劉金鳳，彭 杰，汪艷麗，劉如秀

·綜述與進(jìn)展·

竇房結(jié)細(xì)胞起搏與超極化激活的環(huán)核苷酸門控通道關(guān)系的研究進(jìn)展

劉金鳳，彭 杰，汪艷麗，劉如秀

竇房結(jié)是正常心臟活動(dòng)的起搏點(diǎn)，竇房結(jié)細(xì)胞的自律性決定心率的快慢，而竇房結(jié)細(xì)胞4期自動(dòng)除極是其產(chǎn)生自律性的基礎(chǔ)，該過(guò)程是通過(guò)竇房結(jié)細(xì)胞膜上多種離子流的共同作用而實(shí)現(xiàn)的，其中超極化激活的環(huán)核苷酸門控陽(yáng)離子通道(HCN)及其產(chǎn)生的電流(If電流)在竇房結(jié)細(xì)胞起搏電活動(dòng)中具有重要作用。本文探討竇房結(jié)細(xì)胞起搏與超極化激活的環(huán)核苷酸門控通道的關(guān)系，為臨床治療病態(tài)竇房結(jié)綜合征等緩慢性心律失常提供新的方向。

竇房結(jié)細(xì)胞；超極化激活的環(huán)核苷酸門控陽(yáng)離子通道；起搏電流

竇房結(jié)(sino-atrial node，SAN)是正常心臟活動(dòng)的起搏點(diǎn)，在心臟傳導(dǎo)系統(tǒng)中自律性最高，決定了心率的快慢，其病變直接表現(xiàn)為心電生理功能的異常。竇房結(jié)細(xì)胞(sino-atrialnode cells，SNC)是竇房結(jié)產(chǎn)生電生理活動(dòng)的基礎(chǔ)，竇房結(jié)細(xì)胞起搏有多種離子通道及相應(yīng)電流參與，其中超極化激活的環(huán)核苷酸門控陽(yáng)離子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide gated cation channel，HCN)及其產(chǎn)生的電流(If)在竇房結(jié)細(xì)胞起搏電活動(dòng)中起著重要作用。

1 竇房結(jié)與竇房結(jié)細(xì)胞起搏電生理

竇房結(jié)位于右房和上下腔靜脈的交界部位(界嵴)以及上下腔靜脈之間的區(qū)域，其生理功能主要是控制并維持心率在一個(gè)穩(wěn)定的水平。竇房結(jié)血供由竇房結(jié)動(dòng)脈供應(yīng)，該動(dòng)脈55%～60%來(lái)自右冠狀動(dòng)脈的右房前動(dòng)脈供血，40%～45%來(lái)自左冠狀動(dòng)脈回旋支的左房前動(dòng)脈供血。竇房結(jié)內(nèi)結(jié)構(gòu)不均勻，結(jié)內(nèi)的心肌細(xì)胞由中心向周邊依次分布P細(xì)胞(pale/pacemaker細(xì)胞或起搏細(xì)胞)、T細(xì)胞(transitional細(xì)胞或過(guò)渡細(xì)胞)和心房肌細(xì)胞，其中P細(xì)胞在竇房結(jié)起搏活動(dòng)中占有重要地位，P細(xì)胞自發(fā)性舒張期除極的特點(diǎn)形成竇房結(jié)的自律性；而從P細(xì)胞到心房肌細(xì)胞的傳導(dǎo)是通過(guò)T細(xì)胞完成的。

竇房結(jié)組織的非均一性使得竇房結(jié)中心與周邊細(xì)胞形態(tài)各異，其電生理特性也存在很大差異。對(duì)兔 SAN 的研究證明了從竇房結(jié)中央到心房邊緣的電生理特征的異質(zhì)性，表現(xiàn)在動(dòng)作電位形態(tài)上的逐漸改變、最大舒張電位的降低、超射峰值的增加、上升速率的增加和起搏點(diǎn)位斜率的降低[1，2]?？赡苷怯捎诟]房結(jié)組織結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性和功能的的異質(zhì)性，才保證了竇房結(jié)的正常工作。

隨著年齡的增長(zhǎng)，竇房結(jié)結(jié)構(gòu)改變?nèi)缒z原沉積、腫脹、細(xì)胞的肥大和細(xì)胞外基質(zhì)的重塑，離子通道及細(xì)胞間連接的改變等，均可以導(dǎo)致竇房結(jié)起搏功能下降，從而使得病態(tài)竇房結(jié)綜合征(sick sinus syndrome，SSS)的發(fā)病率明顯上升[3，4]。老年人竇房結(jié)功能障礙的主要表現(xiàn)為竇房結(jié)恢復(fù)時(shí)間的延長(zhǎng)和固有心率的降低，其電生理基礎(chǔ)是竇房結(jié)細(xì)胞舒張期去極化程度的降低和動(dòng)作電位時(shí)程的延長(zhǎng)[5]。此外，竇房結(jié)組織缺血缺氧也是竇房結(jié)心電生理功能異常的重要因素，如冠心病心肌缺血時(shí)，竇房結(jié)發(fā)生部分凋亡甚至壞死，使得心肌起搏細(xì)胞數(shù)量減少，進(jìn)而出現(xiàn)竇房結(jié)結(jié)構(gòu)和功能的減退[6]。

竇房結(jié)的電生理功能歸功于竇房結(jié)起搏細(xì)胞的獨(dú)特電生理特性，以產(chǎn)生不同于周圍心房肌細(xì)胞的自發(fā)性動(dòng)作電位，電沖動(dòng)再通過(guò)心房，快速傳遞到房室結(jié)，最后在心室肌細(xì)胞引起興奮-收縮偶聯(lián)反應(yīng)。在心臟的舒張期，心房肌及心室肌細(xì)胞不發(fā)生電沖動(dòng)而維持在較高的超極化水平。但與之不同，自發(fā)搏動(dòng)的竇房結(jié)細(xì)胞于舒張期存在緩慢的去極化過(guò)程，在動(dòng)作電位的終點(diǎn)，細(xì)胞膜電位并不維持在一個(gè)更負(fù)的水平，而是以一定斜率緩慢地去極化，直到達(dá)到一次新沖動(dòng)的閾電位，引發(fā)下一次的動(dòng)作電位[7]。

竇房結(jié)細(xì)胞4期自動(dòng)除極是竇房結(jié)產(chǎn)生自律性的基礎(chǔ)，因此是竇房結(jié)起搏活動(dòng)的關(guān)鍵，該過(guò)程叫做舒張期去極化，是通過(guò)SNC細(xì)胞膜上多種離子流的共同作用而實(shí)現(xiàn)的。竇房結(jié)起搏機(jī)制從在體電生理到細(xì)胞電生理研究已經(jīng)歷經(jīng)40余年，但目前仍未明確。經(jīng)典的電生理理論認(rèn)為，竇房結(jié)細(xì)胞4 期自動(dòng)除極的主要機(jī)制是：超極化激活環(huán)核苷酸門控陽(yáng)離子電流(起搏電流，簡(jiǎn)稱If) 的激活、延遲整流性鉀電流(Ik)的失活以及L型鈣電流(ICa-L)和T型鈣電流(ICa-T) 的激活等[8]。竇房結(jié)細(xì)胞動(dòng)作電位(電興奮)的產(chǎn)生與細(xì)胞膜上的各種離子通道直接相關(guān)，其中最重要的是與起搏電流有關(guān)的If通道，它決定最大舒張期電位，參與竇房結(jié)細(xì)胞舒張?jiān)缙谧詣?dòng)化除極后1/3 相，其分子基礎(chǔ)是超極化激活的環(huán)核苷酸門控(HCN) 通道，而Ik參與SNC動(dòng)作電位舒張?jiān)缙谧詣?dòng)化除極前1/3相，電壓依賴性ICa-L參與舒張?jiān)缙谧詣?dòng)化除極中1/3相[9]。Schulze-Bahr等[10]報(bào)道了由于 HCN4 通道在第 573 個(gè)氨基酸殘基以后缺失的突變，而導(dǎo)致的 SAN 活動(dòng)異常，HCN4是刺激交感神經(jīng)調(diào)節(jié)起搏點(diǎn)活動(dòng)的主要通道。

2 竇房結(jié)細(xì)胞主要起搏離子流If電流

早在1980年，Brown等[11]在研究兔竇房結(jié)細(xì)胞時(shí)發(fā)現(xiàn)了一種超極化激活的離子電流，并將其命名為If(funny current)電流，又稱In電流，該電流在膜電位超極化時(shí)激活，后經(jīng)證實(shí)If / In 是參與竇房結(jié)起搏活動(dòng)的重要起搏電流之一。

If電流由超極化激活陽(yáng)離子通道的HCN 基因家族編碼，是竇房結(jié)細(xì)胞4 期自動(dòng)除極的主要離子流，是細(xì)胞自律性的基礎(chǔ)。If電流是非特異性Na+、K+混合內(nèi)向電流，主要離子成分為Na+，有少量K+參與。在竇房結(jié)，If電流可以重復(fù)的使起搏點(diǎn)電位從-70 mV向-40 mV去極化，最終導(dǎo)致動(dòng)作電位的發(fā)生[12]。

If電流呈電壓依賴性，但與其他大多數(shù)電壓依賴性通道在去極化激活不同，If在細(xì)胞膜超極化至 -50 mV～-70 mV 時(shí)激活，至-100 mV 時(shí)完全激活，翻轉(zhuǎn)電位為-2 mV±2 mV ，隨超極化的加強(qiáng)，If電流變大。該電流激活下存在兩種不同動(dòng)力學(xué)成分，一種是小的瞬時(shí)內(nèi)向電流，它能在幾毫秒時(shí)間內(nèi)完全激活，一種是大的緩慢激活成分，其完全激活達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)時(shí)需要數(shù)百毫秒至數(shù)秒鐘的時(shí)間[13]。

If電流的第2個(gè)特性是環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate，cAMP)調(diào)控性。激素和神經(jīng)遞質(zhì)可以升高細(xì)胞內(nèi)的cAMP水平，使得HCN電流的半數(shù)激活電位移向較正電位并加快了通道的動(dòng)力學(xué)特性[14]，因此交感神經(jīng)刺激和迷走張力通過(guò)cAMP 介導(dǎo)的If電流加快或減慢心率，If電流也被認(rèn)為是機(jī)體應(yīng)對(duì)腎上腺素刺激時(shí)竇性心率加速的重要機(jī)制。當(dāng)β受體興奮，可通過(guò)Gas直接作用，增加If 的幅度，也可通過(guò)Gas/cAMP 的間接作用增加If 電流[15]。受體在與兒茶酚胺類物質(zhì)結(jié)合后激活cAMP，提高細(xì)胞內(nèi)cAMP 濃度，If 激活曲線的正向移動(dòng)，超極化過(guò)程中的離子通道開(kāi)放概率提高，產(chǎn)生一個(gè)更大的If 離子流來(lái)驅(qū)動(dòng)舒張期去極化的過(guò)程，使去極化本身加速來(lái)提高自律性。相反，毒蕈堿樣乙酰膽堿受體興奮降低cAMP 的水平和減少If，使心率減緩。

3 If電流相關(guān)離子通道

1998年，Santoro等[16]和Ludwig等[17]首次發(fā)現(xiàn)了介導(dǎo)超極化激活陽(yáng)離子電流的離子通道(HCN通道)，并在此后的兩年間陸續(xù)克隆出多種HCN通道，而編碼該通道的基因則被稱為HCN基因。

HCN基因的編碼產(chǎn)物HCN 通道均是由4個(gè)亞單位組裝而成的四聚體復(fù)合物，每個(gè)亞單位含有1個(gè)氨基端片段、6個(gè)跨膜片段(S1～S6)、1個(gè)C 末端環(huán)核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域(cyclic nucleotide-binding domain，CNBD) 和1個(gè)羧基端片段，且各種HCN通道異構(gòu)型在跨膜片段和CNBD區(qū)是高度保守的，而在氨基末端和羧基末端的區(qū)域差異很大[18]。同時(shí)，HCN通道和電壓門控的K+通道及環(huán)腺苷酸門控通道在基因序列上有很高的同源性。

在對(duì)哺乳動(dòng)物的研究中發(fā)現(xiàn)HCN家族有4種基因亞型的表達(dá)：HCN1-4。其中在心臟中表達(dá)的亞型主要是HCN1、HCN2和HCN4，而竇房結(jié)中含量最高的亞型則是HCN4，兔竇房結(jié)HCN4可占HCN mRNA表達(dá)的4/5[19，20]?？偟膩?lái)說(shuō)，HCN4 表達(dá)在傳導(dǎo)系統(tǒng)中具有自發(fā)活動(dòng)的細(xì)胞上，能使起搏的頻率維持在一定水平以上并隨著機(jī)體不同的生理狀態(tài)而對(duì)頻率進(jìn)行調(diào)整，而HCN2 基本表達(dá)在非自發(fā)活動(dòng)的心肌細(xì)胞中，主要作用在于維持起搏節(jié)律的穩(wěn)定。通道激活動(dòng)力學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，HCN4激活最慢，但對(duì)cAMP反應(yīng)性靈敏。組成HCN 通道的4個(gè)亞基可以相同或不同。Stieber 等[21]通過(guò)對(duì)部分心肌組織中2 種亞型對(duì)起搏通道的貢獻(xiàn)進(jìn)行研究，認(rèn)為起搏通道由單獨(dú)的HCN2或HCN4亞型組成，即起搏通道的同源構(gòu)成學(xué)說(shuō)，但也有報(bào)道起搏通道由HCN2和HCN4共同組成，為起搏通道的異源構(gòu)成學(xué)說(shuō)。

HCN4基因在竇房結(jié)起搏細(xì)胞的自發(fā)電活動(dòng)中起著主要的作用，而且對(duì)心臟傳導(dǎo)系統(tǒng)的功能發(fā)育也起著非常重要的作用。HCN4 基因敲除小鼠模型研究證實(shí)HCN4 基因在動(dòng)物胚胎發(fā)育過(guò)程中起至關(guān)重要的作用，HCN4 功能缺失小鼠在胚胎期就終止了生長(zhǎng)發(fā)育[22]。Stieber 等[12]通過(guò)敲除小鼠HCN2、HCN4 基因及應(yīng)用If 阻滯劑研究HCN 通道與竇房結(jié)心律失常的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)表明，HCN4 敲除小鼠心率明顯減慢，無(wú)心律不齊，無(wú)明顯的結(jié)構(gòu)異常，但收縮比正常小鼠減小40%，且cAMP 的應(yīng)用不能扭轉(zhuǎn)減少。動(dòng)作電位記錄提示HCN4 敲除小鼠僅能形成“原始”的動(dòng)作電位而不能形成“成熟”的起搏電流。Yasui等[23]研究發(fā)現(xiàn)，早期的心室肌細(xì)胞可以產(chǎn)生自發(fā)搏動(dòng)，這時(shí)心肌組織表達(dá)HCN4 及HCN1 亞型，到出生后1 d 的心肌細(xì)胞在大多數(shù)情況下已經(jīng)失去了自發(fā)搏動(dòng)的能力，HCN2 成為了主要的亞型。隨著心室肌細(xì)胞中HCN mRNA 表達(dá)亞型的變化，總的mRNA 水平也下降了80%，同時(shí)If電流密度也相應(yīng)減少。總之，HCN4 是正常起搏電流產(chǎn)生的重要因素，也是基本心率的決定因素，其具有特征性的表達(dá)模式和緩慢門控作用，參與控制心臟起搏細(xì)胞的節(jié)律性活動(dòng)。

HCN4通道的調(diào)控依賴于cAMP的門控機(jī)制為人們所熟知，它由20世紀(jì)90 年代早期意大利學(xué)者DiFrancesco 等[24]在竇房結(jié)細(xì)胞的膜片上記錄的電流實(shí)驗(yàn)中首次揭示。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，HCN通道是由cAMP 經(jīng)由PKA 介導(dǎo)的絲氨酸/蘇氨酸磷酸化作用[25]，證實(shí)了PKA 介導(dǎo)的HCN通道磷酸化過(guò)程[26]。過(guò)去部分學(xué)者認(rèn)為HCN 通道是由cAMP 結(jié)合到通道COOH 末端的環(huán)核苷酸結(jié)合域(CNBD)上從而激活通道，并不依賴磷酸化作用[27]。然而最新研究發(fā)現(xiàn)If 興奮調(diào)節(jié)中需要PKA的活性，PKA 能直接磷酸化HCN4，If被認(rèn)為是竇房結(jié)細(xì)胞cAMP信號(hào)的末端效應(yīng)和作用靶點(diǎn)[28，29]。目前HCN 通道由cAMP調(diào)節(jié)的分子機(jī)制正在進(jìn)一步研究中。

4 超極化激活的環(huán)核苷酸門控通道異常與心律失常

大量研究表明，HCN4通道異常與遺傳性心律失常的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，幾種嚴(yán)重的家族性心律失常如長(zhǎng)QT 綜合征(LQTS)、短QT 綜合征(SQTS)、Brugada 綜合征、兒茶酚胺敏感性多源性室性心動(dòng)過(guò)速(CPVT)、竇房結(jié)及房室結(jié)傳導(dǎo)系統(tǒng)紊亂、嬰幼兒及青少年猝死綜合征[30]已經(jīng)定義為離子通道病。這些心律失常涉及不同的HCN 基因突變，同時(shí)表現(xiàn)各異。

Ueda 等[31]分析了6 例竇房結(jié)功能障礙患者，3例進(jìn)展性心臟傳導(dǎo)阻滯患者和14例自發(fā)性的心室顫動(dòng)患者的HCN4基因，發(fā)現(xiàn)這些患者6個(gè)已知的離子通道出現(xiàn)陰性突變，導(dǎo)致HCN4 通道運(yùn)輸障礙，出現(xiàn)膜表達(dá)下降和If 減低。Laish等[32]一項(xiàng)關(guān)于HCN4基因突變導(dǎo)致暈厥及心動(dòng)過(guò)緩等臨床表現(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)，3個(gè)無(wú)血親關(guān)系的家系出現(xiàn)HCN4 基因突變，將此突變通道表達(dá)在爪蟾卵母細(xì)胞及HEK293 細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)起搏電流功能異常及通道蛋白表達(dá)下降。Alig等[33]在小鼠中表達(dá)人HCN4 基因，發(fā)現(xiàn)人HCN4 基因突變導(dǎo)致If 對(duì)cAMP 敏感性下降，細(xì)胞舒張期除極速度減慢，心率明顯降低?？傊?，HCN4 相關(guān)離子通道病基因及功能研究說(shuō)明，功能缺失突變所致HCN 電流抑制與心臟節(jié)律紊亂，尤其是心動(dòng)過(guò)緩相關(guān)。

竇房結(jié)細(xì)胞HCN4 表達(dá)的異常與竇房結(jié)功能紊亂密切相關(guān)。某些心律失常的發(fā)生可能與竇房結(jié)急性缺血/再灌注損傷后，竇房結(jié)細(xì)胞HCN4基因表達(dá)減低，導(dǎo)致其主導(dǎo)的起搏電流If 異常有關(guān)。劉如秀等[34]研究甲醛滲透造成竇房結(jié)組織損傷對(duì)在體兔竇房結(jié)細(xì)胞的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)竇房結(jié)損傷使竇房結(jié)細(xì)胞HCN4蛋白表達(dá)量下降，心率變慢，而益陽(yáng)活血中藥可以上調(diào)HCN4蛋白表達(dá)從而提高心率。

綜上所述，生理狀態(tài)下HCN4通道相關(guān)電流If是產(chǎn)生心臟節(jié)律的重要因素，If 的失衡可能是各種心律失常發(fā)生的電生理基礎(chǔ)之一，而PKA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)的HCN4通道蛋白磷酸化可能是關(guān)鍵的分子機(jī)制。通過(guò)上調(diào)起搏電流If，可提高竇房結(jié)細(xì)胞自律性，以緩解緩慢性心律失常。進(jìn)一步研究重點(diǎn)是是如何增加HCN4基因的蛋白表達(dá)，提高If，最終增加心率，為臨床治療病竇綜合征等緩慢性心律失常提供新的方向。

[1] Bleeker WK，Mackaay AJ，Masson-Pevet M，et al．Functional and morphological organization of the rabbit sinus node[J]．Circ Res，1980，46：11.

[2] Boyett MR，Honjo H，Yamamoto M，et al．Downward gradient in action potential duration along conduction path in and around the sinoatrial node[J]．Am J Physiol，1999，276：H686.

[3] Rose RA．Keeping the clocks ticking as we age：Changes in sinoatrial node gene expression and function in the ageing heart[J]．Exp Physiol，2011，96：1114.

[4] Yanni J，Tellez JO，Sutyagin PV，et al．Structural remodelling of thesinoatrial node in obese old rats[J]．J Mol Cell Cardiol，2010，48：653.

[5] Tellez JO，Mc Zewski M，Yanni J，et al．Ageing-dependent remodelling of ion channel and Ca2+clock genes underlying sino-atrial node pacemaking[J]．Exp Physiol，2011，96(11)：1163-1178.

[6] Victor A，Loren A．Diagnosis and treatment of sick sinus syndrome[J]．American Family Physician，2003，67(8)：1725-1732.

[7] DiFrancesco D．Pacemaker mechanisms in cardiac tissue[J]．Annu Rev Physiol，1993，55：455-472．

[8] Lakatta EG，Maltsev VA，Vinogradova TM．A coupled system of in-tracellular Ca2+clocks and surface membrane voltage clocks controls the timekeeping mechanism of the heart’s pacemaker[J]．Circ Res，2010，106：659.

[9] Irisawa H，Brown HF，Gile W．Cardiac pacemaking in the sinoatrial node[J]．Physiol Rev，1993，73(1)：197-227.

[10] Schulze-Bahr E，Neu A，F(xiàn)riederich P，et al．Pacemaker channel dysfunction in a patient with sinus node disease[J]．J Clin Invest，2003，111：1537.

[11] Brown H，Difrancesco D．Voltage-clamp investigations of membrane currents underlying pace-maker ctivity in rabbit sino-atrial node [J]．J Physiol，1980，308：331.

[12] Stieber J，Hofmann F，Ludwig A，et al．Pacemaker channels and sinus node arrhythmia [J]．Trends Cardiovasc Med，2004，14(1)：23-28．

[13] Robinson RB，Siegelbaum SA．Hyperpolarization-activatedcation currents：From molecules to physiological function [J]．Annu Rev Physiol，2003，65：453-480.

[14] Wainger BJ，DeGennaro M，Santoro B，et al．Molecular mechanism of cAMP modulation of HCN pacemaker channels[J]．Nature，2001，411(6839)：805-810．

[15] Varghese A，Tenbroek EM，Coles J Jr，et al．Endogenous channels in HEK cells and potential roles in HCN ionic current measurements[J]．Prog Biophys Mol Biol，2006 ，90(1-3)：26-37.

[16] Santoro B，Liu DT，Yao H，et al．Identification of a gene encoding a hyperpolarization-activated pacemaker channel of brain[J]．Cell，1998，93(5)：7175.

[17] Ludwig A，Zong X，Jeglitsch M，et al．A family of hyperpolarization-activated mammalian cation channels[J]．Nature，1998，393(6685)：587.

[18] Biel M，Schneider A，Wahl C．Cardiac HCN channels：Structure，function，and modulation [ J ]．Trends Cardiovasc Med，2002，12(5)：206-212．

[19] Marionneau C，Couette B，Liu J，et al．Specific pattern of ionic channel gene expression associated with pacemaker activity in the mouse heart[J]．J Physiol，2005，562(Pt 1)：223.

[20] Shi W，Wymore R，Yu H，et al．Distribution and prevalence of hyperpolarization-activated cation channel (HCN) mRNA expression in cardiac tissues[J]．Circ Res，1999，85(1)：e1.

[21] Stieber J，Herrmann S，F(xiàn)eil S，et al．The hyperpolarization-activated channel HCN4 is required for the generation of pacemaker action potentials in the embryonic heart[J]．Proc Natl Acad Sci USA，2003，100(25)：15235.

[22] Nof E，Antzelevitch C，Glikson M．The contribution of HCN4 to normal sinus node function in humans and animal models[J]．Pacing Clin Electrophysiol，2010，33(1)：100.

[23] Yasui K，Liu W，Opthof T，et al．I(f) current and spontaneous activity in mouse embryonic ventricular myocytes[J]．Circ Res，2001，88(5)：536-542．

[24] DiFrancesco D，Tortora P．Direct activation of cardiac pacemaker channels by intracellular cyclic AMP[J]．Nature，1991，351(6322)：145-147．

[25] Schulz DJ，Temporal S，Barry DM，et al．Mechanisms of voltage-gated ion channel regulation：From gene expression to localization[J]．Cell Mol Life Sci，2008，65(14)：2215-2231．

[26] Vargas G，Lucero MT．Modulation by PKA of the hyperpolarization-activated current (Ih) in cultured rat olfactory receptor neurons[J]．J Membr Biol，2002，188(2)：115-125．

[27] Zagotta WN，Olivier NB，Black KD，et al．Structural basis for modulation and agonist specificity of HCN pacemaker channels[J]．Nature，2003，425(6954)：200-205．

[28] Liao Z，St Clair JR，Larson ED，et al．Myristoylated peptides potentiate the funny current (If) in sinoatrial myocytes[J]．Channels(Austin)，2011，5(2)：115-119．

[29] Liao Z，Lockhead D，Larson ED，et al．Phosphorylation and modulation of hyperpolarization-activated HCN4 channels by protein kinase A in the mouse sinoatrial node[J]．J Gen Physiol，2010，136(3)：247-258.

[30] Tester DJ，Ackerman MJ．Cardiomyopathic and channelopathic causes of sudden unexplained death in infants and children[J]．Annu Rev Med，2009，60：69-84．

[31] Ueda K，Nakamura K，Hayashi T，et al．Functional characterization of a trafficking-defective HCN4 mutation，D553N，associated with cardiac arrhythmia[J]．J Biol Chem，2004，279(26)：27194 -27198．

[32] Laish FA，Glikson M，Brass D，et al．A novel mutation in the HCN4 gene causes symptomatic sinus bradycardia in Moroccan Jews[J]．J Cardiovasc Electrophysiol，2010，21(12)：1365-1367．

[33] Alig J，Marger L，Mesirca P，et al．Control of heart rate by cAMP sensitivity of HCN channels[J]．Proc Natl Acad Sci USA，2009，106(29)：12189.

[34] 劉如秀，暴美靜，王妮娜，等．益陽(yáng)活血方對(duì)損傷兔竇房結(jié)組織hcn4蛋白表達(dá)的影響[J]．實(shí)用藥物與臨床，2012(3)：129-132.

(本文編輯 郭懷印)

國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81173447)；北京市中醫(yī)藥薪火傳承3+3項(xiàng)目(2009年)；北京市第四批老中醫(yī)藥專家?guī)煶小半p百”工程(2011年)；中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院“名醫(yī)名家傳承”(No.CM20141006)

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R331.1

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10．3969/j．issn．1672-1349．2015．14．013

1672-1349(2015)14-1622-04

2015-01-21)