孫炳欣，許　爽，崔　薇，劉　紅，孫　宇，吳　靜*

(1.長春市疾病預(yù)防控制中心，吉林 長春130033;2.吉林省疾病預(yù)防控制中心，吉林 長春 130033)

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長春市2013年手足口病病原學(xué)監(jiān)測結(jié)果及分析

孫炳欣1，許爽2，崔薇1，劉紅1，孫宇1，吳靜1*

(1.長春市疾病預(yù)防控制中心，吉林 長春130033;2.吉林省疾病預(yù)防控制中心，吉林 長春 130033)

摘要：目的了解2013年長春市手足口病流行的病原學(xué)及分布特征，為今后手足口病防治工作提供參考依據(jù)。方法用實(shí)時(shí)定量PCR(Real-time PCR)法對臨床診斷手足口病例標(biāo)本進(jìn)行核酸檢測。結(jié)果2013年1月-12月共采集病例標(biāo)本376例手足口病例的標(biāo)本，陽性率為68.94%，96.05%的病例在6歲以下，高發(fā)期在5月-9月。結(jié)論2013年長春市手足口患者以小于6歲的兒童為主，其主要病原是柯薩奇6型(CA6)，其次是腸道病毒71型(EV71)。

(ChinJLabDiagn,2015,19:0762)

手足口病( hand,foot and mouth disease,HFMD)通常是由腸道病毒引起的兒童急性傳染病，在人口密度較高的亞太地區(qū)廣泛流行[1，2]。其主要臨床特征為發(fā)熱和手、足、口腔和臀部等部位出現(xiàn)皮疹，患者主要為學(xué)齡前兒童。絕大多數(shù)HFMD患者預(yù)后良好，但少數(shù)嚴(yán)重的患者會(huì)出現(xiàn)腦炎、心肌炎、肺水腫和急性弛緩性麻痹等癥狀，個(gè)別危重患兒可導(dǎo)致死亡[3]。

手足口病的致病原因主要是由病毒引起，病毒主要是小RNA病毒科腸道病毒屬，包括柯薩奇病毒A(CVA)組的2,4,5,6,8,9,10,16型，柯薩奇病毒B(CVB)組的1,2,3,4,5型，腸道病毒71型(enterovirus 71,EV71)，?？刹《?ECHO)等，其中以EV71及CA16最為常見[4]。目前根據(jù)國內(nèi)手足口病監(jiān)測結(jié)果的報(bào)道，各地均有非EV71非CA16型腸道病毒的檢出，但其型別和所占比例卻不清楚[5-7]。日本、芬蘭等國曾發(fā)生由非EV71非CA16腸道病毒引起的手足口病疫情，因此深入了解并日常監(jiān)測這部分腸道病毒，對手足口病的防治具有重要意義。

2013年，長春市在手足口病常規(guī)監(jiān)測的基礎(chǔ)上，對非EV71非CA16腸道病毒陽性標(biāo)本送吉林省疾病預(yù)防控制中心病毒所進(jìn)一步檢測分型，并對檢測結(jié)果進(jìn)行分析。

1材料與方法

1.1　標(biāo)本來源

2013年1月-12月長春市手足口病監(jiān)測哨點(diǎn)醫(yī)院及長春地區(qū)各縣(市)區(qū)疾控中心采集的367例手足口病例的糞便，肛拭子，咽拭子標(biāo)本。

1.2　方法

1.2.1標(biāo)本的處理

糞便標(biāo)本用含10%氯仿的生理鹽水處理，震蕩，2 000 rpm離心20 min后取上清進(jìn)行RNA提?。黄渌鼧?biāo)本充分震蕩后直接用于RNA提取。

1.2.2核酸提取

使用QIAGEN 公司的QIAamp○RViral RNA Mini Kit 試劑盒提取RNA。

1.2.3Real-time PCR反應(yīng)

使用江蘇碩士生物科技有限公司的腸道病毒通用型/腸道病毒71型/柯薩奇A16型核酸檢測試劑盒，在QIAGEN Rotor-Gene Q Real-time PCR儀上對標(biāo)本進(jìn)行檢測同時(shí)分型。

1.2.4柯薩奇A6的檢測

對檢測結(jié)果為腸道病毒通用型陽性，腸道病毒71型與柯薩奇A16型陰性的標(biāo)本一部分送吉林省疾病預(yù)防控制中心病毒所進(jìn)一步分型檢測，檢測結(jié)果反饋給長春市疾病預(yù)防控制中心。另一部分標(biāo)本使用江蘇碩士生物科技有限公司的柯薩奇A6型核酸檢測試劑盒，在QIAGEN Rotor-Gene Q Real-time PCR儀上對標(biāo)本進(jìn)行檢測。

2結(jié)果

2.1　Real-time PCR檢測結(jié)果

2013年共對367例手足口病例標(biāo)本進(jìn)行病原學(xué)檢測，有253例核酸檢測為陽性，總陽性率為68.94%。在253例核酸檢測陽性病例中， CA6型陽性158例，占陽性檢出的62.45%； EV71型陽性58例，占陽性檢出的22.92%；CA16型陽性20例，占陽性檢出的7.91%；其它型別腸道病毒陽性17例，占陽性檢出的6.72%。

2.2　腸道病毒型別與手足口病重癥的關(guān)系

367例手足口病病例中，18例為重癥患者，無死亡病例。18例重癥患者中，6例感染EV71，6例感

染CA6，1例感染CA16，還有5例感染其他型別腸道病毒。

2.3　病例的時(shí)間分布

2013年我們對長春地區(qū)手足口病進(jìn)行了全年監(jiān)測，經(jīng)檢測結(jié)果顯示5月份病例數(shù)急劇增多，6月-8月份達(dá)到高峰，10月份病例數(shù)明顯降低。從時(shí)間分布上分析長春地區(qū)2013年手足口病高發(fā)期在5月-9月份(見圖1)。

圖1　2013年長春市手足口病原體檢測結(jié)果的時(shí)間分布

2.4　病例的年齡分布

在送檢手足口病病例中，陽性病例的最小年齡為8個(gè)月，最大年齡為11歲。患者年齡主要集中在0歲-6歲，此年齡段病例數(shù)為243例，占病例總數(shù)的96.05%(243/253)(見表1)。

表1　病原體檢測結(jié)果的年齡分布

2.5　病例的性別比例

采集的367例手足口病例中，男性225例，女性142例，男女比例1.58∶1。在核酸檢測陽性的253例患者中，男性151例，女性102例，男女比例1.48∶1(見表2)。

表2　病原體檢測結(jié)果的性別分布

3討論

從長春市2013年手足口病病原體檢測結(jié)果可以看出，其主要病原體是柯薩奇6型(CA6)，其次是腸道病毒71型(EV71)和柯薩奇16型(CA16)。長春市2012年手足口主要病原是CA16，其次是EV71，還有非CA16、非EV71型腸道病毒核酸陽性的檢出[8]。而長春市2011年1月-8月手足口病主要病原體是EV71，其次是CA16[9]。根據(jù)近三年長春市手足口病主要病原體的檢測結(jié)果，說明CA6型腸道病毒已成為引起長春市手足口病除EV71型或CA16型病毒之外的又一主要病原體。2005年日本曾報(bào)道CA6和CA10的流行[10]。2008年新加坡手足口病暴發(fā)期間，檢測到的主要流行病原體為EV71，其次為CA6和CA10[1]。2010年對上海部分地區(qū)440例手足口病的標(biāo)本檢測，結(jié)果顯示引起手足病的腸道病毒主要為 EV71和CA16，其次為CA6和CA10[11]。目前，國內(nèi)引起手足口病的主要腸道病毒為EV71和CA16，關(guān)于CA6型腸道病毒引起手足口病流行的報(bào)道較少，長春市2013年手足口病檢測結(jié)果提示我們應(yīng)加強(qiáng)對非EV71和非CA16型尤其是CA6型腸道病毒的監(jiān)測。同時(shí)，應(yīng)深入研究長春市手足口病的病原譜和主要病原體的分子流行病學(xué)特征，為手足口病的預(yù)測、預(yù)警和防治提供準(zhǔn)確依據(jù)。

從手足口病發(fā)病時(shí)間看，2013年5月-9月份手足口病患者數(shù)量明顯高于同年的其它月份。與2012年發(fā)病時(shí)間上相同[7]。分析CA6和EV71陽性病例的月份分布，發(fā)現(xiàn)CA6和EV71在流行月份上略有不同，EV71主要流行在5-8月，而CA6主要流行在5-9月。分析原因一方面可能由于長春市每年這幾個(gè)月的氣候條件較利于病毒生長繁殖，另一方面CA6可能存在較強(qiáng)的傳播性。

結(jié)合臨床特征來看，引起18例手足口病重癥感染主要病原體是EV71和CA6，其次是其他腸道病毒型和CA16。提示我們除EV71外，CA6和其他型別的腸道病毒也能引起手足口病重癥。感染CA6引起手足口病的臨床癥狀值得關(guān)注。

從不同年齡患者的檢測結(jié)果來看，主要以6歲以下兒童為主，發(fā)病數(shù)占總發(fā)病數(shù)的96.05%，其中1-3歲兒童發(fā)病數(shù)最高。男性發(fā)病數(shù)高于女性。這與長春市2012年檢測結(jié)果一致[7]。說明6歲以下兒童最易感染手足口病，是腸道病毒主要的易感人群。應(yīng)加大對該類人群的監(jiān)測力度，做到早發(fā)現(xiàn)、早隔離、早治療。同時(shí)應(yīng)加強(qiáng)手足口病防病知識的宣傳教育，建立良好的個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣，從而采取有效的預(yù)防措施，以避免手足口病的大規(guī)模流行。

參考文獻(xiàn)：

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關(guān)鍵詞：手足口??；PCR；CA6；EV71

The analysis of the etiological surveillance results of Hand-foot-mouth Disease in Changchun in 2013SUNBing-xin1,XUShuang2,CUIWei1,etal.(1.ChangchunCentreforDiseaseControlandPrevention,Changchun130033；2.JiLinProvinceCentreforDiseaseControlandPrevention)

Abstract:ObjectiveTo grasp the etiological characteristics and the distribution of HFMD in Changchun,and to provide a basis for further prevention and control of HFMD.MethodsSpecimens collected from clinically diagnosed HFMD cases were tested by real-time PCR.Results376 specimens were collected from January to December and the positive rate was 68.94%.96.05% of the cases were under 6 years old and the incidence peak occurred during May and September.ConclusionHFMD occurred mostly at the children under 6 years old.The major pathogen of HFMD was CA6,followed by EV71 in Changchun during 2013.

Key words:Hand foot mouth disease;PCR;CA6;EV71

(收稿日期：2014-05-06)

作者簡介：孫炳欣(1979-)，女，研究生，長春市疾病預(yù)防控制中心主管檢驗(yàn)技師，從事病毒監(jiān)測工作。

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

中圖分類號：R72

文章編號：1007-4287(2015)05-0762-03

*通訊作者

基金項(xiàng)目：吉林省衛(wèi)生廳立項(xiàng)課題(2010ZC025)