盧志賢，王亞萍，謝敏瑚

(無錫市第三人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科,江蘇 無錫214041)

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VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS患者血清中的表達(dá)及意義

盧志賢，王亞萍，謝敏瑚

(無錫市第三人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科,江蘇 無錫214041)

摘要：目的探討血管內(nèi)皮生長因子-C(vascular endothelial growth factor-C，VEGF-C)、環(huán)氧化酶-2(cyclooxygenase 2，COX-2)、組織蛋白酶-D(cathepsin-D，Cath-D)在骨髓增生異常綜合癥(myelodysplastic syndromes,MDS)患者血清中的表達(dá)水平及意義。方法采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)定量檢測44例MDS患者、50例正常健康人血清中的VEGF-C、COX-2、Cath-D含量并進(jìn)行比較。結(jié)果MDS患者血清中VEGF-C、COX-2、Cath-D的表達(dá)水平明顯高于正常健康對(duì)照組，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01)。VEGF-C、COX-2、Cath-D的表達(dá)在不同性別、年齡比較中無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，而在不同臨床分型比較中VEGF-C、COX-2、Cath-D的表達(dá)與MDS分型呈正相關(guān)性。結(jié)論聯(lián)合檢測血清VEGF-C、COX-2、Cath-D的表達(dá)對(duì)MDS疾病的發(fā)展、治療、預(yù)后有重要的作用。

(ChinJLabDiagn,2015,19:0780)

骨髓增生異常綜合征(MDS) 是一組造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病，造血功能紊亂是其特征，導(dǎo)致無效造血及惡性轉(zhuǎn)化危險(xiǎn)性增高。病態(tài)造血主要表現(xiàn)在粒、紅、巨三系，也可是兩系或一系，骨髓功能異常而導(dǎo)致三系細(xì)胞病態(tài)發(fā)育及增生異?；钴S，但同時(shí)又伴有顯著的無效造血。目前MDS的診斷主要靠骨髓象的改變及活檢，診斷依據(jù)是病態(tài)造血現(xiàn)象，但病態(tài)造血又不是MDS所特有。本文則通過ELISA法定量檢測血管內(nèi)皮生長因子-C(VEGF-C)、環(huán)氧化酶-2(COX-2)、組織蛋白酶-D(Cath-D)來探討這些指標(biāo)在MDS患者血清中的表達(dá)水平及意義，現(xiàn)報(bào)告如下：

1資料與方法

1.1臨床資料44例MDS患者均來自我院住院患者，其中男26例，女18例，年齡28-74歲，平均53.2歲。其中MDS-RA18例，MDS-RAS5例，MDS-RAEB-I8例，MDS-RAEB-II13例，所有病例經(jīng)病理、臨床、骨髓細(xì)胞學(xué)及骨髓活檢證實(shí)，均符合MDS的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。同時(shí)收集我院50例正常健康體檢者，男25例，女25例，年齡25-72歲，平均51.4歲。

1.2實(shí)驗(yàn)方法所有實(shí)驗(yàn)對(duì)象清晨空腹抽取靜脈血5 ml，離心1 000 r/min，5 min，吸取血清分裝后于-70℃保存?zhèn)溆?。采用酶?lián)免疫吸附法定量檢測VEGF-C、COX-2、Cath-D，嚴(yán)格按照操作說明書操作，每次測定標(biāo)本時(shí)，同時(shí)進(jìn)行陰性、陽性質(zhì)控物對(duì)照。VEGF-C、COX-2試劑盒購自上海滬峰化工有限公司，Cath-D試劑盒購自武漢中美科技有限公司，酶標(biāo)儀為德國HAMILTON MICRO LAB○RFAME。

2結(jié)果

2.1VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS組中的表達(dá)分別為382.52±96.53ng/L、282.33±52.62pg/ml、19.47±7.21μg/L，顯著高于對(duì)照組的表達(dá)(均P< 0.01)。見表1。

組別nVEGF-C(ng/L)COX-2(pg/mL)Cath-D(μg/L)MDS組44382.52±96.53282.33±52.6219.47±7.21正常對(duì)照組50126.18±42.35108.19±27.388.52±3.39t值6.4818.8374.486P值0.0000.0000.000

2.2VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS不同臨床特征中的表達(dá)，它們?cè)谛詣e、年齡比較中無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，而在不同臨床分型比較中VEGF-C、COX-2、Cath-D的表達(dá)與MDS分型呈正相關(guān)性。見表2。

項(xiàng)目例數(shù)(n)VEGF-C(ng/L)COX-2(pg/ml)Cath-D(μg/L)性別 男26384.22±92.31279.46±49.6719.72±7.18 女18381.16±91.15284.18±56.4319.03±6.35年齡(歲) ≥5032378.49±96.38285.67±58.4219.91±7.28 <5012384.18±92.46278.86±54.6319.32±6.86臨床分型 MDS-RA18225.64±76.39177.39±38.6414.21±5.29 MDS-RAS5278.32±82.11*208.22±45.19*17.33±6.38* MDS-RAEB-I8345.31±91.96*268.35±42.49*20.61±8.32* MDS-RAEB-II13403.22±95.48*311.19±45.66*24.85±8.67*

注：VEGF-C、COX-2、Cath-D在性別、年齡比較中，均P> 0.05。與MDS-RA組比較，*P<0.01。

3討論

VEGF-C是近年來新發(fā)現(xiàn)的血管內(nèi)皮生長因子家族成員，也是目前已知作用最強(qiáng)的促血管生成因子之一[2]，具有很強(qiáng)的血管生成和增強(qiáng)血管通透性的作用，能刺激腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。VEGF-C在惡性腫瘤的生長、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中起著重要的調(diào)節(jié)作用，其表達(dá)的強(qiáng)弱直接影響腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移。文獻(xiàn)報(bào)道其在膀胱癌、胃癌、大腸癌、胰腺癌等多種惡性腫瘤細(xì)胞中均有表達(dá)[2]，且VEGF-C的表達(dá)還是結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移、胃癌肝轉(zhuǎn)移及其他腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的預(yù)測指標(biāo)[3,4]。COX-2是催化膜磷脂花生四烯酸轉(zhuǎn)化為前列腺素類物質(zhì)的限速酶，是一種膜結(jié)合蛋白酶，存在于核膜和微粒體膜中，主要位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)及細(xì)胞核周[5]。正常生理情況下，大多數(shù)正常組織中表達(dá)極少，在多種惡性腫瘤組織中呈高表達(dá)，并參與多種疾病發(fā)生發(fā)展的病理過程[6]。環(huán)氧化酶有兩種同工酶：COX-1和COX-2。 近年來研究發(fā)現(xiàn)，COX-2在肺癌、乳腺癌、消化道惡性腫瘤、前列腺癌等多種腫瘤中過度表達(dá)，通過多種機(jī)制參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移[7]。Cath-D是一種相對(duì)分子量為34kD 的天門冬氨酸內(nèi)切蛋白酶,為一種酸性溶酶體蛋白酶，廣泛存在于各種組織細(xì)胞溶酶體和內(nèi)體中，其主要作用為降解蛋白質(zhì)[8]。Cath-D能溶解基底膜細(xì)胞外基質(zhì)和結(jié)締組織，促進(jìn)腫瘤脈管生成，并刺激癌細(xì)胞生長，并參與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移[9]。Cath-D在正常組織表達(dá)極少，而在惡性腫瘤呈高表達(dá)[10]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS患者血清中呈高表達(dá)，并且與MDS分型呈正相關(guān)性，三者協(xié)調(diào)一致的表達(dá)。COX-2能催化產(chǎn)生PGE2可刺激VEGF-C的產(chǎn)生，從而促進(jìn)腫瘤血管生成[11]。也有觀點(diǎn)認(rèn)為兩者通過配體-受體的相互作用，起到化學(xué)趨化的作用，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞以淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞為目標(biāo)，引起淋巴道轉(zhuǎn)移[12]。Cath-D可以提高VEGF-C的表達(dá)，而 Cath-D 可以通過VEGF-C的間接作用，誘導(dǎo)腫瘤淋巴管生成[13]，所以三者之間互相作用，共同參與了MDS的發(fā)生、發(fā)展。我們的研究發(fā)現(xiàn)，VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS組中的表達(dá)顯著高于對(duì)照組的表達(dá)(均P<0.01)，且其在不同臨床分型中的表達(dá)呈遞增式表達(dá)。MDS具有較高的轉(zhuǎn)化急性白血病(AML)的風(fēng)險(xiǎn)，約30%最終轉(zhuǎn)化為AML[14]，所以目前除了骨髓移植治療外，尚未發(fā)現(xiàn)更好的治療方法。本文中的MDS發(fā)病平均年齡為53.2歲，與文獻(xiàn)報(bào)道相符[15-16]，因此早期發(fā)現(xiàn)、診斷、治療MDS為當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究者的所希望看到的。綜上所述，聯(lián)合檢測血清VEGF-C、COX-2、Cath-D的表達(dá)對(duì)MDS疾病的發(fā)展、治療、預(yù)后有重要的作用。

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關(guān)鍵詞：VEGF-C;COX-2;Cath-D;MDS

The expression of serum vascular endothelial growth factor-C,cyclooxygenase 2 and cathepsin-D in myelodysplastic syndromes patientsLUZhi-xian,WANGYa-ping，XIEMin-hu.(ClinicalLaboratory，WuxiNo.3Hospital，Wuxi214041，China)

Abstract:ObjectiveTo discuss the significance of serum vascular endothelialgrowth factor-C(VEGF-C),cyclooxygenase 2(COX-2) and cathepsin-D(Cath-D) in myelodysplastic syndromes(MDS) patients.MethodsSerum VEGF-C,COX-2 and Cath-D were detected by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) in 44 patients with MDS,to compare with 50 healthy people (Control group).ResultsSerum VEGF-C,COX-2 and Cath-D level in MDS patients group were all increased significantly compared with the control group (allP<0.01).To these markers,there were not significant difference in sex and age to the two groups，and the results of correlation analysis show that VEGF-C,COX-2 and Cath-D had a positive correlation with Clinical typing.ConclusionTo evaluate the advancing,treatment and Prognosis of MDS,There are more value to test the serum level of VEGF-C,COX-2 and Cath-D.

Key words:VEGF-C;COX-2;Cath-D;MDS

(收稿日期：2014-05-19)

作者簡介：盧志賢(1976-)，男，副主任技師，主要從事臨床檢驗(yàn)工作研究。

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

中圖分類號(hào)：R552

文章編號(hào)：1007-4287(2015)05-0780-03