王齊國(guó)，龍訓(xùn)輝，徐測(cè)梁

慢性心力衰竭患者血小板 PAC-1與NT-proBNP的相關(guān)性分析

王齊國(guó)，龍訓(xùn)輝，徐測(cè)梁

目的 觀察慢性心力衰竭患者血小板活化結(jié)合位點(diǎn)-1(PAC-1)與N末端腦鈉肽前體(NT-proBNP)相關(guān)性，探討慢性心力衰竭患者血栓形成的機(jī)制。方法 選擇2013 年11月—2015 年2月住院患者共62例，其中對(duì)照組(心功能正常)15例，CHF 組47例，CHF 組按紐約心臟病協(xié)會(huì)(NYHA)心功能分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分為心功能Ⅱ 級(jí)16 例， Ⅲ級(jí)14 例， Ⅳ級(jí)17例。血小板 PAC-1的表達(dá)水平采用全血流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定 NT-proBNP 水平；分別比較各組間血小板 PAC-1表達(dá)的差異及其與 NT-proBNP的相關(guān)性。結(jié)果 CHF 組患者血小板 PAC-1水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。心功能 Ⅱ級(jí)組、Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組患者間血小板 PAC-1表達(dá)水平逐漸升高，心功能Ⅳ級(jí)組與心功能Ⅱ級(jí)組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，余各組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。相關(guān)性分析結(jié)果顯示：血小板 PAC-1與 NT-proBNP 呈正相關(guān)(r=0.204 2，P<0.01)。結(jié)論 心力衰竭患者血小板 PAC-1水平明顯升高，且與NT-proBNP水平呈正相關(guān)，提示血小板 PAC-1為心力衰竭患者血栓形成的因素。

慢性心力衰竭；血小板活化結(jié)合位點(diǎn)-1；N末端腦鈉肽前體

慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)是常見各種心臟疾病的終末階段，在心臟結(jié)構(gòu)和功能改變的基礎(chǔ)上出現(xiàn)心力衰竭癥狀或體征，對(duì)患者造成長(zhǎng)期生理和心理的負(fù)擔(dān)。心力衰竭的主要發(fā)病機(jī)制有心肌結(jié)構(gòu)的病理性重構(gòu)、腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)激活、交感神經(jīng)系統(tǒng)興奮和各種心力衰竭誘導(dǎo)因子分泌增加等。有研究顯示，CHF患者血栓形成的危險(xiǎn)性增加，可能與心力衰竭患者體內(nèi)隨著凝血系統(tǒng)的激活及血小板的活化有關(guān)[1]。血小板活化結(jié)合位點(diǎn)-1(PAC-1)是血小板糖蛋白(glycoprotein，GP)Ⅱb/Ⅲa 受體，血小板未激活時(shí)，PAC-1 與配體結(jié)合力較低，當(dāng)血小板活化以后，PAC-1 在膜上表達(dá)增加，同時(shí)構(gòu)象發(fā)生改變，與纖維蛋白原及其他配體結(jié)合的親和力增加，導(dǎo)致血小板聚集形成血栓[2，3]。N末端腦鈉肽前體(NT-proBNP)是腦鈉肽(BNP)被剪切后形成的片段，比 BNP 半衰期更長(zhǎng)且穩(wěn)定，常用于評(píng)估慢性心力衰竭的嚴(yán)重程度和預(yù)后[4]。本研究通過(guò)測(cè)定CHF患者血小板 PAC-1與 NT-proBNP的表達(dá)水平，分析其相關(guān)性，探討CHF患者血栓形成的易患機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2013 年11月—2015 年2月在我院住院治療的患者62例。對(duì)照組15例，系心臟彩超提示無(wú)心臟結(jié)構(gòu)和功能改變，心功能正常，臨床檢查不符合心力衰竭者。男9例，女6例；年齡65.0歲±10.5歲。CHF 組47例，符合心力衰竭的診斷標(biāo)準(zhǔn)；男29例，女18例；年齡67.0歲±12.2歲；紐約心臟病協(xié)會(huì)(NYHA)心功能分級(jí)：Ⅱ級(jí)16例，Ⅲ級(jí)14例，Ⅳ級(jí)17例；擴(kuò)張型心肌病7例，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病19 例，高血壓性心臟病15 例，其他病因6例。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重貧血，惡性腫瘤，嚴(yán)重肝腎功能不全，腦血管性疾病，應(yīng)用非甾體抗炎藥、類固醇激素及鴉片類藥物，血管栓塞性疾病，支氣管哮喘，意識(shí)障礙患者。兩組年齡、性別構(gòu)成差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 血小板表面PAC-1表達(dá)水平測(cè)定 所有患者空腹采集肘靜脈血抗凝，與 PAC-1-FITC抗體室溫暗處孵育20 min 后，加入固定液，充分混勻，在避光處放置30 min，流式細(xì)胞儀檢測(cè)血小板表面 PAC-1陽(yáng)性的血小板百分率，用CELL Quest 軟件獲取結(jié)果。

1.2.2 血漿NT-proBNP 的測(cè)定 采集肘靜脈血 2 mL，分離血清后生化分析儀測(cè)定NT-proBNP的濃度。

2 結(jié) 果

2.1 對(duì)照組與CHF 組血小板 PAC-1表達(dá)水平的比較 對(duì)照組血小板 PAC-1表達(dá)率(11.3±1.6)%，CHF 組患者血小板 PAC-1的表達(dá)水平隨心功能嚴(yán)重程度而逐漸升高，心功能Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)、Ⅳ級(jí)患者PAC-1表達(dá)水平分別為(19.2±2.1)%、(20.9±2.6)%、(22.2±2.3)%；與對(duì)照組相比，CHF不同心功能分級(jí)組患者血小板 PAC-1表達(dá)率均有顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；心功能 Ⅳ級(jí)組與心功能Ⅱ級(jí)組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，余各組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 CHF患者血小板 PAC-1與 NT-proBNP水平的相關(guān)性 入選CHF患者的NT-proBNP大多分布在1 000 pg/mL～10 000 pg/mL，將3組不同心功能分級(jí)慢性心力衰竭患者的血小板PAC-1與NT-proBNP進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果PAC-1與NT-proBNP呈正相關(guān)(r=0.204 2，P<0.01)。

3 討 論

本研究分析CHF患者血小板PAC-1的表達(dá)水平及其與 NT-proBNP的相關(guān)性，探討CHF患者血栓形成傾向的機(jī)制和臨床意義。慢性心力衰竭是由于心肌損傷引起心肌結(jié)構(gòu)和功能的變化，最終導(dǎo)致心室收縮和(或)舒張功能下降，是大多數(shù)心血管疾病的主要死因，其中心力衰竭相關(guān)的血栓事件是死亡原因之一。

NT-proBNP是反映心力衰竭嚴(yán)重程度的指標(biāo)之一，PRIDE的研究結(jié)果表明NT-proBNP<300 pg/mL可排除心力衰竭，年齡<50歲的受試者NT-proBNP>450 pg/mL以及年齡>50歲的受試者 NT-proBNP>900 pg/mL則提示心力衰竭的可能[5]。心力衰竭常伴有血流動(dòng)力學(xué)異常、組織細(xì)胞缺血缺氧、炎癥反應(yīng)和血管內(nèi)皮損傷，以及各種因子所致的血小板被激活，這些因素構(gòu)成心力衰竭相關(guān)的血栓形成和血栓事件的發(fā)生[6]。

PAC-1由α(GPⅡ b)和β(GPⅢ a)這兩個(gè)亞基以非共價(jià)鍵的方式結(jié)合而成的，屬于整合素家族的異質(zhì)二聚體分子。PAC-1 是反映血小板活化的早期標(biāo)志物，當(dāng)血小板活化以后，PAC-1 的表達(dá)增加，血小板與纖維蛋白原及其他的配體相結(jié)合力增加，相鄰血小板黏附，血小板聚集物形成；同時(shí)活化后的血小板開始釋放α-顆粒、二磷酸腺苷(ADP)、5-羥色胺和致密體等，進(jìn)一步加速血栓形成。國(guó)內(nèi)外臨床研究表明，心力衰竭患者的血液多處于高凝狀態(tài)，血栓事件的發(fā)生率高于心力衰竭患者，且與心力衰竭嚴(yán)重程度相關(guān)[7]；SOLVD研究結(jié)果提示對(duì)于LVEF≤35%的心力衰竭患者中應(yīng)用華法林抗凝，防止血栓形成[8]；但在另外一項(xiàng)研究中，沒有發(fā)現(xiàn)華法林對(duì)心力衰竭患者有益，認(rèn)為對(duì)心力衰竭患者抗血栓治療證據(jù)不足[9]。2009 年美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)和美國(guó)心臟病協(xié)會(huì)心力衰竭診療指南建議抗凝推薦用于心力衰竭且有房顫或血栓栓塞史者，抗血小板治療用于心力衰竭合并冠心臟病者，不主張心力衰竭患者常規(guī)應(yīng)用阿司匹林，因其出血并發(fā)癥使患者貧血而加重心力衰竭[10]。

本研究結(jié)果表明，CHF 組患者血小板 PAC-1比對(duì)照組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，提示慢性心力衰竭患者存在血小板活化；心功能 Ⅱ級(jí)組、Ⅲ 級(jí)組、Ⅳ級(jí)組患者血小板 PAC-1的表達(dá)水平依次升高，且血小板 PAC-1與 NT-proBNP 呈正相關(guān)，提示心力衰竭越重，血小板活化程度越高。許多研究證實(shí)心力衰竭患者血小板活化程度升高，但目前是否應(yīng)用抗血小板、抗凝藥物仍存在爭(zhēng)議，仍然缺乏大型多中心隨機(jī)對(duì)照臨床研究。

總之，CHF患者血小板 PAC-1水平明顯升高，且與NT-proBNP 水平呈正相關(guān)，提示血小板 PAC-1為心力衰竭患者血栓形成的機(jī)制之一。

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(本文編輯 郭懷印)

新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院(烏魯木齊 830000)，E-mail：wishlo@sohu.com

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10．3969/j．issn．1672-1349．2015．14．024

1672-1349(2015)14-1650-03

2015-06-08)