快速膠體金法診斷腎綜合征出血熱臨床應(yīng)用價值探討

張景霞

【摘要】目的 探索膠體金法快速診斷腎綜合征出血熱（HFRS）的臨床應(yīng)用價值，為早期診斷流血性出血熱提供診斷依據(jù)。方法 選擇80例腎綜合癥出血熱患者以及43例其它疾病患者，采用免疫滴金法與酶聯(lián)免疫吸附法分別進行檢測，并進行對比。結(jié)果 膠體金免疫法和ELISA法對出血熱的檢測具有相同的特異性，膠體金免疫法對HFTS患者的Ig-M/G抗體檢測具有特異性，在其他疾病患者中對出血熱抗體的檢測顯陰性。結(jié)論 膠體金法檢測出血熱抗體具有操作簡單，特異性高，敏感度度高等特點。

【關(guān)鍵詞】腎綜合征出血熱，免疫球蛋白M/G，膠體金免疫法

作者單位：134300吉林省白山市中心醫(yī)院

腎綜合征出血熱（HFRS）是由漢坦HFRS病毒引起，由鼠類等傳播的自然疫源性急性病毒性傳染病，流行廣，病情危急，病死率高，危害極大［1］。目前檢測這這里疾病常用酶聯(lián)免疫吸附法、免疫熒光以及PCR法等檢測，但在一些社區(qū)醫(yī)院，基層醫(yī)院這類方法應(yīng)用不很方［2］，因此在本文中探討使用膠體金法快速診斷腎病綜合征出血熱的方法，以用來建立一種快速簡便的檢測方法，先報告如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇于2011年3月～2013年12月來我院就診的80例腎綜合癥出血熱患者以及43例其它疾病患者為研究對象，發(fā)病3～7天，其中腎病綜合征病人男34例，女32例，年齡13～67歲，診斷標準依據(jù)2008年全國流行性出血熱防治方案制訂標準。43例其他疾病患者男23例，女20例，病程3～7天。分別采集腎病綜合征患者的不同病程期的外周血以及其他患者的外周血，分別采用酶聯(lián)免疫吸附法和膠體金法對比檢測腎病綜合征以及其他疾病。

1.2試劑來源

出血熱IgM/IgG 金標試劑以及酶聯(lián)免疫試劑盒購自江蘇碧云天生物科技有限公司。漢坦病毒核蛋白由衛(wèi)生防疫站提供。膠體金法檢測法試劑盒購自上海卒瑞生物科技有限公司。

1.3方法步驟

A、ELISA法檢測抗?jié)h坦病毒IgM抗體，方法以及原理步驟詳見參考文獻［3］。

B、膠體金法檢測IgM/G抗體：

原理：用流行性出血熱病毒的核蛋白為抗原固相硝酸纖維素膜，應(yīng)用滲濾式間接法原理，檢測血清中流行性出血熱抗體。

方法步驟：在所提供的試劑盒中取出硝酸纖維素膜，在膜中央滴一滴PBS洗液，滴加血清標本1滴，加入抗原，漢坦病毒抗體 以及合適濃度的病毒抗原各1滴，每一次家樣后，均滴3滴PBS洗液，然后觀察結(jié)果。HFRS陽性者顯紅色，陰性者則不顯色。

2　結(jié)果

2.1膠體金免疫法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測患者血清的比較

用膠體金免疫法與酶聯(lián)免疫吸附法對比檢測80例HFPS患者血清，兩種方法均顯示陽性者66例，均顯示陰性14者例，二者的敏感度為80%，總符合率100%，兩種方法在診斷腎病綜合征出血熱方面沒有顯著差異。

2.2膠體金法檢測抗HFRS-IgM123例結(jié)果

免疫膠體金法檢測HFTS患者陽性66例，陰性14例；其他43例患者均為陰性，抗HFRS-IgM123例的靈敏度是82.5%，特異性100%，假陽性為0%，假陰性20%。

2.3膠體金法檢測HFRS抗HFRS-IgG123例結(jié)果評價

膠體金法檢測HFTS患者陽性72例，陰性8例；其他43例患者均為陰性，抗HFRS-IgG123例靈敏度90.0%，特異性100%，假陽性率0%，假陰性率10.0%。

3　討論

腎病綜合征是由病毒引起的自然疫源性疾病，該病多高發(fā)于貧困及衛(wèi)生條件差的地區(qū)，而患者得不到及時診斷而延誤治療，因此建立快速、簡便，特異性，敏感性的對腎病綜合征的診斷方法十分重要?，F(xiàn)在對腎病綜合征出血熱的診斷方法有熒光顯微鏡及酶聯(lián)免疫吸附法等，但是由于熒光顯微鏡造價昂貴，限制了這一方法的推廣和使用，而酶聯(lián)免疫吸附法雖然成本較低，但是這一方法也需要酶標儀，操作比較繁雜，也進一步限制了這一方法的使用。

膠體金免疫斑點試驗又稱免疫滴金試驗，是在近些年來發(fā)展起來的快速檢測技術(shù)。其基本原理是以微孔濾膜如醋酸纖維素膜為載體，以膠體金為免疫標記物，在膜上完成抗原抗體反應(yīng)，如果在膜上出現(xiàn)紅色斑點，則結(jié)果為陽性，否則為陰性結(jié)果。在本文中所使用的膠體金免疫法，已經(jīng)過臨床上的初步實驗證實。在我們的研究中發(fā)現(xiàn)，膠體金免疫法與酶聯(lián)免疫法有著相同的敏感度，符合率達到了100%。在對123例患者的IgM抗體的檢測中，檢測結(jié)果的靈敏度是82.5%，特異性100%，假陽性為0%，假陰性20%。檢測HFRS抗HFRS-IgG的靈敏度90.0%，特異性100%，假陽性率0%，假陰性率10.0%。此種方法，不需要其他輔助機器設(shè)備，操作簡單，快捷，可以及時快速的得到檢測結(jié)果，尤其方便在醫(yī)療衛(wèi)生條件差的地區(qū)使用。眾所周知，在感染后，首先產(chǎn)生IgM抗體，而后產(chǎn)生IgG抗體。IgG抗體因為滴度低，在使用熒光顯微鏡檢測時，需要HFRS病人二次血標本的低度呈4倍以上方可以確診。而在使用免疫膠體金檢測時，IgG抗體的滴度可以達到檢測的靈敏度?？梢酝瑫r進行抗HFRS—IgM/G抗體的檢測。

綜上所述，膠體金免疫法診斷出血熱，快速，簡便。

參考文獻

［1］高海鋒，葛珺琍，王靜.血清RBP和CysC檢測在腎綜合征出血熱所致腎損傷中的臨床應(yīng)用［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2015，36 （4）：444-445.

［2］朱永明.白茅根為主治療腎綜合征出血熱急性腎功能衰竭臨床效果觀察［J］.藥物與人，2015，28（1）：162-163.

［3］尹麗.流行性出血熱患者的臨床特點研究［J］.中國繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育，2015，7（5）：53-54.

Investigate the Clinical Value of Colloidal Gold Rapid Diagnosis for Hemorrhagic Fever With Renal Syndrome

ZHANG JingxiaBaishan Central Hospital of Jilin Province，Baishan 134300，China.

【Abstract】

Objective To explore colloidal gold rapid diagnosis of hemorrhagic fever with renal syndrome （HFRS） clinical value， to provide diagnostic evidence for the early diagnosis of bleeding hemorrhagic fever Methods 80 patients with hemorrhagic fever with renal syndrome， and 43 cases of other diseases， drip by immune gold method and ELISA method were detected and compared. Results colloidal gold immunoassay and ELISA detection of hemorrhagic fever with the same specificity， colloidal gold immunoassay for HFTS patients Ig-M / G antibody with specificity， detecting disease in other patients antibodies against hemorrhagic fever It was negative. Conclusion The colloidal gold assay hemorrhagic fever is simple， high specificity，high sensitivity and other characteristics.

【Key words】Hemorrhagic fever with renal syndrome，Immunoglobulin M/G，Colloidal gold immunoassay

doi：10.3969/j.issn.1674-9316.2015.23.115

【中圖分類號】R512.8

【文獻標識碼】B

【文章編號】1674-9316（2015）23-0157-02