胡曉玲，汪新明，鄧淑芬，葉 蕾

冷凝集素會給交叉配血及血型鑒定帶來干擾，因其為IgM 類完全抗體， 在低溫時可使自身紅細胞、O 型紅細胞及獻血員相同血型的紅細胞發(fā)生凝集[1]。 在溫度達到20 ℃以上時，冷凝集素效價逐漸降低，凝集消失。 筆者在工作中遇到1 例脾功能亢進患者，在手術用血時因冷凝集素干擾導致交叉配血不合， 采用37 ℃加溫鹽水洗滌紅細胞及37 ℃水浴血清的方法快速消除干擾，及時準確地為患者發(fā)放了相合的血液， 保證了輸血治療的安全有效，現將處理過程報告如下。

1 病例摘要

患者，女，59 歲，既往無輸血史，臨床診斷為巨脾并脾功能亢進，實驗室檢查結果：Hb 79 g/L，RBC 0.56×1012/L，WBC 2.24×109/L，血型鑒定為AB 型；在手術備血時血型正反定型為AB 型， 抗體篩選試驗陰性；次日術中提血時，與AB 型血液交叉配血不相合。

2 試劑與檢測方法

2.1 主要試劑和儀器 戴安娜全自動配血儀、戴安娜抗人球蛋白檢測卡、戴安娜血型檢測卡，反定型標準紅細胞、抗體篩選細胞（長春博迅生物制品），強生抗人球蛋白檢測卡、強生血型檢測卡，強生半自動配血專用孵育器、離心機。

2.2 術前備血的血清學試驗 此患者輸血目的為手術備血，在術前1 d 接到手術備血申請單，后即為該患者做血型鑒定和抗體篩選試驗，所用試劑為反定紅細胞及抗體篩選細胞，戴安娜血型鑒定卡及戴安娜抗人球蛋白檢測卡。 因戴安娜試劑卡所要求的紅細胞濃度為0.8%的紅細胞懸液，標準反定紅細胞及抗篩細胞的濃度均為3%～5%，經過反復的試驗得出我實驗室所使用的反定紅細胞及抗篩細胞最適配制方法為：2 ml 生理鹽水加入3 滴標準紅細胞（以標準紅細胞試劑瓶的滴管為標準） 或是抗體篩選細胞，0.8%的紅細胞懸液配制完成后， 放入戴安娜全自動配血儀內備用，將患者樣本及檢測卡放入儀器內，20 min 后試驗結束， 血型鑒定結果為正反定型均為AB 型，RH（D）陽性，抗體篩選試驗陰性。備血完成，標本放入4 ℃冰箱保存。

2.3 術中用血交叉配血試驗 在次日為該患者做交叉配血試驗時，與AB 型獻血員交叉配血不相合，此次試驗所用試劑卡為強生交叉配血卡，其方法為微柱凝膠法.取配血卡1 張，撕開錫箔紙兩孔，取干燥潔凈試管2 只，將受血者及供血者的紅細胞各取30 μl，加入1 ml 生理鹽水配制成3%的紅細胞懸液待用。 主側加入患者血清40 μl 和獻血員紅細胞懸液10 μl，次側加入患者紅細胞懸液10 μl 及獻血員血清40 μl，放入孵育器孵育10 min，離心5 min，取出觀察結果，主次側均凝集，交叉配血不相合。

2.4 復查ABO 血型及抗體篩選試驗結果 核對標本及患者信息、復查血型，取強生血型卡1 張，前4孔內加入患者紅細胞懸液10 μl，后2 孔加入患者血清40 μl， 離心5 min 后觀察結果， 正定型為AB 型RH（D）陽性，反定型為O 型，正反定型結果不一致。再次復查抗體篩選，取強生交叉配血卡1 張，撕開錫箔紙4 孔，分別加入患者血清40 μl，前面3 孔依次加入抗體篩選細胞1、2、3 號細胞， 第4 孔加入患者紅細胞懸液10 μl，孵育10 min，離心5 min 后觀察結果，抗體篩選試驗陽性，自身對照陽性。 結合術前備血試驗結果，考慮該患者可能為冷凝集素干擾。

2.5 紅細胞及血清的處理及結果 將患者的血清放入37 ℃水浴箱中，水浴10 min，患者紅細胞用37 ℃溫鹽水反復洗滌3～5 次， 鏡下觀察無凝集后，再次做ABO 血型鑒定及交叉配血[2]，經過37 ℃水浴后的血清及加溫洗滌后的紅細胞與AB 型獻血員交叉配血相合，血型鑒定為AB 型RH（D）陽性，正反定型結果一致。 發(fā)血時告知臨床該患者血液冷凝集素效價高，輸注時需保溫緩慢輸注，并密切觀察，室內溫度需控制到25～30 ℃。 本例術中輸注紅細胞3 U，普通冰凍血漿300 ml，未出現不良反應。

3 討論

冷凝集素存在于正常人血清中， 但效價很低，一般情況對交叉配血及血型鑒定不會造成干擾。 在溫度較寒冷的冬天及室溫降至4 ℃時作用最強，但此種凝集反應是可逆的，在恢復室溫至20 ℃以上時即可消失。 此例手術備血時為新鮮抽取標本，在檢測時未產生冷凝集素。 而次日交叉配血時，由于標本在4 ℃冰箱中保存， 使患者血液中的冷凝集素效價增高，導致交叉配血不相合。 此例是手術患者，在術前1 d 已做了輸血相關的血清學試驗， 在術中用血時配血不合，結合術前試驗結果，就能準確判斷是由于冷凝集素干擾所致，所以在重復交叉配血實驗時，采用37 ℃水浴血清及加溫鹽水洗滌紅細胞的方法，就能快速消除冷凝集素對試驗的干擾。

在臨床上易出現冷凝集素干擾的病例一般為：老年、兒童、長期反復輸血的慢性病、肺炎、多發(fā)性骨髓瘤、血液病及造血干細胞移植后、腎臟疾病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、腫瘤、嚴重的肝臟疾病等患者。 如交叉配血試驗時僅次側發(fā)生凝集， 抗體篩選試驗陰性，自身對照陽性，可判斷為自身抗體。 在確認供血者和受血者血型均正確的情況下，可以發(fā)血，但應囑緩慢輸注、密切觀察。 如在交叉配血試驗時主側凝集，抗體篩選試驗陽性，在排除是否為ABO 以外的血型抗體時，即可用37 ℃水浴血清及加溫鹽水洗滌紅細胞的方法來確認是否為冷凝集素干擾，如此種方法后交叉配血相合，才能發(fā)血，反之則不能輸注。 針對此類患者的輸血原則是，需搶救生命時才選擇輸注；交叉配血標本應采用新鮮血，無溶血、無脂肪血、無污染；輸注時血液必須在室溫復溫，調高室內溫度至20～30 ℃，密切觀察。

[1] 劉引霞, 潘俊均, 李雪瑩. 紅細胞冷凝集素現象2 例臨床分析[J]. 國際檢驗醫(yī)學雜志, 2014, 35(8)：75.

[2] 王靜, 徐鳳娟, 葉紅輝. 高效價冷凝集素對血型鑒定和交叉配血的影響相關分析[J]. 臨床血液學雜志, 2014, 27(6)：23.