高舜天，黃成川，何志雄

(東莞市大嶺山人民醫(yī)院，廣東 東莞 523820)

?

防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲減肥降脂作用研究

高舜天，黃成川，何志雄*

(東莞市大嶺山人民醫(yī)院，廣東 東莞 523820)

目的：以高脂飼料喂養(yǎng)法構(gòu)建的肥胖SD大鼠為研究對(duì)象，探討防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲減肥降脂的效果。方法：將肥胖SD大鼠分為空白對(duì)照組、防風(fēng)通圣散組及防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲組，采用灌胃方式給藥，30天后測(cè)量大鼠體重增加率、Lee's指數(shù)、脂肪系數(shù)及脂肪細(xì)胞大小、血清血脂水平，并通過HE染色觀察大鼠肝臟脂肪性病變改善情況，評(píng)價(jià)防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲的減肥降脂作用。結(jié)果：與防風(fēng)通圣散組和空白對(duì)照組比較，防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲減肥組大鼠體重增加率、Lee's指數(shù)、肝臟系數(shù)及脂肪細(xì)胞大小顯著降低，血清血脂水平明顯改善，肝臟脂肪性病變減輕，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論：防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲對(duì)肥胖SD大鼠有明顯的減肥降脂作用，可進(jìn)一步深入研究其作用機(jī)制，為開發(fā)成人類減肥用藥奠定基礎(chǔ)。

防風(fēng)通圣散；紅曲；減肥；降脂

隨著人們膳食結(jié)構(gòu)的改變和體力活動(dòng)的日漸減少，肥胖成為一個(gè)全球性健康問題，其與脂肪肝、高血脂及心腦血管疾病的發(fā)生密切相關(guān)[1-2]。目前，利用中藥減肥成為新趨勢(shì)，其安全性較高，患者易于接受。防風(fēng)通圣散表里雙解、攻補(bǔ)兼施，可促進(jìn)全身代謝，減少脂肪堆積，目前已廣泛用于單純性肥胖的治療[3]。中藥紅曲具有健脾消食、除濕祛痰、活血化瘀的功效，可改善血脂水平，具有一定的減肥作用[4]。二者機(jī)理不盡相同，但可能具有協(xié)同減肥功效。關(guān)于防風(fēng)通圣散減肥效果的研究比較成熟，而關(guān)于紅曲減肥效果的研究很少，而防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲減肥效果的研究更是空白。本實(shí)驗(yàn)以肥胖SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，研究防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲的減肥降脂作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器

超純水系統(tǒng)(美國(guó)Millopore公司)；臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)(德國(guó)Hettich公司)；高壓滅菌鍋(日本SANYO公司)；電子天平(上海METTLER TOLEDO)；DMI3000B顯微鏡(德國(guó)徠卡公司)；酶標(biāo)儀(美國(guó)BIORAD公司)；721分光光度計(jì)(上海光學(xué)儀器廠)。

1.2 藥品與試劑

防風(fēng)通圣散溶液：以100mL蒸餾水溶解3g防風(fēng)通圣顆粒(青島宏仁堂制藥廠生產(chǎn)，3g/袋)；防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲溶液：以100mL蒸餾水溶解3g防風(fēng)通圣顆粒(青島宏仁堂制藥廠生產(chǎn)，3g/袋)和0.6g血脂康膠囊藥粉(北京北大維信生物科技有限公司生產(chǎn)，0.3g/粒，使用時(shí)拆開膠囊，取出藥粉稱重)。膽固醇、膽酸鹽、水合氯醛等購自南京建成生物試劑研究所?？偰懝檀紮z測(cè)試劑盒、甘油三酯試劑盒、高密度載脂蛋白檢測(cè)試劑盒、低密度載脂蛋白檢測(cè)試劑盒等購自上海北海生物技術(shù)工程有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

21日齡SD系雄性大鼠40只，體重45～50g，購自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

2 方法

2.1 SD大鼠肥胖模型建立

選擇40只3周齡SD系雄性大鼠，體重45～50g，飼養(yǎng)溫度18～22℃，自然光照，自由采食和飲水。將其隨機(jī)分為高脂飼料喂飼組( 30只) 和基礎(chǔ)飼料喂飼組(10只)，分別給予高脂飼料和基礎(chǔ)飼料，每周定時(shí)稱重1次，量體長(zhǎng)1次，計(jì)算體重增加率及Lee's指數(shù)，其中Lee's指數(shù)=(體重×1 000/體長(zhǎng))1/3，6周后觀察比較兩組大鼠體重變化情況。結(jié)果表明，高脂飼料喂飼組大鼠體重明顯增加，說明營(yíng)養(yǎng)性肥胖模型建立成功，同時(shí)檢測(cè)各組大鼠血清中TC、TG、LDL及HDL水平(參照試劑盒說明書進(jìn)行)。

2.2 防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲對(duì)肥胖SD大鼠減肥降脂作用

將SD肥胖大鼠分為空白對(duì)照組、防風(fēng)通圣散組、防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲組，每組10只，空白對(duì)照組大鼠每天灌服2次蒸餾水，每次1mL；防風(fēng)通圣散組大鼠每天灌服2次防風(fēng)通圣散藥液，每次1mL；防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲組大鼠每天灌服2次防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲藥液，每次1mL。三組大鼠均連續(xù)灌胃給藥30天，期間自由攝食基礎(chǔ)飼料。每周麻醉1次大鼠，定時(shí)稱重和量體長(zhǎng)各1次，根據(jù)體重調(diào)整給藥量。30天后處死動(dòng)物，計(jì)算體重增加率、Lee's指數(shù)。于大鼠頸動(dòng)脈采血，離心并分離血清，測(cè)定血清中血脂指標(biāo)水平；將大鼠腹腔生殖器周圍脂肪取下，稱其濕重，計(jì)算脂肪系數(shù)=(脂肪重量/大鼠體重)×100%；此外，取生殖器周圍同一部位的一小塊脂肪，用2.5%甲醛-乙醇溶液固定，石蠟切片，HE染色，400倍顯微鏡下任選10個(gè)大格視野(總面積為1.31mm2) 計(jì)算脂肪細(xì)胞個(gè)數(shù)，比較各組大鼠脂肪細(xì)胞大??；取各組大鼠肝臟，用2.5%甲醛-乙醇溶液固定，石蠟切片，HE染色，觀察肝臟脂肪性病變改善情況。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 結(jié)果

3.1 SD大鼠肥胖模型建立

模型構(gòu)建6周后，檢測(cè)大鼠血清中血脂指標(biāo)水平，并計(jì)算體重增加率及Lee's指數(shù)。結(jié)果顯示模型組大鼠體重增加率及Lee's指數(shù)明顯高于正常對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表1。模型組大鼠血清TG、TC及LDL水平顯著升高，HDL水平明顯降低，與正常對(duì)照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表2。

表1 模型組與正常對(duì)照組大鼠體重增加率及Lee's指數(shù)變化情況比較

組別體重增加率(%)0周6周Lee's指數(shù)0周6周模型組(n=30)-341.78±6.33*2.81±0.313.49±0.24**正常對(duì)照組(n=10)-252.22±5.982.82±0.192.82±0.24

注：**表示與正常對(duì)照組比較，P<0.01。

表2 模型組與正常對(duì)照組大鼠血脂水平變化情況比較

組別TCTGHDLLDL模型組(n=30)9.47±2.07**2.25±0.09**0.61±0.08**5.56±0.91**正常對(duì)照組(n=10)1.44±0.231.51±0.121.03±0.242.59±0.14

注：**表示與正常對(duì)照組比較，P<0.01。

3.2 防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲對(duì)肥胖SD大鼠減肥降脂作用

灌胃給藥30天后，防風(fēng)通圣散組大鼠體重增加率及Lee's指數(shù)降低，其中體重增加率降低顯著，與空白對(duì)照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，Lee's指數(shù)雖有所降低，但與空白對(duì)照組比較差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表3；血清TC、TG及LDL水平顯著降低(P<0.05)，但HDL水平升高不顯著(P>0.05)，見表4；脂肪系數(shù)略有降低，但與空白對(duì)照組比較差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，生殖器周圍脂肪細(xì)胞面積顯著降低，與空白對(duì)照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表5；肝臟脂肪性病變明顯改善，空白對(duì)照組大鼠肝細(xì)胞索排列紊亂，條梭狀消失，肝細(xì)胞腫脹，大部分肝細(xì)胞可見明顯脂肪變性，出現(xiàn)大量脂肪空泡，防風(fēng)通圣散組大鼠肝結(jié)構(gòu)基本完整，脂肪變性肝細(xì)胞數(shù)目較空白對(duì)照組明顯減少，見圖1。防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲組大鼠體重增加率、Lee's指數(shù)、血脂水平、脂肪系數(shù)、脂肪細(xì)胞體積及肝臟脂肪性病變改善情況均優(yōu)于防風(fēng)通圣散組和空白對(duì)照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表3 各組肥胖SD大鼠體重增加率及Lee's指數(shù)
變化情況比較

組別體重增加率(%)Lee's指數(shù)空白對(duì)照組50.33±7.413.15±0.21防風(fēng)通圣散組48.34±6.98*3.11±0.32防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲組42.25±4.42##3.08±0.27##

注：*表示與空白對(duì)照組比較，P<0.05；##表示與防風(fēng)通圣散組比較，P<0.01。

表4 各組肥胖SD大鼠血清中血脂指標(biāo)水平比較

組別TCTGHDLLDL空白對(duì)照組8.44±1.042.04±0.410.69±0.154.78±0.87防風(fēng)通圣散組6.52±0.94*1.55±0.26*0.78±0.093.76±0.84**防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲組5.03±0.31##1.01±0.38##1.02±0.31##3.21±0.79##

注：*表示與空白對(duì)照組比較，P<0.01；##表示與防風(fēng)通圣散組比較，P<0.01。

表5 各組肥胖SD大鼠脂肪系數(shù)及脂肪細(xì)胞面積比較

組別脂肪系數(shù)(%)細(xì)胞面積(mm2)空白對(duì)照組1.90±0.040.11±0.03防風(fēng)通圣散組1.89±0.070.10±0.02*防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲組1.41±0.05##0.07±0.01##

注：*表示與空白對(duì)照組比較，P<0.01；##表示與防風(fēng)通圣散組比較，P<0.01。

圖1 各組肥胖SD大鼠肝臟脂肪性病變改善情況

4 討論

中醫(yī)認(rèn)為膏脂由水谷所化生，屬津液之范疇，津從濁化為膏，凝則為脂。膏脂隨津液流行而輸布，注骨、益髓、澤膚、填充體腔，從而發(fā)揮正常的生理作用。膏脂的生成與轉(zhuǎn)化皆有賴于脾的健運(yùn)，脾失健運(yùn)，則不能運(yùn)化水谷，水谷精微失于輸布，津液代謝失常，凝聚成痰，阻于血脈，則影響氣血運(yùn)行，導(dǎo)致血瘀。痰瘀互為因果，相互轉(zhuǎn)化，積聚血中，致膏脂輸化障礙。若有實(shí)熱證者，痰熱互結(jié)，瘀熱互結(jié)，病情尤為嚴(yán)重，易形成現(xiàn)代醫(yī)學(xué)所說的高脂血癥與肥胖癥。

防風(fēng)通圣散具有表里雙解、攻補(bǔ)兼施的功效，善治表里、氣血、三焦實(shí)熱；紅曲具有健脾消食、除濕祛痰、活血化瘀的功效。在防風(fēng)通圣散的基礎(chǔ)上加用紅曲可針對(duì)高脂血癥與肥胖癥的痰、瘀、熱等病機(jī)發(fā)揮作用。本研究結(jié)果表明，防風(fēng)通圣散聯(lián)合紅曲組大鼠體重增加率、Lee's指數(shù)、脂肪系數(shù)、脂肪細(xì)胞大小、血脂水平及肝臟脂肪性病變改善情況均優(yōu)于防風(fēng)通圣散組和空白對(duì)照組，說明防風(fēng)通圣散和紅曲聯(lián)合使用可對(duì)肥胖大鼠產(chǎn)生協(xié)同減肥降脂作用。

[1] 羅冬莉.脂肪肝與肥胖、高血脂的相關(guān)性[J].右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2002,24(1):40.

[2] KAZUTO NAKAMURA,JOS J FUSTER,KENNETH WALSH.Adipokines:a link between obesity and cardiovascular disease [J]. J Cardiol,2014,63(4):250-259.

[3] 辛鳳志.防風(fēng)通圣散功效考[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2007,9(3):26-27.

[4] 翟鵬貴,趙珺彥,周大興,等.中藥紅曲復(fù)方制劑降脂作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2012,36(1):70-72.

(責(zé)任編輯：尹晨茹)

2015-10-16

東莞市科技局科技計(jì)劃項(xiàng)目(20131051010193)

高舜天(1978-)，男，廣東省東莞市大嶺山人民醫(yī)院副主任中醫(yī)師，研究方向?yàn)橹形麽t(yī)結(jié)合內(nèi)分泌與代謝疾病。

何志雄(1980-)，男，廣東省東莞市大嶺山人民醫(yī)院主治中醫(yī)師，研究方向?yàn)橹嗅t(yī)內(nèi)科。

R285.53;R589.2

A

1673-2197(2015)24-0012-02

10.11954/ytctyy.201524005