★ 顧任鈞 李忠仁 顧一煌

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 南京 210023；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院 南京 210023)

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艾灸對(duì)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練小鼠耐缺氧的影響

★ 顧任鈞1李忠仁2顧一煌2

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 南京 210023；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院 南京 210023)

目的：觀察艾灸對(duì)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練小鼠耐缺氧時(shí)間的影響。方法： 將小鼠分為空白對(duì)照組、運(yùn)動(dòng)對(duì)照組、艾灸組，每組均為20只。運(yùn)動(dòng)對(duì)照組、艾灸組每日進(jìn)行運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練，艾灸組于運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練后進(jìn)行艾灸關(guān)元和腎俞穴，檢測(cè)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練后小鼠的血乳酸和肌酸激酶、耐缺氧時(shí)間。結(jié)果：艾灸后，小鼠的耐缺氧時(shí)間由24.8±1.7提高到32.8±2.7(P<0.01)。結(jié)論：艾灸可以防止小鼠骨骼肌微細(xì)結(jié)構(gòu)在運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練中的損傷，從而提高耐缺氧時(shí)間。

艾灸；運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練；耐缺氧

灸法是中醫(yī)學(xué)的重要外治法之一，有通十二經(jīng)，走三陰，理氣血，逐寒濕，暖子宮，透諸經(jīng)而除百病的作用。在中醫(yī)療法中，艾灸以療效確切、無(wú)副作用，操作簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì)而受到廣泛應(yīng)用。機(jī)體耐缺氧是衡量人體機(jī)能的重要指標(biāo)之一，也是決定運(yùn)動(dòng)成績(jī)的一個(gè)重要因素，如何提高運(yùn)動(dòng)員在日常的訓(xùn)練中機(jī)體耐缺氧的研究，已經(jīng)成為運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。本研究通過(guò)使用灸法，觀察小鼠運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練后耐缺氧狀態(tài)，探討了艾灸對(duì)機(jī)體耐缺氧的影響作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)小鼠及分組 體重為18～22g 的1月齡健康昆明種雄性小鼠(南京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證11400700043392)。在室溫(23±2)℃、濕度60%～70%的實(shí)驗(yàn)室、光照自然的環(huán)境中以籠飼養(yǎng)，每籠10只，小鼠自由進(jìn)食、飲水。

分組：篩選出60只會(huì)游泳雄性昆明種小鼠，進(jìn)行正常實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中適應(yīng)性飼養(yǎng)3天后，用數(shù)字隨機(jī)法隨機(jī)分為3個(gè)組，分別為空白對(duì)照組、運(yùn)動(dòng)對(duì)照組、艾灸組，仍以每籠10只正常飼養(yǎng)，每組均為20只。

1.2 主要儀器與試劑 自制游泳箱(100cm×50cm×50cm玻璃水箱)；全自動(dòng)生化分析儀(上海醫(yī)療器械廠)；UV--1100型分光光度計(jì)(北京瑞利分析儀器公司)；乳酸酶法試劑盒、肌酸肌酶試劑盒(南京建成生物工程研究所)。光學(xué)讀數(shù)分析天平，廣口瓶、試管、計(jì)時(shí)器等。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 小鼠以每籠10只飼養(yǎng)，每日觀察并記錄小鼠的生長(zhǎng)和進(jìn)食情況。

空白對(duì)照組：不做任何運(yùn)動(dòng)，正常飼養(yǎng)，每日按時(shí)抓起放入無(wú)水的游泳箱中，在游泳箱中停留時(shí)間與運(yùn)動(dòng)對(duì)照組相同。

運(yùn)動(dòng)對(duì)照組：游泳箱水深約40 cm, 水溫約(25±2)℃，每日按時(shí)做游泳運(yùn)動(dòng)，第1周游泳30min/d，第2周游泳60 min/d，第3周游泳90min/d，第4、5周游泳120min/d[1]。每箱10只小鼠，對(duì)浮于水面不動(dòng)的小鼠用棒驅(qū)趕，促使小鼠維持在運(yùn)動(dòng)狀態(tài)。完成游泳后，撈出小鼠，迅速電吹風(fēng)吹干。

艾灸組：游泳后的第4周第1天開(kāi)始，小鼠完成游泳訓(xùn)練時(shí)間后，撈出吹干后進(jìn)行艾灸治療，每穴艾灸2min，灸2周。采用《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》[2]取穴方法定位，取關(guān)元、腎俞(雙側(cè))。于臍下正中線約5mm處和第二腰椎兩旁去鼠毛，手持自制直徑約2mm、長(zhǎng)20cm艾條進(jìn)行懸灸。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)

1.4.1 生化指標(biāo) 于第5周游泳結(jié)束后，撈起運(yùn)動(dòng)對(duì)照組和艾灸組小鼠，擦干頭部，每只小鼠眼球取血2mL抗凝, 以3000 r/min離心20 min，取上清,分別以乳酸氧化酶法檢測(cè)血清乳酸、酶偶聯(lián)法測(cè)定血清肌酸激酶。操作嚴(yán)格按照試劑盒要求進(jìn)行?？瞻讓?duì)照組眼球取血抗凝后同上處理。

1.4.2 小鼠耐缺氧時(shí)間測(cè)定 于未次游泳后的次日，將小鼠放入盛有40g鈉石灰(鈉石灰用以吸收二氧化碳，鈉石灰上墊有濾紙，用以吸收尿液)的廣口瓶中，用凡士林涂廣口瓶口、用木塞蓋嚴(yán)不漏氣，并開(kāi)始計(jì)時(shí)，以小鼠呼吸停止為指標(biāo)，記錄小鼠死亡時(shí)間( 即耐缺氧時(shí)間)[3]。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 各組小鼠的耐缺氧時(shí)間 見(jiàn)表1。

表1 小鼠的耐缺氧時(shí)間比較

注：運(yùn)動(dòng)對(duì)照組和艾灸組在游泳中分別有3只和1只小鼠死亡；與空白對(duì)照組相比△P<0.05，與空白對(duì)照組相比※P<0.01，與運(yùn)動(dòng)對(duì)照組相比△P<0.05。

2.2 各組小鼠的血乳酸和肌酸激酶水平 見(jiàn)表2。

表2 各組小鼠的血乳酸和肌酸激酶的比較

注：艾灸組、運(yùn)動(dòng)對(duì)照組與空白對(duì)照組相比，艾灸組與運(yùn)動(dòng)對(duì)照組相比△P<0.05；運(yùn)動(dòng)對(duì)照組、艾灸組與空白對(duì)照組相比※P<0.01。

3 討論

在本研究中，運(yùn)動(dòng)對(duì)照組與空白對(duì)照組相比有差異(P<0.05)，艾灸組與空白對(duì)照組相比有顯著差異(P<0.01)，與運(yùn)動(dòng)對(duì)照組相比有差異(P<0.05)。說(shuō)明通過(guò)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練可以提高小鼠的耐缺氧時(shí)間，而在運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練的同時(shí)進(jìn)行艾灸，則對(duì)小鼠耐缺氧時(shí)間的提高更為明顯。

血清肌酸激酶(CK)參與了骨骼肌細(xì)胞能量的代謝，在肌肉收縮過(guò)程中起到十分重要的作用，正常情況下,肌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整, CK極少能透過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入血液中，但無(wú)論是高強(qiáng)度還是低強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)都會(huì)促使細(xì)胞內(nèi)CK釋放并透過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入血液，使血清中CK濃度升高，因此，血清CK活性的變化可以作為評(píng)定機(jī)體運(yùn)動(dòng)、了解骨骼肌微細(xì)結(jié)構(gòu)損傷程度的重要敏感生化指標(biāo)，在本研究中，艾灸組與運(yùn)動(dòng)對(duì)照組相比，CK有差異(P<0.05)；運(yùn)動(dòng)對(duì)照組、艾灸組與空白對(duì)照組相比，有顯著差異(P<0.01)，提示艾灸能有效地減少運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練中小鼠骨骼肌微細(xì)結(jié)構(gòu)的損傷。

乳酸是運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)上常用的指標(biāo)，有“訓(xùn)練的標(biāo)尺”之稱(chēng)，一般認(rèn)為乳酸在血液中含量高低可以作為評(píng)價(jià)機(jī)體疲勞程度的重要標(biāo)志之一[4]，在本實(shí)驗(yàn)中可以看出：小鼠運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練后，血清乳酸與空白組對(duì)照有差異(P<0.05)，提示小鼠游泳時(shí)血清乳酸含量會(huì)增高。而運(yùn)動(dòng)對(duì)照組與艾灸組相比并沒(méi)有明顯的變化，與顧氏[5]、史氏[6]的報(bào)道不一致，這可能與小鼠的運(yùn)動(dòng)并沒(méi)有達(dá)到最大量有關(guān)，我們將在今后進(jìn)一步深入研究。艾灸能有效地提高小鼠的耐缺氧能力，其機(jī)理是多途徑的，多環(huán)節(jié)的，與艾灸能有效地減少運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練中小鼠骨骼肌微細(xì)結(jié)構(gòu)的損傷是密切相關(guān)的，其機(jī)理值得進(jìn)一步研究。

[1]李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社.第一版，1991∶149

[2]李忠仁．實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)[M].北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社.第一版，2003：314

[3]高允生，齊永秀，李珂，等．小鼠耗氧量動(dòng)態(tài)變化測(cè)定裝置的建立與應(yīng)用[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2004，20(9)：1070-1072.

[4]賈天奇,常立云,宋佳霖,等 中醫(yī)艾灸療法促進(jìn)運(yùn)動(dòng)性疲勞恢復(fù)的研究[J].北京體育大學(xué)學(xué)報(bào),2006,29(11)：1529.

[5]顧一煌，任建寧，金宏柱,等.艾灸對(duì)小鼠力竭運(yùn)動(dòng)后血乳酸影響的觀察[J].中醫(yī)藥信息,2008,25(6)：48-49.

[6]史曙生.艾灸對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)血乳酸的影響[J].上海針灸雜志,2002,21(1)：20-21.

江蘇省高等學(xué)校大學(xué)生實(shí)踐創(chuàng)新訓(xùn)練項(xiàng)目。

顧一煌。

R285.5

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2014-03-05)編輯：曾文雪