陳日壽，張健清

(1.廣東省東莞市中醫(yī)院檢驗科 523000;2.中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗醫(yī)學(xué)部，廣州 510000)

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·論 著·

血清可溶性Endoglin檢測在胰腺癌診斷中的應(yīng)用

陳日壽1，張健清2

(1.廣東省東莞市中醫(yī)院檢驗科 523000;2.中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗醫(yī)學(xué)部，廣州 510000)

目的 探討胰腺癌患者血清中可溶性Endoglin的表達水平及其臨床意義。方法 應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定50例胰腺癌患者、30例胰腺炎患者和50例健康對照者血清中Endoglin水平，同時應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法測定CA-199，并進行比較分析。結(jié)果 胰腺癌組、胰腺炎組和健康對照組血清中Endoglin水平分別是(5.68±0.91)、(3.75±0.77)、(3.55±0.65)μg/L。胰腺癌組Endoglin表達水平高于胰腺炎組和健康對照組(P<0.01)。在胰腺癌的診斷中Endoglin的陽性率為70%。結(jié)論 血清Endoglin在胰腺癌中高表達，有助于胰腺癌的臨床診斷。

癌； 胰腺腫瘤； 可溶性Endoglin

胰腺癌惡性程度高，病死率高，由于早期缺乏典型的臨床表現(xiàn)，診斷時已經(jīng)失去根治的機會[1-3]。早期診斷早期治療尤為重要。血清腫瘤標(biāo)志物水平測定簡便經(jīng)濟，而胰腺癌實驗室輔助診斷標(biāo)準(zhǔn)物主要有血清糖類抗原199(CA-199)，有待發(fā)現(xiàn)更多敏感性高的標(biāo)志物。Endoglin主要在血管內(nèi)皮細胞上表達，在造血祖細胞、成纖維細胞、間質(zhì)細胞上表達較少，很少在淋巴管內(nèi)皮細胞上表達。細胞膜糖蛋白Endoglin通過調(diào)節(jié)細胞對轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)的反應(yīng)，參與血管發(fā)育和重塑[3-7]。Endoglin在腫瘤新生的血管內(nèi)皮細胞核腫瘤組織邊緣部分血管內(nèi)皮細胞中高表達，已成為抑制腫瘤血管生成、治療腫瘤的理想分子靶位[6-9]。Endoglin在血管生成中是必需的，其在多種腫瘤組織均高表達，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。本研究通過檢測胰腺癌患者外周血中Endoglin濃度，探討其在胰腺癌中的濃度變化及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年5月至2014年5月胰腺癌患者50例，男30例，女20例，平均年齡47歲。均經(jīng)臨床及病理組織學(xué)確診，臨床資料齊全。胰腺炎患者30例，男18例，女12例，平均年齡43歲。健康體檢對照組50例，男28例，女22例，平均年齡49歲。任何兩組患者的一般資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

1.2 儀器與試劑 Endoglin試劑盒購于美國Genzyme公司(批號CYT-2013)，酶標(biāo)儀購于芬蘭Thermo Lad Systems公司(型號MK3)。CA-199試劑盒為德國羅氏原裝試劑盒，測定儀器為德國羅氏Cobale601。

1.3 方法 抽取待測者治療前空腹靜脈血2 mL，離心分離血清后置于聚丙二醇脂試管內(nèi)-70 ℃冰箱保存待測。分離的血清標(biāo)本均無溶血、脂血。采用雙抗體夾心法測定Endoglin，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作，正常參考范圍0～4.5 μg/L；CA-199采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(ECLIA)測定，正常參考范圍0～37 U/mL。

2 結(jié) 果

2.1 各組血清中Endoglin水平比較 胰腺癌組血清中Endoglin表達水平明顯高于胰腺炎組和健康對照組(P<0.01)；胰腺炎組與健康對照組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

2.2 Endoglin在胰腺癌診斷中的檢測結(jié)果 胰腺癌組Endoglin的陽性率為70%(35/50)，CA-199的陽性率為72%；Endoglin診斷胰腺癌的敏感性為70%，特異性為97.5%，陽性預(yù)測值為94.6%，陰性預(yù)測值為83.9%；CA-199診斷胰腺癌的敏感性為72%，特異性為95%，陽性預(yù)測值為90%，陰性預(yù)測值為84.4%。見表2。

表1 各組血清中Endoglin水平比較

注：與胰腺炎組和健康對照組比較，均aP<0.01,cP<0.05；與健康對照組比較，bP>0.05。

表2 各組血清中Endoglin水平比較[%(n/n)]

3 討 論

近年來，胰腺癌的發(fā)病率逐年增加，由于該病缺乏早期典型的臨床表現(xiàn)，診斷時已錯過最佳治療時機，所以早診斷、早治療非常重要[2-3]。實驗室的輔助診斷主要依賴腫瘤標(biāo)志物的檢測，但胰腺癌的相關(guān)腫瘤標(biāo)志物較少，主要有CA-199。CA-199決定族是在糖蛋白或糖脂分子上的一個含唾液酸的五糖鏈，相對分子質(zhì)量大于5 000 000。正常人體組織中很微，消化道惡性腫瘤，特別是胰腺癌、膽囊癌患者血清CA-199含量明顯升高，該腫瘤輔助診斷指標(biāo)對監(jiān)測病情變化和復(fù)發(fā)有很大的價值。但是在某些消化道炎癥，如急性胰腺炎、膽囊炎、膽汁淤積性膽管炎、肝炎、肝硬化等疾病，CA-199也有不同程度的升高，使得其輔助診斷胰腺癌特異性不高。Endoglin蛋白基因位于第9號染色體，產(chǎn)物含633個氨基酸，是一種同型二聚體的膜結(jié)合性糖蛋白。Endoglin又名CD105，為細胞膜糖蛋白，是相對分子質(zhì)量為180×103的同型二聚體膜結(jié)合性糖蛋白，有633個氨基酸組成，主要由561個氨基酸組成的胞外區(qū)，含25個氨基酸的跨膜區(qū)和一個短的富含絲氨酸和蘇氨酸的胞內(nèi)區(qū)組成[9-12]。Endoglin是血管生成的必需的，而血管生成是腫瘤生長所需的，是腫瘤侵襲的重要的途徑。Endoglin存在多種腫瘤組織的內(nèi)皮細胞中，是腫瘤血管生成標(biāo)志[5]。

本研究定量檢測血清中的Endoglin采用雙抗體夾心法，能夠特異地捕獲血清中微量的Endoglin，該法所用兩種單克隆抗體分別針對Endoglin不同部位，特異性好。本研究結(jié)果證明胰腺癌患者血清中Endoglin水平遠高于胰腺炎患者與健康人，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。既往研究顯示Endoglin表達在腫瘤組織內(nèi)皮細胞中，腫瘤細胞壞死或轉(zhuǎn)移過程中釋放Endoglin進入血循環(huán)，使得血清中的Endoglin水平升高。本研究結(jié)果顯示，Endoglin在腫瘤的測定中具有重要臨床意義。胰腺癌組Endoglin的陽性率為70%(35/50)，CA-199的陽性率為72%；Endoglin診斷胰腺癌的敏感性為70%，特異性為97.5%，陽性預(yù)測值為94.6%，陰性預(yù)測值為83.9%；CA-199診斷胰腺癌的敏感性為72%，特異性為95%，陽性預(yù)測值為90%，陰性預(yù)測值為84.4%。而血清相對于腫瘤組織標(biāo)本更易于獲得，在早期輔助診斷中更有意義。但由于Endoglin功能未完全闡明，其實用性有待一步深入研究。

綜上所述，Endoglin可能在胰腺癌的發(fā)生起關(guān)鍵作用，其水平的過表達與胰腺癌的發(fā)生有重要關(guān)系，其可能有助于胰腺癌的早期診斷，值得進一步深入研究。

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Application of serum soluble Endoglin detection in diagnosis of pancreatic carcinoma

CHENRi-shou1,ZHANGJian-qing2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,DongguanMunicipalHospitalofTraditionalChineseMedicine,Dongguan,Guangdong523000,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,FirstAffiliatedHospital,SunYat-senUniversity,Guangzhou,Guangdong510080,China)

Objective To investigate the expression level of serum soluble Endoglin in the patients with pancreatic carcinoma and its clinical significance.Methods The expression level of serum Endoglin was measured by ELISA in 50 health controls,30 pancreatitis patients and 50 cases of pancreatic carcinoma.At the same time the serum CA-199 level was detected by using electrochemiluminescence immunoassay.Results The serum Endoglin levels in the pancreatic carcinoma group,pancreatitis group and healthy control group were (5.68±0.91)，(3.75±0.77)， (3.55±0.65)μg/L respectively,the serum Endoglin level in the pancreatic carcinoma group was higher than that in the pancreatitis group and the healthy control group(P<0.01).In the diagnosis of pancreatic carcinoma,the positive rate of Endoglin was 70%.Conclusion Serum Endoglin is highly expressed in pancreatic carcinoma and conducive to its diagnosis.

carcinoma; pancreatic neoplasm; soluble Endgolin

陳日壽，男，本科，主管技師，主要從事臨床微生物和免疫工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.14.027

A

1672-9455(2015)14-2041-02

2015-02-20

2015-03-15)