朱珍珍，鄭 潔，肖蘋妹，徐漾漾，陳海斌

(1.瑞安市中醫(yī)院婦產(chǎn)科，浙江 瑞安 325200；2.溫州醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江 瑞安 325200)

育齡期婦女宮頸HPV感染自然轉(zhuǎn)歸的隨訪分析

朱珍珍1，鄭 潔1，肖蘋妹1，徐漾漾1，陳海斌2

(1.瑞安市中醫(yī)院婦產(chǎn)科，浙江 瑞安 325200；2.溫州醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江 瑞安 325200)

目的 研究育齡期婦女宮頸人乳頭瘤病毒(HPV)感染的自然轉(zhuǎn)歸。方法 選擇20～40歲育齡期婦女宮頸HPV感染者596例進(jìn)行定期(6、12、24個(gè)月)隨訪，失訪4例，入組592例，入組者根據(jù)HPV類型分為低危組89例，高危組503例；兩組TCT(-)、(+)分別21例、68例和131例、372例；兩組DNA載量<500pg/mL、500～1 000pg/mL、>1 000pg/mL者分別為52例、21例、16例和296例、129例、78例；觀察兩組HPV感染的自然轉(zhuǎn)歸情況，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 低危組隨訪6、12、24個(gè)月HPV感染自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于高危組(χ2值分別為12.720、11.578、17.843，均P<0.05)。低危組和高危組HPV感染隨訪6、12、24個(gè)月 TCT(-)者自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于TCT(+)者(χ2值分別為4.307、17.168、25.740、7.906、44.740、68.204，均P<0.05)，低危組HPV感染隨訪6、12、24個(gè)月，TCT(-)者自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于高危組HPV感染TCT(-)者(χ2值分別為6.355、8.605、12.663，均P<0.05)，低危組HPV感染隨訪6、12、24個(gè)月，TCT(+)者自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于高危組HPV感染TCT(+)者(χ2值分別為5.452、6.838、12.981，均P<0.05)。低危組DNA載量中<500pg/mL者隨訪6、12、24個(gè)月自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于高危組DNA載量中<500pg/mL者(χ2值分別為12.999、12.191、21.204，均P<0.05)。結(jié)論 育齡期婦女宮頸HPV感染者低危型自然轉(zhuǎn)陰率高于高危型，TCT陰性者自然轉(zhuǎn)陰率高于TCT陽性，DNA載量<500pg/mL HR-HPV感染者自然轉(zhuǎn)陰率高于LR-HPV感染，DNA載量>500pg/mL的HR-HPV、LR-HPV感染者很少出現(xiàn)轉(zhuǎn)陰現(xiàn)象。

育齡期婦女；宮頸；人乳頭瘤病毒；感染；自然轉(zhuǎn)歸

人乳頭瘤病毒(human papilloma virus HPV)感染是引起宮頸癌變的重要因素，大部分HPV感染屬于一過性[1]?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)了200多種不同類型HPV，根據(jù)HPV致病性的差異，將其分為高危型和低危型兩大類，其中感染生殖道黏膜的有50多種類型[2]，不同亞型HPV感染的致病性和后果不同。HPV感染的自然轉(zhuǎn)歸與經(jīng)濟(jì)的發(fā)展?fàn)顩r、患者自身的生活習(xí)慣和免疫功能、感染的輕重、HPV類型等因素有關(guān)[3]，了解HPV感染的流行病學(xué)特點(diǎn)，掌握其自然轉(zhuǎn)歸規(guī)律，可為臨床治療提供更多的參考依據(jù)，本研究旨在觀察HPV感染的自然轉(zhuǎn)陰率。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年1月至2013年6月在瑞安市中醫(yī)院婦產(chǎn)科門診就診的育齡期婦女宮頸HPV感染者596例進(jìn)行定期(6、12、24個(gè)月)隨訪，患者年齡20～40歲，其中失訪4例，入組592例。入組者根據(jù)HPV類型(低危型和高危型)分低危組89例，高危組503例，兩組年齡、液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查(thinprep cytologic test，TCT)和人乳頭狀瘤病毒-脫氧核糖核酸(human papilloma virus-deoxyribonucleic acid，HPV-DNA)載量分布結(jié)果比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，具有可比性，見表1。入選者均前置知情同意書，并排除宮頸癌及其它宮頸和其它宮頸惡性疾病，無心血管、肝、腎等重要器官疾病，無內(nèi)分泌疾病，無精神障礙性疾病。

1.2 標(biāo)本采集

采集方法：①樣本采集前3d內(nèi)無陰道沖洗、上藥，24h內(nèi)無性生活；②截石位，擴(kuò)張陰道，用專用毛刷在宮頸內(nèi)口順時(shí)針旋轉(zhuǎn)6圈，停留20s采集宮頸脫落細(xì)胞；③將毛刷放入專用采集管；④將標(biāo)本中的黏液、血液、炎癥細(xì)胞與上皮細(xì)胞分離，放-20℃冰箱保存，24h內(nèi)檢測(cè)。

1.3 人乳頭狀瘤病毒脫氧核糖核酸定量檢測(cè)和分型

用Digene公司提供的二代雜交捕獲法(hybrid captureⅡ，HC-Ⅱ)HPV-DNA檢測(cè)系統(tǒng)及配套試劑盒檢測(cè)，嚴(yán)格按照說明書要求操作，實(shí)驗(yàn)室溫度20～25℃，檢測(cè)步驟：提取分離液、裂解、雜交、捕獲、沖洗、收集信號(hào)、結(jié)果判定。用數(shù)據(jù)操縱語言(data manipulation language，DML) 2000系統(tǒng)判讀，HPV-DNA含量超過lpg/mL即RLU/CO比值大于1為陽性。HPV-DNA定量分3級(jí)：<500pg/mL、500～1 000pg/mL、>l 000pg/mL。用配套HPV分型檢測(cè)試劑盒，HPV分型基因芯片檢測(cè)閱讀系統(tǒng)檢測(cè)13種高危人類乳頭狀病毒(high risk human papilloma virus，HR-HPV)(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)和16種低危人類乳頭狀病毒(low risk human papilloma virus，LR-HPV)(6、11、26、40、42、43、44、53、55、57、66、67、69、73、82)，基因芯片相應(yīng)類型HPV位點(diǎn)出現(xiàn)藍(lán)點(diǎn)為陽性。

1.4 液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查

取樣本分離液，制成薄層涂片，用95%酒精固定，巴氏染色，由主治醫(yī)師以上專業(yè)科醫(yī)生診斷，采用TBS診斷系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞學(xué)分類診斷[4]：高度鱗狀上皮內(nèi)瘤變(high squamous intraepithelial neoplasia，HSIL)、低度鱗狀上皮內(nèi)瘤變(low grade squamous intraepithelial neoplasia，LSIL)、未能除外高度上皮內(nèi)瘤變的不典型鱗狀細(xì)胞(atypical squamous cell carcinoma of the high intraepithelial neoplasia，ASC-H)、未能明確意義的不典型鱗狀細(xì)胞(failed to define the significance of atypical squamous cells，ASC-US)、正常范圍(normal range,WML)、鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma，SCC)。

1.5 隨訪周期和內(nèi)容

所有入選者均于6、12、24個(gè)月行宮頸常規(guī)檢查、TCT檢查，HPV及DNA載量檢查，TCT結(jié)果為不典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASC-US)及/或HR-HPV陽性者行陰道鏡下多點(diǎn)活檢。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 宮頸低危型和高危型人乳頭瘤病毒感染自然轉(zhuǎn)陰率分析

低危組隨訪6、12、24個(gè)月HPV感染自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于高危組(均P<0.05)，見表2。

表2 宮頸低危型和高危型HPV感染自然轉(zhuǎn)陰率分析[n(%)]

Table 2 Nature negative rate of cervical low-risk and high-risk HPV infection[n(%)]

2.2 人乳頭瘤病毒感染自然轉(zhuǎn)陰率與宮頸疾病的相關(guān)性

低危組和高危組HPV感染隨訪6、12、24個(gè)月 TCT(-)者自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于TCT(+)者(均P<0.05)，低危組HPV感染隨訪6、12、24個(gè)月 TCT(-)者自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于高危組HPV感染TCT(-)者(χ2值分別為6.355、8.605、12.663，均P<0.05)，低危組HPV感染隨訪6、12、24個(gè)月 TCT(+)者自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于高危組HPV感染TCT(+)者(χ2值分別為5.452、6.838、12.981，均P<0.05)，見表3。

2.3 人乳頭瘤病毒感染近期自然轉(zhuǎn)陰率與DNA載量的相關(guān)性

低危組DNA載量中<500 pg/mL者隨訪6、12、24個(gè)月自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于高危組DNA載量中<500 pg/mL者(χ2值分別為12.999、12.191、21.204，均P<0.05)，見表4。

注：★為兩組內(nèi)TCT(-)與TCT(+)比較。

3 討論

3.1 育齡期婦女宮頸低危型和高危型人乳頭瘤病毒感染自然轉(zhuǎn)陰率

HPV感染與CIN發(fā)病有關(guān)，并參與了CIN的進(jìn)展，是預(yù)測(cè)宮頸癌前病變的因素[5]。HPV感染可引起細(xì)胞分化失調(diào)，導(dǎo)致重度不典型增生，最后發(fā)展為宮頸浸潤(rùn)癌，約需10～15年時(shí)間。大部分婦女一生可有短暫HPV感染，免疫力正常的患者可在2年內(nèi)清除病毒，僅少數(shù)婦女會(huì)持續(xù)感染乃至最終發(fā)展成宮頸癌[6]。國(guó)內(nèi)對(duì)宮頸HPV感染自然轉(zhuǎn)歸研究較少，了解宮頸HPV感染的自然轉(zhuǎn)歸規(guī)律，可為其隨訪、治療提供統(tǒng)計(jì)學(xué)依據(jù)，避免過度治療，取消感染者懼怕心理。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨訪6月、12月、24個(gè)月，低危型和高危型HPV感染的自然轉(zhuǎn)陰率分別為6.74%、12.36%、19.10%和0.80%、3.78%、5.57%，宮頸HPV感染隨著時(shí)間的推移其自然轉(zhuǎn)陰率逐漸升高，LR-HPV的自然轉(zhuǎn)陰率高于HR-HPV(P<0.05)。

3.2 育齡期婦女宮頸人乳頭瘤病毒感染近期自然轉(zhuǎn)陰率與宮頸疾病的相關(guān)性

2012年池銀歸等[3]統(tǒng)計(jì)Ⅰ級(jí)宮頸上皮內(nèi)瘤變隨訪6、12、24個(gè)月期自然轉(zhuǎn)陰率分別為1.74%、4.35%、8.70%，CIN可以自然轉(zhuǎn)陰，Ⅰ級(jí)CIN伴HPV感染者其HPV也可自然轉(zhuǎn)陰；宮頸疾病的病理結(jié)果與HPV的自然轉(zhuǎn)陰率與是否存在差異值得臨床去進(jìn)一步探討。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，低危組和高危組HPV感染隨訪6、12、24個(gè)月 TCT(-)者自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于TCT(+)者(均P<0.05)，低危組HPV感染隨訪6、12、24個(gè)月 TCT(-)者自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于高危組HPV感染TCT(-)者(均P<0.05)，低危組HPV感染隨訪6、12、24個(gè)月 TCT(+)者近期自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于高危組HPV感染TCT(+)者(均P<0.05)，提示宮頸HPV感染的自然轉(zhuǎn)陰率與宮頸細(xì)胞學(xué)結(jié)果陰性或陽性有關(guān)，但各級(jí)別細(xì)胞學(xué)結(jié)果其HPV的自然轉(zhuǎn)陰率是否存在差異有待于進(jìn)一步探討。

3.3 育齡期婦女宮頸人乳頭瘤病毒感染近期自然轉(zhuǎn)陰率與DNA載量的相關(guān)性

宮頸病變程度與HPV 載量及陽性率存在相關(guān)性[6-7]。持續(xù)性高危型HPV感染可引發(fā)宮頸病變及宮頸癌[8]。HPV-DNA載量與HPV自然轉(zhuǎn)陰率是否存在相關(guān)性相關(guān)報(bào)道較少，本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，低危組DNA載量中<500pg/mL者隨訪6、12、24個(gè)月自然轉(zhuǎn)陰率均顯著高于高危組DNA載量中<500pg/mL者(均P<0.05)，兩組HPV-DNA載量500～1 000pg/mL、>1 000pg/mL者均未出現(xiàn)轉(zhuǎn)陰現(xiàn)象。因此，宮頸HPV感染者HPV-DNA的載量與其自然轉(zhuǎn)陰率有明顯相關(guān)性。

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[專業(yè)責(zé)任編輯：安瑞芳]

Follow-up analysis of natural outcomes of cervical HPV infection in child-bearing women

ZHU Zhen-zhen1, ZHENG Jie1, XIAO Ping-mei1, XU Yang-yang1, CHEN Hai-bin2

(1.DepartmentofGynecologyandObstetrics,RuianHospitalofTraditionalChineseMedicine,ZhejiangRuian325200,China;2.ClinicalLaboratory,ThirdHospitalAffiliatedtoWenzhouMedicalCollege,ZhejiangRuian325200,China)

Objective To study the natural outcomes of cervical HPV infection in child-bearing women. Methods Totally 596 cervical HPV-infected childbearing women aged 20-40 years old were followed up regularly (6, 12, 24 months). Among them, 4 were lost to follow up, and 592 were enrolled. Enrolled patients were classified into two groups, including 89 in low-risk group and 503 in high-risk group. In two groups there were 21 cases, 68 cases, 131 cases and 372 cases of TCT(-) and TCT (+). There were 52 cases, 21 cases, 16 cases, 296 cases, 129 cases and 78 cases with DNA loading<500pg/mL, DNA loading ranged 500-1 000pg/mL and DNA loading >1 000pg/mL in two groups. The natural outcomes of HPV infection in two groups were observed and analyzed. Results After follow-up for 6, 12 and 24 months, the negative rate of HPV infection was significantly higher in low-risk group than in high-risk group (χ2value was 12.720, 11.578 and 17.843, respectively, allP<0.05). The negative rate of patients with TCT(-) was significantly higher than those with TCT(+) in two groups after follow-up for 6, 12 and 24 months (χ2value was 4.307, 17.168, 25.740, 7.906, 44.740 and 68.204, respectively, allP<0.05). In low-risk group the negative rate of patients with TCT(-) was remarkably higher than in high-risk group (χ2value was 6.355, 8.605 and 12.663, respectively, allP<0.05), and the negative rate of patients with TCT(+) was obviously higher in low-risk group (χ2value was 5.452, 6.838 and 12.981, respectively, allP<0.05). Compared with the patients in high-risk group with DNA loading<500pg/mL, the negative rate of patients in low-risk group with DNA loading<500pg/mL was significantly higher (χ2value was 12.999, 12.191 and 21.204, respectively, allP<0.05). Conclusion Natural negative rate in child-bearing women infected with low-risk HPV type is higher than that with high-risk HPV type, and natural negative rate in TCT negative women is higher than that in TCT positive women. Natural negative rate in high-risk HPV infected women with DNA loading<500 pg/mL is higher than that in Low-risk HPV infected women, and negative conversion is rarely observed in high-risk HPV and low-risk HPV infected women with DNA loading >500pg/mL.

child-bearing women; cervix; human papilloma virus (HPV); infection; natural outcomes

2014-08-08

瑞安市科技局資助項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)20120379)；溫州衛(wèi)生局科技項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)：2012B032)

朱珍珍(1976-)，女，主治醫(yī)師，主要從事婦產(chǎn)科臨床工作。

肖蘋妹，副主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.04.038

R711.7

A

1673-5293(2015)04-0769-04