戴衛(wèi)明(江蘇省常熟市梅李動物防疫站 215511)
豬食鹽中毒的病理診斷
戴衛(wèi)明(江蘇省常熟市梅李動物防疫站 215511)
為了探索豬食鹽中毒的發(fā)病原因,對某養(yǎng)殖戶的病死豬進(jìn)行檢查,結(jié)合臨床癥狀及剖檢病變初步診斷為食鹽中毒。取病死豬的腦組織進(jìn)行病理組織學(xué)檢查,鏡下可見腦血管周圍有多量淋巴細(xì)胞聚集,形成 “袖套”現(xiàn)象。綜合以上結(jié)果,進(jìn)一步診斷該病例是由食鹽中毒引起。
豬;食鹽中毒;病理學(xué);診斷
豬食鹽中毒是由于采食含鹽份較多的飼料或飲水,如泔水、腌菜水、飯店食堂的殘羹、洗咸魚水或醬渣等喂豬,配合飼料時誤加過量的食鹽或混合不均勻等而造成。全價飼養(yǎng),特別是日糧中鈣、鎂等礦物質(zhì)充足時,對過量食鹽的敏感性大大降低,反之則敏感性顯著增高。飲水是否充足,對食鹽中毒的發(fā)生更具有絕對的影響。食鹽中毒的關(guān)鍵在于限制飲水。為此,本文通過對豬食鹽中毒的病理診斷進(jìn)行了研究,為該病的預(yù)防和治療提供科學(xué)依據(jù)。
江蘇省常熟市梅李鎮(zhèn)某養(yǎng)殖戶的發(fā)病豬。
(1)70%、80%、90%、95%酒精及無水酒精。95%以下的各級濃度酒精是用95%酒精加蒸餾水稀釋而成。
(2)Bouin氏固定液(苦味酸飽和水溶液75ml,福爾馬林25ml,冰醋酸5ml,混合即成)。
(3)蛋白甘油(蛋白50ml,甘油50ml,水楊酸鈉1g,混合即成)。取一新鮮雞蛋的蛋白,充分?jǐn)嚢璩裳┗钆菽?,然后濾去泡沫,加入等量甘油,攪拌均勻,再加入水楊酸鈉作防腐用。
(4)埃利希蘇木精染液(蘇木精1g,純酒精50ml,冰醋酸5ml,甘油50ml,鉀礬約5g的飽和量,蒸餾水50ml)。將蘇木精溶于約15ml的純酒精中,再加冰醋酸后攪拌;當(dāng)蘇木精溶解后即將甘油倒入并搖動容器,同時加入其余的酒精;將鉀礬在研缽中研碎并加熱,然后將它溶解于水中,將溫?zé)岬拟浀\溶液一滴一滴地加入上述染液中,并隨時攪動;此液混合完畢,將瓶口用一層紗布包著小塊棉花塞起來,放在暗處通風(fēng)的地方,并經(jīng)常搖動以促進(jìn)它的成熟。
(5)0.5%伊紅酒精溶液(0.5g伊紅溶于100ml95%酒精中即成)。
(6)鹽酸酒精(100ml 70%酒精中加入1ml鹽酸)。
二甲苯、切片石蠟、中性樹膠等。
解剖器一套、單面刀片、切片刀、切片機(jī)、載玻片、蓋玻片、標(biāo)本瓶、燒杯、量筒、漏斗、染色缸、樹膠瓶、酒精燈、毛筆、繪圖紙、濾紙、熔蠟箱、展片臺、小木塊、蠟帶盒、烤片盒、切片托盤、顯微鏡等。
2007年8月,常熟市梅李鎮(zhèn)某養(yǎng)豬戶飼養(yǎng)70日齡的白豬86頭,喂的自配飼料,其配方為玉米60%,麩皮15%,豆粕20%,另加5%的預(yù)混料(其所含食鹽0.35%),在此基礎(chǔ)上又添加了250g的氯化鈉。29號早上發(fā)現(xiàn)有一圈12頭豬突然全部發(fā)病,幾頭平時采食較快的豬,臥地不起,其中4頭強(qiáng)壯的豬口吐白沫,流涎,角弓反張,四肢呈游泳狀,呈陣發(fā)性抽搐,于上午陸續(xù)死亡;而其它圈的豬群情況良好,尚未發(fā)病。根據(jù)調(diào)查了解,養(yǎng)豬戶反映發(fā)病的豬圈由于飲水設(shè)施損壞、供水不足,該圈豬群飲水較平常少。
剖檢可見病死豬口角有白沫,肺部淤血、水腫,胃粘膜充血、出血,腦膜顯著充血,腦實質(zhì)充血、水腫。十二指腸充血,出血。其它臟器未見明顯病變。
2.3.1.1 觸片鏡檢
無菌操作剖開病死豬腹腔,取出心、肝、脾、肺和腎制成組織觸片,革蘭氏染色鏡檢,未見有致病菌的存在。
2.3.1.2 細(xì)菌培養(yǎng)
在潔凈的操作臺上,無菌操作取病死豬的肝、脾、腎,分別接種于普通瓊脂、麥康凱和血瓊脂上進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),置于37℃恒溫箱中,培養(yǎng)24~48h后觀察,未見有致病菌的存在。
取病死豬的肝、脾、腎、肺、腦組織和淋巴結(jié)進(jìn)行圓環(huán)病毒、偽狂犬病病毒多重PCR檢測,豬繁殖與呼吸綜合征病毒和豬瘟病毒多重RT-PCR檢測,結(jié)果均為陰性。
2.3.3 病理組織學(xué)檢查
2.3.3.1 取材和固定
將病死豬頭部打開,用銳利的刀片割取腦組織。組織塊的大小以厚度不超過5mm為宜。然后,將取下的組織塊迅速投入Bouin氏固定液中。固定時間為數(shù)小時至24h(需視組織塊的大小而定)。
2.3.3.2 沖洗
經(jīng)固定的材料,用酒精沖洗,洗去固定液以便染色。用Bouin氏液固定的材料,直接移入70%酒精中,多換幾次酒精,直至無黃色時為止(也可在酒精中加入幾滴氨水或飽和碳酸鋰溶液,以迅速洗去黃色)。而后將浸洗材料保存在70%酒精中過夜。
2.3.3.3 脫水
先從低濃度的酒精開始,然后,遞增濃度,直至無水酒精。具體方法是,將材料經(jīng)70%酒精→80%酒精→95%酒精(Ⅰ)→95%酒精(Ⅱ)→無水酒精(Ⅰ)→無水酒精(Ⅱ),各級酒精1~2h。
2.3.3.4 透明
將脫水后的材料經(jīng)1:1無水酒精與二甲苯→二甲苯(Ⅰ)→二甲苯(Ⅱ),各級時間為0.5~2h,務(wù)使組織達(dá)到透明為止。
2.3.3.5 浸蠟
先將裝有56~58℃石蠟的三個蠟杯放在熔蠟箱內(nèi)熔化,并使熔蠟箱的溫度保持恒定(約58℃)。然后將透明了的材料放入蠟杯(Ⅰ)→蠟杯(Ⅱ)→蠟杯(Ⅲ)。浸蠟時間視材料大小而定,總的浸蠟時間為2~4h左右。
2.3.3.6 包埋
包埋前,視組織塊的大小先將繪圖紙折成一紙盒,作為包埋的容器。將紙盒盛滿已熔化的石蠟,隨即將第三杯中已浸蠟的材料放入其中,切面朝下,位置放正。然后速將紙盒半浸于冷水中,待石蠟表面凝結(jié)后,將紙盒全部浸入水中冷卻。石蠟全部凝固后,拆去紙盒即成蠟塊。
2.3.3.7 切片
將修整后的蠟塊粘在小木塊上,小木塊裝在切片機(jī)上,以待切片;在旋轉(zhuǎn)式切片機(jī)上將蠟塊切成4~8um厚的薄片。用毛筆輕輕取下蠟帶,放在蠟帶盒內(nèi)備用。
2.3.3.8 貼片或烤片
用小玻棒蘸取一點蛋白甘油滴于一干凈的載玻片上,用手指涂勻,并加幾滴蒸餾水于載玻片上。將蠟帶切成適當(dāng)長度的蠟片,然后用小鑷子將蠟片輕放在載玻片的水面上,再把載玻片放在展片臺上(溫度為45℃左右)。蠟片受熱后即慢慢展平。待完全展平后,用解剖針將切片位置撥正,傾去載玻片上的余水后,將其放在烤片盒中,置于50℃左右恒溫箱內(nèi)烤干。
2.3.3.9 HE染色
(1)脫蠟:將烤干的切片放入二甲苯(Ⅰ)→二甲苯(Ⅱ)中,各為5min,以溶去切片上的石蠟。
(2)復(fù)水:是將脫蠟后的切片經(jīng)各級濃度酒精逐漸下降到水的過程,即將二甲苯(Ⅱ)中取出的切片移入無水酒精→95%酒精→80%酒精→70%酒精→蒸餾水,各級中停留1~5min。
(3)染色:①將蒸餾水洗滌后的切片移入蘇木精液中5~10min,使細(xì)胞核著色。②用自來水洗去切片上殘余的染液。③用1%鹽酸酒精分色數(shù)分鐘。分色時隨時用顯微鏡檢查切片,使分色適度。④入1%氨水或自來水浸洗,使之藍(lán)化。⑤在蒸餾水中浸片刻。⑥切片入70%→80%→90%各12min。⑦入0.5%伊紅酒精溶液中染色2~5min,使細(xì)胞質(zhì)著色。
2.3.3.10 脫水
切片依次入95%酒精(Ⅰ)→95%酒精(Ⅱ)→無水酒精(Ⅰ)→無水酒精(Ⅱ),各級中停留1~5min。
2.3.3.11 透明
切片入1:1無水酒精、二甲苯→二甲苯(Ⅰ)→二甲苯(Ⅱ),各級停留1~5min。
2.3.3.12 封藏
將切片從二甲苯(Ⅱ)中取出,用紙或布擦去材料周圍的二甲苯。在材料中央滴一小滴樹膠,然后用鑷子加蓋蓋玻片。切片封好后,放在切片托盤上待干燥,即可鏡檢。
2.3.3.13 顯微病變觀察
病理組織學(xué)檢查,鏡下可見腦血管周圍有多量淋巴細(xì)胞聚集,形成 “袖套”現(xiàn)象。
(1)根據(jù)病史及流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、剖檢病變、細(xì)菌分離培養(yǎng)、病毒學(xué)檢查以及病理組織學(xué)檢查等實驗室檢查,診斷本病為豬食鹽中毒所致。本病例中豬群具有過量食用食鹽的病史,臨床上具有流涎、口吐白沫、角弓反張、呈陣發(fā)性抽搐。剖檢可見肺部淤血、水腫,胃粘膜充血、出血,腦膜顯著充血,腦實質(zhì)充血、水腫。十二指腸充血,出血。其它臟器未見明顯病變。病理組織學(xué)檢查結(jié)果表明,腦血管周圍有多量淋巴細(xì)胞聚集,形成 “袖套”現(xiàn)象。符合食鹽中毒。而且通過細(xì)菌學(xué)和病毒學(xué)檢查的結(jié)果排除患其它細(xì)菌性疾病和病毒性疾病感染的可能。
(2)在診斷本病時,臨床上應(yīng)與鏈球菌病、豬水腫病、豬偽狂犬病等有相似神經(jīng)癥狀的疾病加以區(qū)別。腦膜腦炎型豬鏈球菌病,除有神經(jīng)癥狀外,常伴有敗血癥及多發(fā)性關(guān)節(jié)炎癥狀。體表(如腹下,四肢下端、耳尖)出現(xiàn)紫紅色或出血性紅斑,嗜中性白細(xì)胞數(shù)增加;豬水腫病,急性者病初精神沉郁,食欲廢絕,眼瞼、頭、頸部甚至全身水腫,后期出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,盲目行走或轉(zhuǎn)圈,痙攣或驚厥,觸之驚叫、倒地,四肢似游泳狀,24h內(nèi)死亡。剖檢在胃壁及結(jié)腸袢腸系膜上出現(xiàn)水腫。從腸系膜淋巴結(jié)及小腸內(nèi)容物中容易分離到致病性大腸菌;偽狂犬病新生仔豬表現(xiàn)神經(jīng)癥狀,還可侵害消化系統(tǒng)。成年豬則常為隱性感染或癥狀輕微,表現(xiàn)一過性發(fā)熱,咳嗽,便秘,有的可嘔吐,多在3~4d恢復(fù)。體溫繼續(xù)升高則出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。懷孕母豬出現(xiàn)胎兒吸收,木乃伊化死胎,流產(chǎn)。檢肝和脾有1~2mm的白色壞死灶。豬食鹽中毒臨床上則表現(xiàn)流涎、口吐白沫、呈陣發(fā)性抽搐、對外界環(huán)境反應(yīng)不敏感,而且體溫正常,并且有過量攝入食鹽的病史。
(3)在飼養(yǎng)中常添加一定比例的食鹽,可增強(qiáng)代謝,促進(jìn)生長發(fā)育。但是,如果添加過量或方法不當(dāng),就易造成食鹽中毒。關(guān)于各種食鹽中毒量,有文獻(xiàn)中記載豬中毒量為2.2g/kg,食鹽含量在0.35~5%即能滿足豬的需要量,本病例中該用戶在喂給豬食鹽正常量的同時又在飼料中多補(bǔ)給了250g/100kg,因豬對食鹽較敏感,易發(fā)生中毒。同時飲水不足對食鹽中毒的發(fā)生具有決定性影響。實驗表明豬飼料中含食鹽0.25%時,若限制飲水或飲水不足可導(dǎo)致中毒。該圈發(fā)病或死亡的豬,由于飲水設(shè)施損壞、供水不足,而其它圈豬群飲水充足,則沒有發(fā)生中毒現(xiàn)象。
(4)由于本病多呈急性或亞急性經(jīng)過,因此診治本病應(yīng)掌握 “早與快”的原則,并根據(jù)臨床癥狀情況,靈活掌握對癥療法,常采用10%葡萄糖溶液250~500mL;10%溴化鈣靜脈注射;癥狀嚴(yán)重的可靜注25%山梨醇液或甘露醇,以緩解腦水腫,降低顱內(nèi)壓;另外用利尿劑(如氫氯噻嗪),以促進(jìn)氯化鈉的排出,對于食鹽中毒的病豬如能及早發(fā)現(xiàn),及時治療,常能提高治愈率,獲得滿意的療效。
(5)本病應(yīng)以預(yù)防為主,給豬飼料添加食鹽要掌握適量,通常配合料中的食鹽含量0.3~0.5%,且要拌和均勻;如利用含鹽的殘渣剩羹喂豬時,要適當(dāng)限制喂量,并同其他飼料搭配飼喂;給豬保持供給充足的飲水等,可有效的預(yù)防本病。