臧玉柱, 白炎亮, 陳玉清, 郭建民, 朱尊民, 王同保, 劉忠文

(河南省人民醫(yī)院 血液科, 河南 鄭州, 450003)

IL-2聯(lián)合自體CIK細(xì)胞治療惡性淋巴瘤的療效觀察

臧玉柱, 白炎亮, 陳玉清, 郭建民, 朱尊民, 王同保, 劉忠文

(河南省人民醫(yī)院 血液科, 河南 鄭州, 450003)

摘要:目的觀察IL-2聯(lián)合自體CIK細(xì)胞治療惡性淋巴瘤療效。方法選取18例惡性淋巴瘤患者進(jìn)行IL-2聯(lián)合自體CIK細(xì)胞治療，另外選擇10例健康自愿者作為正常對照組。結(jié)果18例惡性淋巴瘤患者治療前CD3+、CD4+細(xì)胞的比率明顯下降，CD4+/CD8+的比率有所下調(diào)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而CD19的水平顯著上升(P<0.05); 聯(lián)合治療后，CD3+、CD4+細(xì)胞的水平相比治療前有明顯上升，CD8+細(xì)胞水平有所下降，CD4+/CD8+的比率顯著上升(P<0.05), 但仍低于對照組水平(P<0.05)。治療前，18例惡性淋巴瘤患者血清中的LDH水平明顯上升，高于健康對照組的水平(P<0.05); 患者接受聯(lián)合治療8個療程后，血清中LDH水平降低，明顯低于治療前的水平(P<0.05), 但仍高于對照組水平。治療8個療程后，患者的血清AST和ALT水平明顯降低，同治療前相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05), 已經(jīng)達(dá)到了健康對照組的水平(P>0.05)。結(jié)論自體CIK細(xì)胞聯(lián)化療是治療惡性淋巴瘤的一種有效、安全的方法，能有效促進(jìn)免疫功能恢復(fù)。

關(guān)鍵詞:IL-2; 自體CIK細(xì)胞; 惡性淋巴瘤

惡性淋巴瘤是發(fā)生于淋巴結(jié)和結(jié)外淋巴組織的腫瘤，在發(fā)病過程中常伴有免疫功能受損[1-2]。導(dǎo)致該種疾病的病因尚不完全清楚，可能與感染、家族遺傳或者是其他諸多因素有關(guān)[9]。目前治療惡性淋巴瘤的方式主要包括手術(shù)切除、化療和放療，多種治療方式合并達(dá)到治愈疾病的目的。CIK細(xì)胞是細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)，這是一種具有超強增值能力和超強細(xì)胞毒性的新類型免疫活性細(xì)胞，具有免疫特性，是目前腫瘤治療有效的手段[4]。本研究選擇18例惡性淋巴瘤患者，選擇化療、白介素-2(IL-2)聯(lián)合自體CIK細(xì)胞治療，現(xiàn)報告如下。

1資料與方法

1.1　一般資料

本研究選取2011年1月—2014年12月本院接收治療的18例惡性淋巴瘤患者進(jìn)行研究觀察。18例患者男12例，女6例，年齡23～79歲，平均年齡為(60.05±2.42)歲；惡性淋巴瘤分類為：彌漫大B細(xì)胞性淋巴瘤(DLBCL)患者12例，胃黏膜相關(guān)淋巴瘤(MALT類型)3例，淋巴漿細(xì)胞淋巴瘤(LPL)3例。18例患者在接受治療前均接受過多療程化療，化療方案包括CHOP、R-CHPO、EPOCH等。疾病具體緩解情況以及患者相關(guān)資料見表1。選擇自愿者10例作為健康對照組。惡性淋巴瘤組織學(xué)嚴(yán)格按照2008年出版的WHO造血淋巴組織分類方法所確定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分類[5]；所有的分期均采用Ann Arbor臨床分期法標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分類；療效根據(jù)Cheson標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行確定[6]。所有患者入組之前均通過本人及其家屬同意，本次研究通過了醫(yī)院倫理委員會的審核。

表1　18例患者一般資料比較

COPD: 慢性梗阻性肺病;CAD: 冠心病; PHD: 肺心病; DVT: 深部靜脈血栓形成; CR: 完全緩解;

Cru: 不完全緩解; PR: 部分緩解；生存月份為本次研究結(jié)束時依然生存的患者。

1.2　方法

治療組的18例患者接受CIK細(xì)胞治療方案進(jìn)行治療，具體步驟如下: ① 在給患者采集PBMNC之前的1周內(nèi)連續(xù)注射20 mg/d的胸腺五肽注射液，從患者肌肉部位注射，連續(xù)注射1周，然后采集患者的PBMNC，采集完畢后胸腺五肽注射液減量為每周注射3次，每次注射20 mg; ② 患者接受IL-2聯(lián)合自體CIK細(xì)胞治療方案，每次給患者輸回(3～4)×109個CIK細(xì)胞，每個療程連續(xù)輸回2次，回輸后采用IL-2皮下注射，每天100萬U，連續(xù)注射10 d, 這樣一個治療過程為1個療程。

1.3　觀察指標(biāo)

對患者CIK細(xì)胞治療前后T亞群水平變化、聯(lián)合治療前后NK細(xì)胞及殺傷活性、治療前后血清中LDH變化水平以及聯(lián)合治療期間血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平進(jìn)行研究分析；其次對患者的腸胃進(jìn)行檢查，每半年要進(jìn)行復(fù)查；觀察患者的生活質(zhì)量以及生存期。

1.4　統(tǒng)計學(xué)分析

選擇SPSS 18.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來表示，計量資料的比較采用t檢驗，計數(shù)資料的比較采用χ2檢驗，當(dāng)P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1　患者治療前后CIK細(xì)胞T亞群水平變化分析

本研究對患者治療前后T亞群水平變化進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)同健康對照組相比，18例惡性淋巴瘤患者治療前CD3+、CD4+細(xì)胞的百分比率明顯下降，CD4+/CD8+的百分比率有所下調(diào)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而CD19的水平卻有所上升(P<0.05); 患者經(jīng)過聯(lián)合治療后, CD3+、CD4+細(xì)胞的水平相比治療前有明顯上升, CD8+細(xì)胞水平有所下降, CD4+/CD8+的百分比率有所上升，同治療前的水平相比差異顯著(P<0.05), 但是還沒有達(dá)到健康對照組人體的正常水平(P<0.05)。見表2。

表2　2組患者治療前后CIK細(xì)胞T亞群水平變化分析　%

與健康對照組相比, *P<0.05; 與同組治療前相比, #P<0.05。

2.2　患者聯(lián)合治療前后NK細(xì)胞及殺傷活性比較分析

本研究對患者治療前后NK細(xì)胞及殺傷活性進(jìn)行比較分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)惡性淋巴瘤患者治療前同健康對照組患者相比，NK細(xì)胞的濃度有所下降(P<0.05); 聯(lián)合治療后NK細(xì)胞的水平有所升高，同治療前相比差異顯著(P<0.05)，與健康對照組的水平無顯著差異(P>0.05)。治療前，患者的NK細(xì)胞活性明顯低于健康對照組(P<0.01), 治療后患者的NK活性明顯高于治療前的水平(P<0.01), 但是還是低于健康對照組的水平(P<0.05)。見表3。

表3　2組患者聯(lián)合治療前后NK細(xì)胞及殺傷活性比較分析

與健康對照組相比, *P<0.05; 與同組治療前相比, #P<0.05。

2.3　患者治療前后血清中LDH變化水平分析

本次研究對2組患者治療前后血清中LDH變化水平進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)治療前18例惡性淋巴瘤患者血清中的LDH水平明顯上升，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于健康對照組的水平(P<0.05); 患者接受聯(lián)合治療8個療程后，血清中LDH水平大大降低，明顯低于治療前的水平(P<0.05), 但是高于健康對照組者的水平(P>0.05)。見表4。

表4　患者治療前后血清中LDH變化水平分析　U/L

與健康對照組相比, *P<0.05; 與同組治療前相比, #P<0.05。

2.4　患者聯(lián)合治療期間血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平分析

本次研究對患者聯(lián)合治療期間血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)治療前惡性淋巴瘤患者的AST和ALT明顯高于健康對照組的水平(P<0.05); 治療8個療程后，患者的血清AST和ALT水平明顯降低，同治療前相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05), 已經(jīng)達(dá)到了健康對照組的水平(P>0.05)。見表5。

表5　2組患者治療期間AST和ALT水平分析　U/L

與健康對照組相比, *P<0.05; 與同組治療前相比, #P<0.05。

3討論

淋巴瘤是原發(fā)于淋巴結(jié)和結(jié)外淋巴組織的一種惡性腫瘤，在臨床上經(jīng)常表現(xiàn)為無痛性、進(jìn)行性淋巴結(jié)腫大、肝脾腫大，常伴有身體瘦弱、瘙癢、發(fā)熱等全身癥狀。近年來，中國每年患惡性淋巴瘤的人數(shù)在逐漸增加，每年新增人數(shù)高達(dá)4.6萬，而死亡人數(shù)也超過2.1萬人，并且逐年呈上升趨勢[7]。

淋巴瘤早期通常表現(xiàn)為以下幾類癥狀: ① 患者全身淋巴結(jié)腫大。60%的患者主要是處于頸部，由于該種癥狀無疼痛和瘙癢癥狀所以常常難以被人發(fā)現(xiàn); ② 發(fā)熱。部分患者會出現(xiàn)盜汗、發(fā)熱、咳嗽頭痛等類似于感冒的癥狀; ③ 患者會出現(xiàn)食欲減退、腹瀉腹痛等消化系統(tǒng)癥狀; ④ 皮膚瘙癢[8]。

惡性淋巴瘤目前治療方法主要依靠手術(shù)、化療和放療相結(jié)合。很多醫(yī)學(xué)研究者[9-10]認(rèn)為，手術(shù)主要對惡性淋巴瘤起診斷作用，而主要治療方法為化療級免疫治療，同時根據(jù)病情選擇放療。CIK細(xì)胞是細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK), 具有超強增值能力和超強細(xì)胞毒性的新類型免疫活性細(xì)胞，是目前治療腫瘤中的有效的手段之一。自體CIK細(xì)胞能夠同時表達(dá)CD3-和CD56+兩組膜蛋白，所以具有強大的抗瘤活性和NK細(xì)胞的非MHC限制性殺瘤優(yōu)點[11]。CIK細(xì)胞對自體及異體的淋巴瘤靶細(xì)胞表現(xiàn)出強大的細(xì)胞毒性，且不受靶細(xì)胞的HLA限制，該種細(xì)胞不會對健康細(xì)胞造成損害，能夠準(zhǔn)確定位到腫瘤細(xì)胞上將其殺死，對惡性淋巴瘤患者化療后殘留細(xì)胞效果明顯[12], 能夠有效防止淋巴瘤細(xì)胞復(fù)發(fā)，并提高患者機體的免疫能力。本研究對患者治療前后CIK細(xì)胞T亞群水平變化進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)同健康對照組相比，18例惡性淋巴瘤患者治療前CD3+、CD4+細(xì)胞的百分比率明顯有所下降, CD4+/CD8+的百分比率有所下調(diào)，而CD19的水平卻有所上升；患者經(jīng)過聯(lián)合治療后, CD3+、CD4+細(xì)胞的水平相比治療前有明顯上升，CD8+細(xì)胞水平有所下降, CD4+/CD8+的百分比率有所上升，同治療前的水平相比差異十分顯著，但是還沒有達(dá)到健康對照組者的正常水平。此外，聯(lián)合治療后NK細(xì)胞的水平有所升高，與健康對照組的水平無差異。治療后患者的NK活性明顯高于治療前的水平，但是還是低于健康對照組的水平。該結(jié)果表明CIK細(xì)胞治療后患者的一般情況得到了有效改善，生活質(zhì)量明顯提高。

國內(nèi)外研究[13]表明, CIK細(xì)胞具有增值快、定性殺瘤活性高、血液毒性小等優(yōu)點，在清除微小殘留病灶方面療效顯著。本研究對18例惡性淋巴瘤患者進(jìn)行了IL-2聯(lián)合自體CIK細(xì)胞治療方式進(jìn)行治療，結(jié)果發(fā)現(xiàn)患者接受聯(lián)合治療8個療程后血清中LDH水平降低，明顯低于治療前的水平，患者的血清AST和ALT水平明顯降低，同治療前相比顯著，已經(jīng)達(dá)到了健康對照組的水平，同時觀察到CD3+、CD4+細(xì)胞的水平相比治療前有明顯上升，NK細(xì)胞活性升高。這表明自體CIK細(xì)胞能明顯改善惡性淋巴瘤患者免疫功能，自體CIK細(xì)胞聯(lián)合放、化療是治療惡性淋巴瘤的一種有效、安全的方法。

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Effect observation of IL-2 combined with autologous CIK cells on treatment of malignant lymphoma

ZANG Yuzhu, BAI Yanliang, CHEN Yuqing, GUO Jianmin,

ZHU Zunmin, WANG Tongbao, LIU Zhongwen

(DepartmentofHematology,HenanProvincialPeople′sHospital,Zhengzhou,Henan, 450003)

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the effect of IL-2 combined with autologous CIK cells on treatment of malignant lymphoma. MethodsA total of 18 patients with malignant lymphoma were selected and treated by IL-2 combined with autologous CIK cells. Ten healthy volunteers were designed as normal control group. ResultsPercentage of CD3+, CD4+cells decreased obviously in18 malignant lymphoma patients before treatment, and the percentage of CD4+/CD8+ratio was lower (P<0.05), and the level of CD19increased (P<0.05). After treatment, the levels of CD3+, CD4+cells increased obviously, CD8+cells level decreased, the percentage of CD4+/CD8+ratio increased (P<0.05), but was still lower than the normal level in the control group (P<0.05). Before treatment, serum level of LDH increased in 18 patients with malignant lymphoma, and it was significantly higher than that in the control group (P<0.05). After 8 courses of treatment, serum LDH level decreased and was significantly lower than the level before treatment (P<0.05), but was still higher than the level in the control group. After 8 courses of treatment, the patients' serum AST and ALT levels significantly reduced when compared with levels before treatment (P<0.05), and serum AST and ALT levels reached the level of the control group (P>0.05). ConclusionAutologous CIK cells combined with chemotherapy is an effective and safe method for treatment of malignant lymphoma, and it can effectively promote the recovery of immune function.

KEYWORDS:IL-2; autologous CIK cells; malignant lymphoma

收稿日期:2015-05-06

中圖分類號:R 739.9

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號:1672-2353(2015)21-013-04DOI: 10.7619/jcmp.201521004