葉青躍，程鵬飛，周有利，饒漢武，黃承芳，周　立

(1.武漢科技大學(xué)附屬天佑醫(yī)院，湖北 武漢　430064；2.武漢大學(xué)醫(yī)院；

3.武漢大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心/ABSL-3實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢　430072)

?

急性腦梗死患者血小板聚集功能、血管性血友病因子、抗凝血酶及D-二聚體測(cè)定的臨床意義

葉青躍1，程鵬飛2，周有利1，饒漢武1，黃承芳1，周立3

(1.武漢科技大學(xué)附屬天佑醫(yī)院，湖北 武漢430064；2.武漢大學(xué)醫(yī)院；

3.武漢大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心/ABSL-3實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢430072)

摘要：目的探討急性腦梗死患者血小板聚集功能(PAgT)、血管性血友病因子(vWF)、抗凝血酶(AT)和D-二聚體(D-dimer)水平變化及臨床意義。方法選用相應(yīng)的方法和儀器測(cè)定112例腦梗死及80例健康對(duì)照者血(漿)PAgT、vWF、AT和D-dimer水平變化，同時(shí)對(duì)部分患者進(jìn)行治療前、后的對(duì)比分析。結(jié)果腦梗死患者血中PAgT、vWF、D-dimer等指標(biāo)均明顯高于健康對(duì)照組，AT活性較對(duì)照組顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。選取經(jīng)治療效果明顯好轉(zhuǎn)的78例腦梗死患者，出院前取空腹靜脈血測(cè)定PAgT、vWF、AT、D-dimer等指標(biāo)，并與治療前對(duì)照，結(jié)果治療后PAgT、vWF、D-dimer降低，AT活性升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論腦梗死患者體內(nèi)存在明顯的凝血及纖溶功能異常，與血管內(nèi)皮損傷、血小板聚集功能增強(qiáng)、凝血及纖溶功能亢進(jìn)、抗凝功能降低等多因素有關(guān)。PAgT、vWF、AT、D-dimer可以作為腦梗死患者診斷、治療監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷的參考指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：腦梗死；血小板聚集功能(PAgT)；血管性血友病因子(vWF)；抗凝血酶(AT)；D-二聚體(D-dimer)

腦梗死是由于腦動(dòng)脈粥樣硬化，血管內(nèi)皮細(xì)胞損壞，導(dǎo)致管腔狹窄，造成局部血栓形成所致。通常發(fā)病急驟，病情危急，其高發(fā)病率、致殘率和致死率已躍居世界前列，引起人們的高度重視。據(jù)WHO統(tǒng)計(jì)，我國(guó)腦梗死的發(fā)病率和病死率高居世界首位，每年的新發(fā)腦梗死患者人數(shù)高達(dá) 200萬(wàn)，每年的腦梗死病死患者人數(shù)也達(dá)到150萬(wàn)，同時(shí)，由于腦梗死的高致殘性，存活的腦梗死患者大多患有癱瘓等殘疾，造成了巨大的社會(huì)和家庭負(fù)擔(dān)[1]。

研究發(fā)現(xiàn)，腦梗死患者通常會(huì)發(fā)生血小板，血管內(nèi)皮細(xì)胞系統(tǒng)以及凝血、抗凝與纖溶系統(tǒng)的異常改變。因此通過(guò)有關(guān)指標(biāo)的測(cè)定以判斷患者的高凝狀態(tài)或血栓形成，對(duì)疾病的早期診斷、及時(shí)治療與病情觀察具有重要的臨床意義。本文對(duì)急性腦梗死患者血小板聚集功能(PAgT)、血管性血友病因子(vWF)、抗凝血酶(AT)和D-二聚體(D-dimer)等指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定分析，探討其臨床意義，為臨床診治提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1研究對(duì)象(1)病例組：腦梗死患者112例，男68例，女44例，年齡42～78歲，平均64.5歲，均系起病3 d內(nèi)入院者，診斷均符合2010年中國(guó)腦血管病防治指南制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]，并經(jīng)頭顱CT或MRI確診，且排除腦出血及心、肝、腎及血液系統(tǒng)疾病，近一個(gè)月內(nèi)未服用抗血小板、抗凝及溶栓類藥物。根據(jù)美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院卒中量表(Nat ional Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)評(píng)估患者神經(jīng)功能缺損程度并評(píng)分[3]，其中經(jīng)治療(改善腦循環(huán)、抗腦水腫降低顱內(nèi)壓、抗凝及溶栓治療、營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)、抗動(dòng)脈粥樣硬化等)4周好轉(zhuǎn)者78例。(2)對(duì)照組：同期來(lái)我院健康體檢正常者80例，男45例，女35例，年齡40～78歲，平均58.5歲。病例組與對(duì)照組在年齡、性別等方面具有可比性。

本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對(duì)象均知情同意。

1.2標(biāo)本采集與處理患者入院24 h內(nèi)取空腹靜脈血3.6 mL ，其中1.8 mL加0.109 mL·L-1枸櫞酸鈉0.2 mL抗凝，3 000轉(zhuǎn)/分離心15 min，取乏血小板血漿2 h內(nèi)測(cè)定血漿血管性血友病因子(vWF)、抗凝血酶(AT)和D-二聚體(D-dimer)；另1.8 mL加0.109 mL·L-1枸櫞酸鈉0.2 mL抗凝、混勻2 h內(nèi)測(cè)定PAgT 。

1.3測(cè)定方法vWF測(cè)定為免疫法，AT測(cè)定為發(fā)色底物法，D-dimer測(cè)定為免疫比濁法，均在SysmexCA7000全自動(dòng)血凝分析儀上進(jìn)行，試劑及定標(biāo)血漿均為與儀器配套的Simense公司產(chǎn)品。用美國(guó)CHRMNO-LOG血小板聚集儀測(cè)定血小板聚集功能(PAgT)，以濃度為1 μmol·L-1的ADP為誘導(dǎo)劑，全血阻抗法測(cè)定。

2結(jié)果

對(duì)照組與腦梗死組PAgT、vWF、AT、D-dimer測(cè)定結(jié)果的比較，見(jiàn)表1。

表1對(duì)照組與腦梗死組PAgT、vWF、AT、D-dimer

由表1可見(jiàn)，腦梗死患者血中PAgT、vWF、D-dimer等指標(biāo)均明顯高于健康對(duì)照組，AT顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。

選取經(jīng)治療效果明顯好轉(zhuǎn)的78例腦梗死患者，出院前取空腹靜脈血測(cè)定PAgT、vWF、AT、D-dimer等指標(biāo)，并與治療前對(duì)照，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2腦梗死患者治療前、后PAgT、vWF、AT、D-dimer

由表2可見(jiàn)，與治療前比較，治療后PAgT、vWF、D-dimer降低，AT活性升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。

3討論

研究表明，腦梗死患者在血栓形成之前，其血管內(nèi)皮細(xì)胞、血小板、凝血與抗凝、纖維蛋白溶解系統(tǒng)，以及血液流變性等各方面均發(fā)生了不同程度的改變[4-5]。vWF是血管內(nèi)皮細(xì)胞合成、分泌的一種大分子糖蛋白，可作為血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的分子標(biāo)志物[4]。當(dāng)血管內(nèi)皮細(xì)胞受損時(shí)，vWF大量釋放入血，與血小板表面糖蛋白Ⅱb/Ⅲa結(jié)合，有利于血小板活化。同時(shí)，vWF作為橋梁使血小板粘附于血管膠原纖維，形成血小板血栓。此外，vWF還可促進(jìn)纖維蛋白原的合成，使血液黏滯性增大，有利于血栓形成。本研究發(fā)現(xiàn)，腦梗死患者血漿vWF的表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組，表明腦梗死患者急性期存在著嚴(yán)重的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，vWF大量釋放，活化血小板導(dǎo)致其釋放出多種促凝物，引起血液的高凝狀態(tài)，最終導(dǎo)致血栓形成。因此，檢測(cè)vWF的表達(dá)對(duì)急性腦梗死早期溶栓、抗血小板治療均有重要的臨床意義。

血小板聚集功能是通過(guò)誘導(dǎo)劑如ADP、凝血酶、膠原等與血小板膜受體結(jié)合使血小板發(fā)生變形、黏附、釋放，反映血小板相互黏附及聚集的能力。血小板釋放的多種物質(zhì)可促進(jìn)血栓形成。其中神經(jīng)肽Y(NPY)是一種含36個(gè)氨基酸殘基的多肽，ADP、膠原、腎上腺素等誘導(dǎo)劑可不同程度地刺激血小板釋放NPY，從而使血小板發(fā)生聚集，有助于血栓形成。迄今，血小板聚集試驗(yàn)被認(rèn)為是反映血小板功能最實(shí)用的檢查方法[6]。本研究的結(jié)果表明，腦梗死患者發(fā)病期由于血小板活化，導(dǎo)致其聚集率顯著性增高；經(jīng)過(guò)有效治療，血小板的聚集率明顯降低。

抗凝血酶為一種絲氨酸蛋白抑制物，可滅活凝血酶、纖溶酶及多種凝血因子，是對(duì)抗血栓形成的重要物質(zhì)。腦血栓形成時(shí)，抗凝血酶迅速被激活的凝血酶、纖溶酶、激肽釋放酶、因子Ⅹa、Ⅻa、Ⅸa等凝血因子滅活消耗，因而含量明顯下降[7]。D-二聚體是纖維蛋白與活化因子ⅩⅢ發(fā)生交聯(lián)后，經(jīng)纖溶酶水解產(chǎn)生的降解產(chǎn)物。有研究發(fā)現(xiàn)血漿D-二聚體水平升高即代表機(jī)體內(nèi)存在繼發(fā)性的纖溶亢進(jìn)或有血栓形成，常預(yù)示著血栓前狀態(tài)[8]。有研究認(rèn)為D-二聚體的水平與腦梗死急性期的分型有關(guān)，并發(fā)現(xiàn)在心源性腦梗死中的D-二聚體水平最高[9]。本文測(cè)定結(jié)果表明，腦梗死患者體內(nèi)凝血功能均處于亢進(jìn)狀態(tài)，并伴有繼發(fā)性纖溶活性的改變。表現(xiàn)為D-二聚體明顯高于健康對(duì)照組，AT較對(duì)照組顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。腦梗死的主要原因是栓塞和血栓形成，血管內(nèi)皮損傷、血小板聚集功能增強(qiáng)、凝血功能亢進(jìn)導(dǎo)致的高凝狀態(tài)，纖維蛋白原在其中發(fā)揮了重要作用；為了維持凝血與纖溶的動(dòng)態(tài)平衡，D-二聚體增高即說(shuō)明血管內(nèi)血栓形成的同時(shí)出現(xiàn)了繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)。而AT降低一般認(rèn)為與消耗有關(guān)。腦梗死患者治療好轉(zhuǎn)后的結(jié)果也說(shuō)明血管內(nèi)皮損傷、血小板聚集功能增強(qiáng)、凝血及纖溶功能亢進(jìn)在病情轉(zhuǎn)歸中的意義。

參考文獻(xiàn)：

[1]辛家厚，張嶸，陳偉.中青年腦梗死患者急性期血清同型半胱氨酸、C反應(yīng)蛋白和D-二聚體的水平的動(dòng)態(tài)變化及其與近期預(yù)后的相關(guān)性[J].安徽醫(yī)藥,2013,17(10)：1704-1706.

[2]中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)腦血管學(xué)組急性缺血性卒中診治指南撰寫(xiě)組.中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南2010[J]．中華神經(jīng)科雜志，2010，43(2)：154-160.

[3]Verro P,Tanenaumb LN,Borden N,et al.Clinical application of CT angiography in acute ischemic stroke [J].Clin Neurol Neurosurg,2007,10: 138-145.

[4]劉澤霖，賀石林，李家增.血栓性疾病的診斷與治療[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006:422-428.

[5]林智，蔣玉葉，劉更夫，等.腦梗塞患者血液流變性和血漿滲透壓的變化及其相關(guān)性分析[J].微循環(huán)學(xué)，2008,18(3)：69-71.

[6]劉江，翟明，張蕾.昆明地區(qū)漢族人vWF基因多態(tài)性與急性腦梗塞的相關(guān)性[J],中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志，2011，37(9)：535-538.

[7]Violi F,Basili S,Berger JS,et al.Anti-platelet therapy in peripheral artery disease[J].Handb Exp Pharmacol，2012 (210):547-563.

[8]吉薇，顧健，沈連軍，等.腦梗塞患者血漿抗凝血酶、血管性血友病因子和D-二聚體測(cè)定的臨床意義[J].血栓與止血學(xué)，2013，19(4)：167-168.

[9]Isenegger J,Meier N,Lam mLe B ,et al.D-dimers predict stroke subtype when assessed early [J].Cerebrovasc Dis,2010,29(1): 82-86.

Clinical significance on changes of platelet aggregation test,

von Willebrand factor,antithrombin and D-dimer assayin

acute cerebral infarction patients

YE Qing-yao1，CHENG Peng-fei2，ZHOU You-li1，et al

(1.linicalLaboratoryofTianYouHospitalAffiliatedtoWuhanUniversityofScienceandTechnology，

Wuhan，Hubei430072，China；2.WuhanUniversityHospital，Wuhan，Hubei430072,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the clinical signification of coagulation ,anti-coagulation and fibrinolysis indexes i.e.platelet aggregation test(PAgT),von Willebrand factor(vWF),antithrombin(AT),D-dimer in acute cerebral infarction patients.MethodsvWF was assayed using ELISA method,AT was determined by chromogenic substances assay,and Latex enhanced immune turbidimetry for D-dimer.vWF,AT and D-dimer all the parameters were finished by SysmexCA-7000 automated blood coagulation analyzer.PAgT was measured simultaneously using a whole-blood Lumi-Aggregometer by CHRMNO-LOG platelet aggregation apparatus.ResultsPAgT,vWF,D-dimer were significantly higher in acute cerebral infarction patients group,compared with those in the control group(P<0.05 orP<0.01).while AT was significantly lower(P<0.05).After effective treatment,PAgT,vWF,AT,D-dimer Indicators are all improved.ConclusionThere is significant abnormal in coagulation,anti-coagulation and fibrinolysis system in acute cerebral infarction patients.PAgT,vWF,AT,D-dimer can be as good predictors for the blood coagulation fibrinolysis imbalance state of the disease and the degree of recovery.

Key words:acute cerebral infarction; platelet aggregation test(PAgT); von Willebrand factor(vWF); antithrombin(AT); D-dimer

(收稿日期：2014-05-17，修回日期：2014-08-21)

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2015.02.030

基金項(xiàng)目：湖北省衛(wèi)生廳科研項(xiàng)目(No JX6B93)