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        響應(yīng)面優(yōu)化襄荷總黃酮提取及抗氧化研究

        2015-02-21 13:00:12魏和平王天華
        食品工業(yè)科技 2015年5期
        關(guān)鍵詞:液料光度黃酮

        許 遠(yuǎn),魏和平,吳 彥,王天華

        (安慶師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,安徽安慶246011)

        襄荷(Zingiber strioatum),又名陽(yáng)荷、洋姜、蓮花姜、洋胡姜等,屬于姜科姜屬多年生草本植物,我國(guó)長(zhǎng)江流域各省均有野生資源分布,在很多地區(qū),民間也有種植和食用襄荷的習(xí)慣。據(jù)《中藥大辭典》和《全國(guó)蔬菜全科》記載,襄荷具有很高的食用價(jià)值和藥用成分,其富含蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、糖類(lèi)、有機(jī)酸及礦物元素等,具有活血調(diào)經(jīng)、鎮(zhèn)咳祛痰、消腫解毒等功效[1]。另外,襄荷具有特殊芳香氣味,驅(qū)蟲(chóng)效果明顯,病蟲(chóng)害很少,極少使用農(nóng)藥,是理想的綠色食品。因此,襄荷已成為一種新型保健蔬菜,亟待開(kāi)發(fā)。

        目前我國(guó)對(duì)襄荷的研究多集中在栽培[2]、組織培養(yǎng)[3]、快速繁殖[4]和食用資源[1]等方面,對(duì)其生物活性方面的研究甚少。黃酮類(lèi)化合物是廣泛存在于植物中的次生代謝產(chǎn)物[5],具有抗自由基和抗氧化作用,還有抗癌、抗腫瘤、降血脂、治療心腦血管疾病、鎮(zhèn)痛等藥用保健功能[6],因此,總黃酮含量已成為保健蔬菜的衡量參數(shù)之一。本文通過(guò)超聲波輔助乙醇提取法對(duì)襄荷可食用的花苞部分進(jìn)行了總黃酮測(cè)定,并采取響應(yīng)面分析方法對(duì)其提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,同時(shí)對(duì)其提取物的抗氧化性進(jìn)行研究,旨在為提高襄荷利用價(jià)值和進(jìn)一步開(kāi)發(fā)這種天然保健蔬菜提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 材料與儀器

        新鮮襄荷花苞,于2013年9月采自安徽省岳西縣山區(qū),儲(chǔ)存于冰箱(0~4℃)備用。

        蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(>98%),合肥博美生物科技有限責(zé)任公司;DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)Sigma公司;無(wú)水乙醇、鹽酸、亞硝酸鈉、氫氧化鈉、硝酸鋁、抗壞血酸、Tris、鄰苯三酚、三氯乙酸、水楊酸、硫酸亞鐵、鐵氰化鉀、三氯化鐵、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉等均為分析純。

        FA2004B電子天平 上海越平科學(xué)儀器有限公司;DZ-2BCⅡ真空干燥箱 天津市泰斯特儀器有限公司;RE-2000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海洪旋實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵 鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司;SY-360型臺(tái)式數(shù)控超聲波提取機(jī) 昆山市超聲儀器有限公司;UV759紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 上海佑科儀器儀表有限公司;手提式多功能粉碎機(jī) 上海廣沙工貿(mào)有限公司;HHS型電熱恒溫水浴鍋 上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠; SC-3612低速離心機(jī) 安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司。

        1.2 實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 采用亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉顯色法[7],精密稱(chēng)取105℃真空干燥至恒重的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品6mg,用70%乙醇溶解并定容至10m L,搖勻,得0.6mg/m L的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液。準(zhǔn)確吸取0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0m L上述標(biāo)準(zhǔn)液分別置于10m L的容量瓶中,加2~4m L蒸餾水,加0.4m L 5%亞硝酸鈉,搖勻,放置6m in,加入0.4m L 10%硝酸鋁,搖勻,放置6m in,加入4.0m L 4%氫氧化鈉,再加蒸餾水至刻度、搖勻,放置15min,以空白試劑作對(duì)比參照,在510nm處測(cè)定吸光度,得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程:A=3.8367C+0.3438(A為吸光度,C為蘆丁濃度),R2=0.9978,表明了蘆丁在濃度0~0.3mg/m L之內(nèi)線性關(guān)系良好。

        1.2.2 襄荷總黃酮得率測(cè)定 將新鮮襄荷花苞洗凈、切碎、烘干,以粉碎機(jī)粉碎,過(guò)60目篩,制成襄荷粉。準(zhǔn)確稱(chēng)取10.0g襄荷粉,加入一定量乙醇溶液,選擇一定超聲條件處理后,置70℃水浴中回流提取2h(預(yù)實(shí)驗(yàn)顯示提取溫度達(dá)到70℃和提取時(shí)間超過(guò)2h后,得率變化不大,故此二因素固定),取出,減壓抽濾濃縮,測(cè)定濾液體積。取2m L上述濾液于10m L容量瓶中,以制備標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法,在510nm處測(cè)定其吸光度,并利用標(biāo)曲獲得的回歸方程計(jì)算襄荷總黃酮得率,重復(fù)三次,取平均值,計(jì)算公式如下:

        式中:C為提取液中總黃酮濃度(mg/m L);V1為顯色時(shí)定容體積(m L);V2為顯色時(shí)取樣體積(m L); V為提取液總體積(m);m為原料質(zhì)量(g)。

        1.2.3 單因素實(shí)驗(yàn) 以乙醇濃度、液料比、超聲溫度、超聲時(shí)間四個(gè)因素為研究對(duì)象,以襄荷總黃酮得率為指標(biāo),進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)。

        1.2.3.1 乙醇濃度對(duì)得率的影響 準(zhǔn)確稱(chēng)取10.0g的襄荷粉5份,分別加入體積分?jǐn)?shù)為50%、60%、70%、 80%、90%的乙醇溶液,以15∶1(m L∶g)的液料比(為溶劑體積(m L):物料質(zhì)量(g),下同),在溫度50℃條件下,超聲處理15m in,之后在70℃水浴中回流提取2h。

        1.2.3.2 液料比對(duì)得率的影響 準(zhǔn)確稱(chēng)取10.0g的襄荷粉5份,分別以液料比10∶1、15∶1、20∶1、25∶1、30∶1(m L∶g)加入60%乙醇溶液,在溫度50℃條件下,超聲處理15m in后置70℃水浴中回流提取2h。

        1.2.3.3 超聲時(shí)間對(duì)得率的影響 準(zhǔn)確稱(chēng)取10.0g的襄荷粉5份,以15∶1(m L∶g)的液料比加入體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇溶液,在溫度50℃條件下,分別超聲處理10、15、20、25、30m in后置 70℃水浴中回流提取2h。

        1.2.3.4 超聲溫度對(duì)得率的影響 準(zhǔn)確稱(chēng)取10.0g的襄荷粉5份,以15∶1(m L∶g)的液料比加入體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇溶液,分別在溫度40、45、50、55、60℃條件下,超聲處理15m in后置70℃水浴中回流提取2h。

        1.2.4 響應(yīng)面法對(duì)提取工藝參數(shù)的優(yōu)化與驗(yàn)證 為分析各影響因素間的交互作用對(duì)襄荷總黃酮得率的影響,在單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)之上,根據(jù) Box-Benhnken中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,運(yùn)用 Design Expert 8.0軟件設(shè)計(jì)響應(yīng)面實(shí)驗(yàn),分別選擇乙醇濃度(A)、液料比(B)、超聲時(shí)間(C)、超聲溫度(D)作為自變量,以襄荷總黃酮的得率(R1)作為響應(yīng)值設(shè)計(jì)響應(yīng)面實(shí)驗(yàn),因素水平取值見(jiàn)表1。

        表1 響應(yīng)面設(shè)計(jì)因素和水平Table1 Levels and factors of response surface analysis

        1.2.5 襄荷總黃酮抗氧化性實(shí)驗(yàn) 在響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出的最佳提取條件下獲得襄荷總黃酮提取液,進(jìn)行總還原能力和對(duì)DPPH·、超氧陰離子(O2-·)、羥基自由基(·OH)三者的清除能力測(cè)定,分別將提取濃縮液配制成不同濃度梯度的待測(cè)溶液,均以抗壞血酸(VC)為對(duì)照,比較結(jié)果確定其抗氧化能力。

        1.2.5.1 總還原能力的測(cè)定 測(cè)定方法參照文獻(xiàn)[8],取2.5m L不同濃度待測(cè)液,加入2.5m L 0.2mol/L、pH6.6磷酸緩沖溶液及2.5m L 1%鐵氰化鉀,50℃水浴20m in后急速冷卻,加入2.5m L 10%三氯乙酸溶液,于3000 r/min離心10m in,取上清液5m L,加4m L蒸餾水,及1m L 0.1%FeCl3,混勻后10m in于700nm處測(cè)定吸光值表示樣品還原能力,以蒸餾水為空白。

        1.2.5.2 DPPH·清除率的測(cè)定 測(cè)定方法參照文獻(xiàn)[9-10],取4m L不同濃度待測(cè)液,加入4m L濃度為2 ×10-4mol/L的DPPH溶液,搖勻,室溫下避光反應(yīng)30m in,以無(wú)水乙醇作對(duì)照,于517nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度A。對(duì)照組以無(wú)水乙醇代替DPPH溶液,與待測(cè)液混勻,于517nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度A1,空白組以上述DPPH溶液與無(wú)水乙醇混合后于517nm波長(zhǎng)處的吸光度A0。按下式計(jì)算其清除率:

        式中:A為樣品組吸光度值;A1為對(duì)照組吸光度值;A0為空白照組吸光度值。

        式中:A為樣品組吸光度值;A1為對(duì)照組吸光度值;A0為空白照組吸光度值。

        1.2.5.4 羥基自由基(·OH)清除率的測(cè)定 測(cè)定方法參照文獻(xiàn)[12-13],取2m L不同濃度的待測(cè)液,置于10m L離心管中,分別加入1m L 9mmol/L的FeSO4溶液,2m L 9mmol/L的水楊酸-乙醇溶液,混勻,加入1m L 0.01%的H2O2溶液?jiǎn)?dòng)反應(yīng),于室溫下反應(yīng)1h,以蒸餾水調(diào)零,于510nm處測(cè)定吸光度A。對(duì)照組以蒸餾水代替H2O2溶液,于510nm處測(cè)定吸光度A1,空白組以蒸餾水代替待測(cè)液,于510nm處測(cè)定吸光度A0。按下式計(jì)算其清除率:

        式中:A為樣品組吸光度值;A1為對(duì)照組吸光度值;A0為空白照組吸光度值。

        1.3 數(shù)據(jù)處理

        采用Microsoft Excel(Office 2003)軟件整理數(shù)據(jù),Design Expert 8.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        2.1.1 乙醇濃度的選擇 由圖1可以看出:隨著乙醇濃度的升高總黃酮得率上升,達(dá)到70%后呈略下降趨勢(shì)。根據(jù)相似相溶原理[14],溶劑與提取物極性達(dá)到相似時(shí),提取物較易從植物細(xì)胞中溢出,黃酮類(lèi)物質(zhì)是弱極性化合物,易溶于弱極性溶劑,70%的乙醇溶液極性可能與襄荷黃酮的極性最為相似,故在此濃度下提取率最高。當(dāng)乙醇濃度大于70%時(shí),提取含量略呈下降,可能是隨著乙醇濃度升高,其極性與提取物的極性相差逐漸增大,從而導(dǎo)致溶液對(duì)黃酮類(lèi)化合物溶解度降低,同時(shí)一些醇溶性雜質(zhì)、色素、親脂性強(qiáng)的成分等溶出增多,也不利于黃酮類(lèi)化合物提取,進(jìn)而影響得率[15]。因此乙醇濃度選用70%為適宜。

        2.1.2 液料比的選擇 由圖2可以看出:隨著液料比的增加,襄荷中總黃酮得率不斷增大,原因是隨液料比的增大,濃度差提高,有利于傳質(zhì),提取越來(lái)越充分,但當(dāng)液料比大于20∶1時(shí)曲線略有下降并逐漸平穩(wěn),原因可能是當(dāng)提取溶劑量太大時(shí),黃酮的溶出已基本達(dá)到平衡,再增加溶劑量,提取效果并不能明顯提高,同時(shí)由于溶劑體積的增大,使得一些非黃酮類(lèi)的化合物溶解度增大,與黃酮類(lèi)化合物形成了一定的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系,從而導(dǎo)致提取含量減少。因此液料比選用20∶1為適宜。

        圖1 乙醇濃度對(duì)總黃酮得率的影響Fig.1 Effect of ethanol concentration on extraction rate of total flavonoids

        圖2 液料比對(duì)總黃酮得率的影響Fig.2 Effect of liquid-solid ratio on extraction rate of total flavonoids

        2.1.3 超聲時(shí)間的選擇 由圖3可以看出:隨著超聲波作用時(shí)間的增加,襄荷總黃酮的得率升高;但當(dāng)時(shí)間大于20m in后總黃酮得率趨于平穩(wěn)且略有下降??赡苁浅晻r(shí)間太長(zhǎng),會(huì)破壞黃酮類(lèi)化合物的有效結(jié)構(gòu),使其降解,所以得率反而下降。所以超聲時(shí)間選用20min為宜。

        圖3 超聲時(shí)間對(duì)總黃酮得率的影響Fig.3 Effect of ultrasonic time on extraction rate of total flavonoids

        2.1.4 超聲溫度的選擇 由圖4可以看出:隨著超聲溫度的升高總黃酮得率呈上升趨勢(shì),達(dá)到50℃后呈下降趨勢(shì)。溫度升高到一定程度可能會(huì)破壞樣品中黃酮類(lèi)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)造成樣品中黃酮類(lèi)物質(zhì)的損失,并且會(huì)導(dǎo)致提取液的大量揮發(fā)。因而超聲溫度選用50℃為宜。

        圖4 超聲溫度對(duì)總黃酮得率的影響Fig.4 Effect of ultrasonic temperature on extraction rate of total flavonoids

        2.2 響應(yīng)面法確定襄荷總黃酮的最佳提取條件

        2.2.1 響應(yīng)面法實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果 選擇乙醇濃度(A)、液料比(B)、超聲時(shí)間(C)及超聲溫度(D)作為自變量,以襄荷總黃酮的得率(R1)作為響應(yīng)值設(shè)計(jì)響應(yīng)面實(shí)驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)表2。

        表2 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table2 Result of response surface design

        利用Design Expert8.0軟件對(duì)表2的數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸分析,擬合后得到A、B、C、D的二次多項(xiàng)回歸模型為:(公式)

        對(duì)上述方程進(jìn)行方差分析,結(jié)果如表3所示。

        結(jié)果顯示,模型顯著性檢驗(yàn)p值<0.0001,為極顯著,失擬項(xiàng)p值為0.3181>0.05,不顯著,無(wú)失擬因素存在。該回歸方程相關(guān)系數(shù)R2=0.9990,校正決定系數(shù)R=0.9979,說(shuō)明該模型能夠解釋99.90%的變化,因變量與所選自變量之間線性關(guān)系顯著。以上證明該模型與實(shí)驗(yàn)擬合度良好,可用該回歸方程代替真實(shí)實(shí)驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行預(yù)測(cè)和分析。

        模型的一次項(xiàng)A、B、C、D為極顯著;二次項(xiàng)A2、B2、C2、D2為極顯著;交互項(xiàng)AB、AC、BD為極顯著,AD、CD為顯著,BC不顯著,由此可知,自變量與響應(yīng)值之間不是簡(jiǎn)單的線性關(guān)系。通過(guò)F值可知,各單因素對(duì)襄荷總黃酮得率的影響程度依次為:液料比>超聲溫度>乙醇濃度>超聲時(shí)間;各兩因素交互作用對(duì)襄荷總黃酮得率的影響程度依次為:液料比和乙醇濃度>乙醇濃度和超聲時(shí)間=液料比和超聲溫度>乙醇濃度和超聲溫度>超聲時(shí)間和超聲溫度>液料比和超聲時(shí)間。

        2.2.2 響應(yīng)面分析 圖5是按所得數(shù)學(xué)模型繪制的響應(yīng)曲面圖,各因素的交互作用效應(yīng)可以從響應(yīng)曲面的坡度變化及其等高線得到反映。響應(yīng)面曲面的坡度直接反映了在處理?xiàng)l件下發(fā)生變化時(shí)襄荷總黃酮得率的響應(yīng)靈敏程度,如坡度相對(duì)平緩,響應(yīng)值不敏感;反之,如坡度相對(duì)陡峭,響應(yīng)值敏感。響應(yīng)值隨哪種因素的變化率更大,說(shuō)明此因素在二者交互作用中對(duì)襄荷總黃酮得率的影響更大。等高線為橢圓形,說(shuō)明兩因素交互作用顯著,若偏圓形,說(shuō)明不太顯著。

        例如,從圖5a可知,其等高線為橢圓形,說(shuō)明乙醇濃度和液料比交互作用顯著;響應(yīng)面坡度較為陡峭,響應(yīng)值隨液料比的變化率大于乙醇濃度的變化率,說(shuō)明在二者交互作用中液料比對(duì)總黃酮得率影響大于超聲時(shí)間。而從圖5d可知,其等高線偏圓形,說(shuō)明液料比和超聲時(shí)間交互作用不太顯著;響應(yīng)面坡度相對(duì)平緩,響應(yīng)值隨液料比的變化率大于超聲時(shí)間的變化率,說(shuō)明在二者交互作用中液料比對(duì)總黃酮得率影響大于超聲時(shí)間。綜合所有響應(yīng)面圖分析,液料比和乙醇濃度的交互作用最顯著,乙醇濃度和超聲時(shí)間、液料比和超聲溫度次之,乙醇濃度和超聲溫度、超聲時(shí)間和超聲溫度再次,液料比和超聲時(shí)間最不顯著,其中液料比和超聲溫度較之乙醇濃度和超聲時(shí)間對(duì)響應(yīng)值的影響更大,此結(jié)果與模型中F值分析結(jié)果一致。

        2.2.3 條件優(yōu)化 根據(jù)響應(yīng)面分析表明:最佳提取工藝?yán)碚撝凳且掖紳舛?0.53%,液料比20.98∶1

        (m L∶g),超聲時(shí)間20.61m in,超聲溫度50.56℃。考慮到實(shí)際操作的便利,將襄荷中總黃酮提取的最佳工藝條件修正為:乙醇濃度 71%,液料比 21∶1 (m L:g),超聲時(shí)間21m in,超聲溫度51℃。按照修正后的條件下進(jìn)行3次驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),結(jié)果如表4所示,襄荷總黃酮得率實(shí)驗(yàn)值為4.50%,與預(yù)測(cè)值4.51%接近,表明實(shí)驗(yàn)結(jié)果理想,實(shí)驗(yàn)?zāi)P瓦x擇合理。

        表3 回歸模型方差分析Table3 Variance analysis of regression model

        圖5 各因素對(duì)總黃酮得率影響的響應(yīng)面分析Fig.5 Responsive surface plot for the effect of factors

        表4 實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證響應(yīng)面優(yōu)化條件Table4 Conformation results of the optimized extraction conditions

        2.3 抗氧化實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析

        2.3.1 總還原能力實(shí)驗(yàn)結(jié)果 如圖6所示,襄荷總黃酮樣品的還原能力隨濃度的增大不斷增強(qiáng),且增幅逐漸增大,不斷接近VC還原能力,可見(jiàn)其具有非常強(qiáng)的還原力。

        圖6 樣品與VC還原能力比較Fig.6 Comparison of reducing power on sample with Vitamin C

        2.3.2 清除 DPPH·實(shí)驗(yàn)結(jié)果 如圖7所示,VC清除DPPH·能力隨濃度上升而增大,當(dāng)濃度為15μg/m L時(shí),清除率已達(dá)到94.63%,繼續(xù)增大濃度后清除率無(wú)顯著變化,襄荷總黃酮樣品對(duì)DPPH·的清除能力隨濃度的增大呈明顯增長(zhǎng)趨勢(shì),可見(jiàn)其對(duì)DPPH·有較強(qiáng)的清除能力。

        圖7 樣品與VC清除DPPH·能力比較Fig.7 Comparison of DPPH·radical scavenging activity on sample with Vitamin C

        圖8 樣品與VC清除超氧陰離子(O·)能力比較Fig.8 Comparison of superoxide radical scavenging activity on sample with Vitamin C

        2.3.4 清除羥基自由基(·OH)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 如圖9所示,VC在0.3mg/m L到0.7mg/m L的濃度范圍內(nèi),對(duì)羥基自由基(·OH)始終保持很高的清除能力,清除率幾乎達(dá)到100%,襄荷黃酮樣品在低濃度時(shí)對(duì)羥基自由基(·OH)的清除能力與VC相差較多,但隨著濃度的上升,其清除能力顯著增強(qiáng),在濃度為0.7mg/m L時(shí)清除率達(dá)到92.1%,表明其對(duì)羥基自由基(·OH)有較強(qiáng)的清除能力。

        圖9 樣品與VC清除羥基自由基(·OH)能力比較Fig.9 Comparison of hydroxyl radical scavenging activity on sample with Vitamin C

        3 結(jié)論與討論

        乙醇是提取黃酮的優(yōu)良有機(jī)溶劑之一[16],超聲波的空化作用可充分破壞植物細(xì)胞,加速胞內(nèi)物質(zhì)釋放溶解,增大提取效率[17-18]。如許效群等在提取苦蕎米糠總黃酮研究中發(fā)現(xiàn),超聲波輔助提取率較之水浴法提取率大大提高[16],蔣少華等在洋蔥皮中類(lèi)黃酮不同提取工藝的比較研究結(jié)果顯示,超聲波法較之回流法可加速和提高黃酮提取率,較之微波提取法對(duì)設(shè)備的要求更為簡(jiǎn)單[19]。此外,利用響應(yīng)面分析方法進(jìn)行最佳工藝條件優(yōu)化,可克服傳統(tǒng)正交實(shí)驗(yàn)只能給出最佳因素水平組合而無(wú)法找出整個(gè)區(qū)域上因素的最佳組合和最優(yōu)值的缺陷[20],許多學(xué)者均使用響應(yīng)面法優(yōu)化植物有效成分的提取工藝得到了較為準(zhǔn)確的工藝參數(shù)[21-23],如常麗新等利用響應(yīng)面法優(yōu)化了玉米芯黃酮的提取工藝[22]。故本文采用超聲波輔助乙醇提取法提取襄荷總黃酮,根據(jù)中心組合設(shè)計(jì)原理,采用4因素3水平的響應(yīng)面分析,得出了襄荷總黃酮的最佳提取工藝條件:乙醇濃度為71%,液料比為21∶1(m L∶g),超聲時(shí)間為21min,超聲溫度為51℃。在最佳提取工藝條件下測(cè)得襄荷花苞總黃酮含量為4.50%。大量研究發(fā)現(xiàn),黃酮含量高的蔬菜,具有預(yù)防心腦血管疾病、抗衰老、抗氧化、增強(qiáng)細(xì)胞免疫力和預(yù)防腫瘤等功效[24],本研究抗氧化實(shí)驗(yàn)也證明,襄荷總黃酮具有很好的還原能力,對(duì)DPPH·和羥基自由基(·OH)具有較強(qiáng)的清除能力,對(duì)于超氧陰離子(O·)也具有一定的清除能力,抗氧化效果總體表現(xiàn)良好。因此,襄荷可作為新型保健蔬菜進(jìn)行深度開(kāi)發(fā)。

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