and (562.7±934.9)pg/mL in the PC colonization and PC noncolonization patients,respectively.The difference of the average levels among three groups was statistically significant(P<0.05).With 151.5 pg/mL as the positive critical value,the sensitivity,specificity,positive and negative predictive values of plasma BG for diagnosing PCP were 96.0%,74.0%,64.9% and 97.4% respectively.With plasma BG as the diagnostic method of PCP,the area under the curve(AUC) of receiver operating characteristic(ROC) curve was 0.89.Conclusion The plasma BG can be used as an early diagnostic indicator of PCP,which also can differentiate PCP from PC colonization.

1,3-β-D glucan; Pneumocystis carinii pneumonia; Pneumocystis carinii colonization

伊潔，女，研究實(shí)習(xí)員，博士，主要從事病原微生物與腫瘤分子生物學(xué)檢測(cè)研究?！?/p>

，E-mail：douyling@163.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.22.017

A

1672-9455(2015)22-3337-02

2015-05-03

2015-09-08)