5-氟尿嘧啶對老年鼻咽癌患者血漿EB病毒DNA水平的影響及臨床療效

蔣成義李多杰1汪洪濤2江濤許亞佳

(蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科，安徽蚌埠233004)

摘要〔〕目的探討5-氟尿嘧啶(5-FU)對老年鼻咽癌患者血漿EB病毒DNA水平影響及對老年鼻咽癌患者的臨床療效。方法收集90例Ⅲ期和Ⅳ期鼻咽癌患者，隨機分為實驗組和對照組各45例。兩組均給予放射治療，實驗組輔助給予5-FU治療，熒光定量PCR反應(yīng)監(jiān)測患者治療前后EB病毒DNA的變化，臨床檢查和MRI判斷患者治療后的臨床療效，進(jìn)行對比分析。結(jié)果實驗組較對照組臨床有效率高(P=0.011)。對頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，實驗組較對照組有效率高(P=0.000)。實驗組和對照組治療后EBV DNA均較治療前顯著降低，實驗組較對照組降低更明顯(P<0.05)。結(jié)論5-FU能明顯降低老年鼻咽癌患者血漿EBV DNA水平，提高患者的臨床療效。

關(guān)鍵詞〔〕鼻咽癌；5-氟尿嘧啶；EB病毒DNA

中圖分類號〔〕R73〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A〔

1蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤放療科

2蚌埠醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室

第一作者：蔣成義(1975-)，男，碩士，副教授，副主任醫(yī)師，主要從事頭頸部腫瘤基礎(chǔ)及臨床研究。

EB病毒(EBV)與鼻咽癌關(guān)系非常密切〔1〕，其中血漿EBV DNA定量測定是近年發(fā)展起來的EBV血清學(xué)標(biāo)志物檢測技術(shù)。研究證實不同時期的血漿EBV DNA拷貝數(shù)在鼻咽癌早期診斷臨床分期、療效監(jiān)測、預(yù)后判斷等方面有重要的臨床意義〔2〕。目前治療鼻咽癌的主要手段仍是放射治療，但治療效果很差。鼻咽癌對化療相對敏感，局部中、晚期的治療應(yīng)以綜合治療為主，治療可以顯著提高療效〔3〕。5-氟脲嘧啶(5-FU)是鼻咽癌化療中最常用的方案。本文旨在進(jìn)一步觀察老年鼻咽癌患者在使用化療藥物5-FU期間，血漿EBV DNA水平的動態(tài)變化及其臨床療效。

1資料與方法

1.1臨床資料選取2011年4月至2013年5月我院耳鼻喉科通過病理檢測確診為鼻咽低分化鱗癌及未分化癌患者90例。年齡60～77〔平均(65.3±10.3)〕歲，其中男62例，女28例，按92分期〔3〕，Ⅲ期47例，Ⅳ期43例。隨機分為實驗組和對照組各45例。實驗組和對照組均有40例患者有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

1.2治療方法所有的患者均接受同期放療，放射治療按照臨床檢查和CT或磁共振成像(MRI)示腫瘤范圍設(shè)野，鼻咽部劑量為70～74 Gy，頸部治療劑量60～64 Gy，預(yù)防劑量50 Gy。其中實驗組患者同時接受化療藥物5-FU治療，500 mg/ml，靜脈滴注，2次/w，連續(xù)6 w?；颊呋熐俺Ｒ?guī)預(yù)防應(yīng)用5-羥色胺(5-HT3)受體拮抗劑。出現(xiàn)外周血白細(xì)胞和血小板減少者，給予粒細(xì)胞集落刺激因子和白細(xì)胞介素11治療。

1.3血漿標(biāo)本采集分別抽取治療前(初診)、治療后(2～6 w)清晨空腹肘靜脈血5 ml，放入乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管中，16 000 r/min離心5 min，吸取管中上層血漿并轉(zhuǎn)移至另一抗凝管，-20℃保存，以便進(jìn)行下一步的處理。

1.4血漿DNA提取與熒光定量PCR反應(yīng)凍存的血漿置于4℃解凍，每例標(biāo)本取50 μl血漿，用QIAamp血液DNA提取試劑盒(德國Qiagen公司)抽提DNA。按試劑盒說明書進(jìn)行血液DNA的提取。血漿EBV DNA水平通過熒光定量PCR反應(yīng)進(jìn)行測定。用成都東方銳進(jìn)科技有限公司ABI-7300實時熒光定量PCR儀進(jìn)行檢測，檢測過程按廠家說明的檢測步驟、結(jié)果判斷以及質(zhì)量控制方法進(jìn)行。

1.5療效評價標(biāo)準(zhǔn)患者于第6周化療后第7天體檢和行MRI檢查。按實體瘤治療后評價標(biāo)準(zhǔn)(RECIST)對兩組患者的療效進(jìn)行評價，分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)和疾病進(jìn)展(PD)，有效率為CR+PR。

1.6統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行t檢驗和χ2檢驗。

2結(jié)果

2.1兩組鼻咽癌患者臨床療效比較兩組患者完成6 w治療后，實驗組有效率(84.4%)顯著高于對照組(60.0%)(P<0.05)，其中CR 5 vs 3例，PR 33 vs 24例，SD 7 vs 13例，PD 0 vs 5例。

2.2兩組頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶有效率比較實驗組頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶有效率(95.0%)顯著高于對照組(62.5%)(P<0.05)，其中CR 14 vs 5例，PR 24 vs 20例，SD 2 vs 15例。

2.3兩組血漿EBV DNA水平比較兩組患者均完成6 w治療，實驗組和對照組治療后EBV DNA含量〔(31.23±17.34)×103拷貝/ml，(100.24±34.67)×103拷貝/ml〕均較治療前〔(162.47±50.23)×103拷貝/ml，(167.88±52.34)×103拷貝/ml〕下降(P<0.05)。實驗組較對照組下降更明顯(P<0.05)。

3討論

鼻咽癌是頭頸部腫瘤中一種較特殊的腫瘤，有其很顯著的流行病學(xué)、病理學(xué)及治療方面的特點，是一種對放、化療均較敏感的腫瘤。目前鼻咽癌的傳統(tǒng)治療方案仍是以放射治療為主。雖然近年來由于技術(shù)和設(shè)備有很大的提高和改進(jìn)，但是晚期鼻咽癌單純放射治療5年生存率僅40%左右。因此一種新的治療方案被很多專家提出并逐漸用于臨床，即同期放療輔助化療的方式治療晚期鼻咽癌。5-FU是嘧啶類抗代謝藥物，臨床作為腫瘤的化療藥物已有30多年的歷史，目前是大多數(shù)腫瘤治療的常用藥物之一，并為頭頸部腫瘤治療的首選藥〔4〕。

鼻咽癌的發(fā)生與EBV密切相關(guān)。在鼻咽癌的發(fā)展過程中，EBV感染通過表觀遺傳變化和多種體細(xì)胞遺傳共同地破壞鼻黏部細(xì)胞功能，引起鼻咽癌的發(fā)生以及進(jìn)一步惡化〔5〕。腫瘤標(biāo)志物是指腫瘤細(xì)胞代謝過程中分泌到血漿或其他體液存在的一些生物化學(xué)物質(zhì)。近年來，很多研究者通過提取腫瘤(如鼻咽癌、肝癌)患者和正常健康對照者血漿、血清DNA，發(fā)現(xiàn)腫瘤患者血漿中存在一種不同于正常對照者DNA，稱為腫瘤性DNA，這可能是腫瘤細(xì)胞死亡時分泌到血漿中的生物化學(xué)物質(zhì)〔6〕。Lo等〔7〕認(rèn)為EBV DNA平均拷貝數(shù)可能與鼻咽癌患者病情有一定相關(guān)性。Wang等〔8〕通過研究34例轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)的晚期鼻咽癌患者化療后第1個月的血漿EBV DNA清除率及含量，發(fā)現(xiàn)均能較好地預(yù)測療效。朱超綱等〔2〕研究發(fā)現(xiàn)鼻咽癌TNM分期越晚，患者血漿中EBV DNA拷貝數(shù)越高，基本反映了臨床分期。

本研究表明對于臨床分期3期和4期鼻咽癌患者，在放療的基礎(chǔ)上，輔助化療藥物5-FU能明顯降低患者血漿EBV含量。從而改善患者的臨床癥狀，提高患者5年的生存率。另外，在放療的基礎(chǔ)上加用化療藥物5-FU可以明顯改善患者的臨床癥狀，使部分患者病情達(dá)到部分緩減、完全緩減、甚至病情消失。由于鼻咽癌的組織學(xué)類型具有區(qū)別于其他惡性腫瘤的獨特生物學(xué)特性：局部侵蝕力強，浸潤性擴(kuò)展，極易侵犯鄰近組織器官，區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高，造成腫瘤靶體積大而不規(guī)則；雖然對射線有較高的敏感性，但控制腫瘤要求的劑量高，且易復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。輔助化療藥物既可以降低患者血漿中EBV含量，并且改善患者臨床療效，可以彌補單純放療治療的不足。

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〔2014-10-06修回〕

(編輯袁左鳴/滕欣航)