菌陰肺結(jié)核中結(jié)核感染T細(xì)胞斑點試驗的診斷價值分析

丁佳臣, 何小敏, 何小峰, 楊建功

(江蘇省泰興市人民醫(yī)院 感染科, 江蘇 泰興, 225400)

關(guān)鍵詞:肺結(jié)核; 菌陰; T-SPOT.TB

隨著大氣污染的越來越嚴(yán)重，肺結(jié)核逐漸成為全球傳染性疾病中首要致死因素。2011年的世界衛(wèi)生組織估計全球約有870萬例新發(fā)結(jié)核病患者，其中有超過100萬例死于結(jié)核病[1]。因此，快速、準(zhǔn)確地診斷活動性結(jié)核患者對于結(jié)核病的防控、治療極其重要。傳統(tǒng)的痰抗酸桿菌涂片在肺結(jié)核患者中敏感性較低，使得菌陰肺結(jié)核在臨床診斷中有一定的困難。T-SOPT.TB作為新型的結(jié)核診斷工具之一，具有較高的敏感性和特異性，本研究試圖調(diào)查T-SPOT在菌陰肺結(jié)核中的情況，與痰菌陽性患者-SOPT.TB陽性率比較，評價其診斷價值。

1資料與方法

1.1　一般資料

收集資料較為齊全2013年4月—2015年4月在本院就診的肺結(jié)核患者共205例，其中男164例，女41例，平均年齡55.5歲。包括: ① 肯定為肺結(jié)核病:痰檢抗酸桿菌陽性，即菌陽肺結(jié)核；②很可能為肺結(jié)核病：臨床表現(xiàn)、影像學(xué)或病理組織學(xué)檢查支持肺結(jié)核，但結(jié)核桿菌檢查陰性，即菌陰肺結(jié)核。

1.2　方法

1.2.1痰涂片：清晨收集膿性痰，進(jìn)行抗酸桿菌染色，在顯微鏡下觀察染色結(jié)果，以每100個視野抗酸桿菌3～9個為1+，每10個視野抗酸桿菌1～9個為2+，每1個視野抗酸桿菌1～9個為3+，每1個視野抗酸桿菌>10個為4+。

1.2.2T-SPOT.TB: 患者空腹，用肝素抗凝管采集8 mL外周靜脈血，分離外周血單個核細(xì)胞后備用,取出T-SPOT.TB試劑盒(上海復(fù)星科技有限公司提供)內(nèi)微板孔，將陰性對照加入細(xì)胞培養(yǎng)液，陽性對照加入植物血凝素，分別在兩孔中加入ESAT-6即抗原A和CFP-10即抗原B，將分離好的單個核細(xì)胞添加孔中, 用培養(yǎng)箱孵育，經(jīng)過2 h孵育后洗脫PBS, 顯色后終止PBS，接著計量斑點數(shù)目, 陽性結(jié)果的判斷指的是計數(shù)孔點比陰性孔多5個點或超過陰性對照的兩倍。

2結(jié)果

205例肺結(jié)核患者中，痰涂片陽性肺結(jié)核103例，其中結(jié)核感染T陽性90例(87.3%),TSPOT陰性13例(12.7%)。痰涂片1+組22例，其中TSPOT陽性20例(90.9%),陰性2例(9.1%)。痰涂片2+組21例，其中TSPOT陽性17例(81%),陰性4例(19%)。痰涂片3+組30例，其中TSPOT陽性26例(86.7%),陰性4例(13.3%)。痰涂片4+組30例，其中TSPOT陽性28例(93.3%), 陰性2例(6.7%)。痰涂片陰性肺結(jié)核102例，其中TSPOT陽性70例(68.6%), TSPOT陰性32例(31.4%)。 菌陽肺結(jié)核的TSPOT結(jié)果：TSPOT的陽性率不隨著痰菌的增加而增加。4組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

菌陽、菌陰肺結(jié)核患者的TSPOT的比較，菌陽肺結(jié)核患者的TSPOT的陽性率高于菌陰肺結(jié)核。2組痰涂片比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

3討論

通常痰涂片(抗酸染色法)陽性即診斷為肺結(jié)核，因其留取標(biāo)本方便，檢查方法簡單，從而在臨床上是結(jié)核桿菌細(xì)菌學(xué)檢查的首選方法，也是判斷傳染性強弱的指標(biāo)。有研究[2]認(rèn)為清晨痰的陽性率在三種痰中陽性率最高，但總體的陽性率較低。痰涂片陽性率總體不高的原因有各個方面的原因: ① 痰標(biāo)本的取樣時間; ② 痰標(biāo)本的性狀; ③ 檢測痰的次數(shù); ④ 檢驗使用的顯微鏡的視野數(shù); ⑤ 結(jié)核患者病人常常為刺激性干咳，痰少甚至無痰; ⑥ 部分患者留取標(biāo)本方法不當(dāng)?shù)取１狙芯堪l(fā)現(xiàn)痰菌陽性率50%，與既往的報道相比略高，但仍有一半左右為菌陰患者，使得臨床上在菌陰肺結(jié)核的診斷通常需要其他的相關(guān)指標(biāo)，

TSPOT檢測在其中有較高的臨床診斷價值。

表1　不同數(shù)量的痰菌的TSPOT的比較[n(%)]

表2　菌陽、菌陰肺結(jié)核患者的TSPOT的比較[n(%)]

T-SPOT.TB是診斷結(jié)核感染的新方法，具有較高的敏感性和特異性, 本回顧分析結(jié)果表示TSPOT在肺結(jié)核診斷中的敏感性78%，與既往研究[3-5]結(jié)果一致。其中在菌陰肺結(jié)核中的敏感性為70%，提示在菌陰肺結(jié)核的診斷中有一定的價值。同時，發(fā)現(xiàn)在菌陽肺結(jié)核中不同痰菌的TSPOT陽性率無明顯差別，不隨著痰菌越多，陽性率變高，但和菌陰肺結(jié)核的結(jié)果有明顯的差別，存在一定的矛盾。分析認(rèn)為產(chǎn)生差別可能的原因菌陰病例混有誤診病例: ①如變態(tài)反應(yīng)產(chǎn)生的肺部改變、病毒性肺炎等，自限性疾病，不需抗結(jié)核治療，也會好轉(zhuǎn); ② 常規(guī)的抗結(jié)核藥物中異煙肼、利福平對一些特殊細(xì)菌感染有療效; ③ 在部分菌陰肺結(jié)核患者未能行病理的檢查。臨床上在菌陰肺結(jié)核部分患者以臨床癥狀減輕，X線片或CT上病灶變小從而診斷肺結(jié)核納入治療，診斷并不可靠。在臨床醫(yī)療工作中，對與臨床癥狀、胸片支持肺結(jié)核，但痰菌陰性的患者同時TSPOT陰性，考慮抗結(jié)核藥物可能的一系列副作用，建議更長時間的觀察，尋找在卡介苗中缺失的蛋白作為抗原刺激，提高TSPOT檢測的敏感性及特異性，從而可增加在菌陰肺結(jié)核的診斷準(zhǔn)確率。

參考文獻(xiàn)

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通信作者:何小敏, E-mail: hxmlq@163.com

收稿日期:2015-05-26

中圖分類號:R 521

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號:1672-2353(2015)21-195-01DOI: 10.7619/jcmp.201521075