■孟令凱 郭春華 彭忠利 柏 雪 張正帆 陳智華 李世丹 朱萬(wàn)嶺

（1.西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川成都610041；2.四川省樂(lè)至縣科技局，四川樂(lè)至641507）

目前，隨著我國(guó)草食家畜業(yè)的快速發(fā)展，優(yōu)質(zhì)飼草的供應(yīng)日趨緊張，且存在不能在適宜營(yíng)養(yǎng)期高效合理利用的問(wèn)題。因此，多渠道、多途徑開(kāi)發(fā)營(yíng)養(yǎng)豐富而且廉價(jià)的牧草，對(duì)于緩解當(dāng)前優(yōu)質(zhì)飼草資源不足的局面具有重要意義。青貯生產(chǎn)不易受天氣制約，因此可以在夏秋季牧草生產(chǎn)過(guò)剩時(shí)期對(duì)其青貯，以期提高其飼料品質(zhì)，增加牧草生物量，最大程度地保持青綠飼料的營(yíng)養(yǎng)成分，為冬春季家畜提供飼草。但普通青貯不良發(fā)酵、高損失和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值下降的問(wèn)題亟需解決。

目前添加劑青貯研究較多，青貯效果明顯好于普通青貯，但大部分研究沒(méi)有動(dòng)物試驗(yàn)，且微貯牧草對(duì)反芻動(dòng)物瘤胃和糞中微生物群落影響的研究幾乎沒(méi)有。本研究旨在探討微生態(tài)制劑青貯對(duì)牧草營(yíng)養(yǎng)成分含量、瘤胃和糞中微生物菌群數(shù)量的變化以及對(duì)山羊生長(zhǎng)性能產(chǎn)生的影響，為科學(xué)合理利用微生態(tài)制劑青貯牧草提高反芻動(dòng)物生長(zhǎng)性能提供科學(xué)依據(jù)和技術(shù)支持。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

表1 牧草原料成分

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

微生態(tài)制劑中黑曲霉、酵母、乳酸菌3種微生物的比例為1∶2∶2.5，添加量為0.2%，尿素添加量為0.4%，微貯組根據(jù)添加原料的重量均勻噴灑微生態(tài)制劑，添加菌數(shù)約為1×107cfu/g，打捆機(jī)壓實(shí)打捆裝填密封于塑料袋，普貯組不使用任何添加劑青貯，青貯期45 d。

選擇體重（20.00±2.00）kg、年齡和營(yíng)養(yǎng)狀況基本一致的斷奶公羔羊64只，隨機(jī)分成4組，每組4個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)各組精料相同，按精粗比1∶1配制飼喂試驗(yàn)羊。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在四川蜀南農(nóng)業(yè)有限公司黑山羊種羊場(chǎng)進(jìn)行，預(yù)飼20 d，正式試驗(yàn)期30 d。試驗(yàn)羊預(yù)飼前注射疫苗并驅(qū)蟲(chóng)。試驗(yàn)羊自由采食、飲水，每天記錄采食量。

1.4 樣品采集與測(cè)定指標(biāo)

1.4.1 營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

青貯45 d后取各處理青貯樣品500 g，測(cè)pH值、NH3-N，再65 ℃烘48 h，測(cè)定DM、CP、ADF、NDF。

1.4.2 微生物測(cè)定

青貯45 d后各處理青貯料四分法取樣，裝于樣品袋；試驗(yàn)最后4 d早晚收集鮮糞混勻稱(chēng)重；試驗(yàn)結(jié)束的前1 d，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選2只羊，每只采集瘤胃液20 ml，裝到10 ml滅菌離心管中，4℃保存。

既往有性行為經(jīng)歷的學(xué)生對(duì)艾滋病的知曉率更高，可能與該人群性觀念更為開(kāi)放、更愿意了解艾滋病相關(guān)知識(shí)有關(guān)［16］，但有研究顯示過(guò)早發(fā)生性行為存在感染艾滋病的風(fēng)險(xiǎn)［17］，因此在加強(qiáng)對(duì)青年學(xué)生艾滋病健康教育的同時(shí)也應(yīng)加強(qiáng)對(duì)他們的性教育，以便全面提高青年學(xué)生的艾滋病知曉情況。

1.4.3 表觀消化率測(cè)定

將收集鮮糞稱(chēng)重混勻，按每100 g糞樣加入5 ml 10%硫酸固氮，測(cè) DM、CP、EE、ADF、NDF、AIA、Ash等。

1.4.4 生長(zhǎng)性能指標(biāo)

試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)分別于早晨空腹稱(chēng)重作為初重和末重，計(jì)算平均日增重（ADG）；每日記錄采食量，計(jì)算平均日采食量（ADFI）。

1.5 測(cè)定方法

青貯料、飼糧和糞樣中的DM、CP、Ash、AIA、EE、ADF、NDF含量以及表觀消化率的測(cè)定方法參照張麗英編寫(xiě)的《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》進(jìn)行，WSC采用蒽酮比色法測(cè)定；青貯pH用便攜式pH計(jì)直接測(cè)定；NH3-N采用比色法進(jìn)行測(cè)定。微生物測(cè)定參照沈萍等的《微生物學(xué)試驗(yàn)》進(jìn)行。

1.6 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel統(tǒng)計(jì)，用SPSS軟件進(jìn)行二因素有重復(fù)方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 微生態(tài)制劑對(duì)青貯牧草青貯品質(zhì)的影響(見(jiàn)表2)

表2 青貯牧草成分

由表2可知，相比于普貯組，微貯高丹草和微貯牛鞭草干物質(zhì)分別增加了6.01%、4.76%，粗蛋白分別增加了18.18%、14.92%，ADF分別降低了14.99%、11.51%，NDF分別降低了14.18%、11.51%。

2.2 微生態(tài)制劑對(duì)青貯牧草中微生物菌群的影響（見(jiàn)表3）

表3 普貯和微貯牧草中微生物數(shù)量(CFU/g)

由表3可知，與普貯相比，微貯高丹草酵母菌、黑曲霉、乳酸菌數(shù)量分別增加了475.61%、290.65%、513.37%；微貯牛鞭草酵母菌、黑曲霉、乳酸菌數(shù)量分別增加了466.67%、762.07%、486.05%。

2.3 普貯和微貯牧草對(duì)山羊瘤胃微生物菌群數(shù)量的影響（見(jiàn)表4）

與普貯組山羊相比，微貯組山羊瘤胃中酵母菌、黑曲霉和乳酸菌數(shù)量均極顯著增加（P<0.01）；牧草品種對(duì)山羊瘤胃黑曲霉和乳酸菌數(shù)量的影響差異極顯著（P<0.01）。

2.4 普貯和微貯牧草對(duì)山羊糞中微生物菌群數(shù)量的影響（見(jiàn)表5）

表4 青貯和微貯牧草對(duì)山羊瘤胃微生物菌群數(shù)量的影響(×107CFU/g)

表5 青貯和微貯牧草對(duì)山羊糞中微生物菌群數(shù)量的影響(×105CFU/g)

由表5可知，與普貯組山羊相比，微貯組山羊糞中酵母菌和乳酸菌數(shù)量極顯著增加（P<0.01)，黑曲霉則顯著增加，大腸桿菌數(shù)量極顯著降低（P<0.001)。

2.5 普貯和微貯牧草對(duì)山羊生長(zhǎng)性能的影響(見(jiàn)表6)

表6 普貯和微貯牧草對(duì)山羊生長(zhǎng)性能的影響

微貯組平均日增重顯著高于普貯組（P<0.05）；微貯組料重比顯著低于普貯組（P<0.05）。

2.6 普貯和微貯牧草對(duì)山羊飼糧表觀消化率的影響（見(jiàn)表7）

表7 普貯和微貯牧草對(duì)山羊飼糧表觀消化率的影響(%)

由表7可知，微貯的CP、EE、Ash、ADF、DM、DE的表觀消化率均顯著高于普貯組（P<0.05），而NDF的表觀消化率極顯著高于普貯組（P<0.01）。

3 討論

3.1 微生態(tài)制劑青貯對(duì)牧草品質(zhì)的影響

微生態(tài)制劑青貯對(duì)高丹草和牛鞭草的營(yíng)養(yǎng)成分均有一定影響，均可提高牧草的粗蛋白含量，降低酸性洗滌纖維和中性洗滌纖維含量，這與許多研究結(jié)果一致。相比于普貯組，微貯高丹草和微貯牛鞭草粗蛋白分別增加了18.18%、14.92%，原因主要是青貯初期以酵母菌為主的微生物大量生長(zhǎng)繁殖充分利用添加劑中的氮源和植物細(xì)胞釋放的可溶性含氮化合物轉(zhuǎn)化為菌體蛋白。由于在發(fā)酵初期酵母菌、黑曲霉等大量生長(zhǎng)繁殖，產(chǎn)生了大量的纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、糖化酶等，酶解纖維素、木質(zhì)素，微貯組較普貯組ADF和NDF的含量均有明顯的降低，這與任付平的結(jié)果一致。

3.2 微生態(tài)制劑青貯對(duì)微生物菌群的影響

唐智松、劉禎等研究結(jié)果表明使用微生物青貯可增加牧草中有益菌群數(shù)量，抑制腐敗菌的滋生。微貯組乳酸菌數(shù)量最多，且微貯組pH值均低于普貯組，在微貯組中乳酸菌占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)；由于隨著青貯發(fā)酵過(guò)程的進(jìn)行，乳酸菌對(duì)其他微生物拮抗作用增加，氧氣含量和pH值下降，需氧菌的活動(dòng)受到抑制，因而酵母菌、黑曲霉數(shù)量相對(duì)較低。添加同等劑量的微生態(tài)制劑，高丹草微貯組中乳酸菌和酵母菌數(shù)量均高于牛鞭草微貯組，但黑曲霉數(shù)量卻低于牛鞭草處理組，這可能與牛鞭草的纖維素含量比較高有關(guān)，需進(jìn)一步試驗(yàn)研究。

馮仰廉（2004）認(rèn)為反芻動(dòng)物瘤胃內(nèi)棲息著復(fù)雜、多樣、非致病的各種微生物，包括原蟲(chóng)、細(xì)菌和厭氧真菌，這些菌群的數(shù)量及整個(gè)微生物區(qū)系的組成受諸多因素的影響，其中日糧是最重要的因素。與普貯組山羊相比，微貯組山羊的瘤胃中的酵母菌、黑曲霉和乳酸菌數(shù)量均極顯著增加（P<0.01），而微貯牧草乳酸菌、酵母菌、黑曲霉數(shù)量均高于普貯牧草，說(shuō)明日糧中的微生物可顯著影響瘤胃微生物菌群，試驗(yàn)結(jié)果與上述一致；牧草品種對(duì)山羊瘤胃酵母菌數(shù)量的影響不顯著（P>0.05），但對(duì)山羊瘤胃黑曲霉和乳酸菌數(shù)量的影響差異極顯著（P<0.05），這可能與牧草品種間含有的不同微生物生長(zhǎng)繁殖所需物質(zhì)的量有差異相關(guān)。

馮仰廉（2004）認(rèn)為反芻動(dòng)物糞中微生物菌群數(shù)量與瘤胃內(nèi)菌群的數(shù)量及整個(gè)微生物區(qū)系存在正相關(guān)關(guān)系。與普貯組山羊相比，微貯組山羊糞中酵母菌和乳酸菌數(shù)量極顯著增加（P<0.01)，黑曲霉則顯著增加（P<0.05)，而微貯組山羊的瘤胃中的酵母菌、黑曲霉和乳酸菌數(shù)量較普貯組均極顯著增加（P<0.01），這與馮仰廉的說(shuō)法一致；而大腸桿菌數(shù)量極顯著降低，這與反芻動(dòng)物瘤胃及消化系統(tǒng)中酵母菌和乳酸菌數(shù)量增多有關(guān)，酵母菌能夠預(yù)防和治療動(dòng)物體的腹脹腹瀉等消化不良癥狀，促進(jìn)幼畜胃腸道發(fā)育；乳酸菌生成乳酸降低pH值，還可以產(chǎn)生細(xì)菌素等，抑制大腸桿菌等有害菌。綜上所述，山羊飼喂微貯牧草，可以增加糞中有益菌數(shù)量，降低大腸桿菌數(shù)量,提高動(dòng)物免疫和抗病能力。

3.3 普貯和微貯牧草對(duì)山羊飼糧營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率的影響

飼糧中NDF水平降低時(shí)，NFC的比例增加，纖維含量降低，而較低的纖維含量會(huì)增加飼糧在瘤胃的滯留時(shí)間，降低飼糧在胃腸道中的流通速度，增加了DM的降解，從而提高了CP、EE以及鈣、磷等礦物質(zhì)的腸道消化率和全消化道消化率。本試驗(yàn)結(jié)果為每個(gè)處理組精料相同，精粗比一定，微貯組牧草的NDF含量低于普貯組牧草，且微貯組飼糧的粗蛋白、粗脂肪、粗灰分的日糧的表觀消化率均顯著高于普貯組（P<0.05），與上述報(bào)道一致。

反芻動(dòng)物對(duì)粗纖維的消化利用，主要是通過(guò)瘤胃中微生物的降解來(lái)進(jìn)行的，測(cè)定酸性洗滌纖維和中性洗滌纖維的表觀消化率，能在一定程度上反映出瘤胃微生物對(duì)纖維的消化降解情況。瘤胃微生物是一個(gè)復(fù)合菌群，主要包含真菌、細(xì)菌和原蟲(chóng)，能發(fā)酵和降解纖維素類(lèi)物質(zhì)。微貯組日糧的酸性洗滌纖維的表觀消化率顯著高于普貯（P<0.05），中性洗滌纖維的日糧表觀消化率極顯著高于普貯組（P<0.01）。微貯組添加微生態(tài)制劑發(fā)酵牧草中的微生物進(jìn)入山羊瘤胃中，并未破壞原有的微生物菌群平衡，而是起到協(xié)同作用，黑曲霉、酵母菌、乳酸菌在瘤胃中生長(zhǎng)繁殖，加快了ADF和NDF在瘤胃內(nèi)的降解，進(jìn)而提高了ADF和NDF的表觀消化率。

3.4 普貯和微貯牧草對(duì)山羊生長(zhǎng)性能的影響

本試驗(yàn)微貯組和普貯組日均采食量無(wú)顯著差異，這可能是此生長(zhǎng)階段的山羊采食量比較穩(wěn)定的緣故。孔祥浩等研究表明，4月齡雜交一代（小尾寒羊×無(wú)角陶賽特）羯羊采食不同NDF水平日糧，各組羯羊采食量無(wú)顯著差異。試驗(yàn)普貯組料重比顯著高于微貯組；微貯組日均增重顯著高于普貯組，生長(zhǎng)性能是反芻動(dòng)物攝入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)后體內(nèi)吸收利用率的表達(dá)，微生態(tài)制劑的作用主要表現(xiàn)在提高牧草青貯品質(zhì)、改善瘤胃發(fā)酵內(nèi)環(huán)境以及提高各營(yíng)養(yǎng)成分的表觀消化率的變化，這些影響的綜合作用就會(huì)對(duì)反芻動(dòng)物生長(zhǎng)性能的表達(dá)產(chǎn)生一定的影響。

4 結(jié)論

微生態(tài)制劑青貯可以明顯改善牧草青貯品質(zhì)，增加瘤胃及糞中酵母菌、黑曲霉和乳酸菌數(shù)量，降低糞中大腸桿菌數(shù)量，可顯著提高山羊的飼糧表觀消化率和生長(zhǎng)性能。

（參考文獻(xiàn)16篇，刊略，需者可函索）