■郭 峰 屠 焰 杜紅芳 陳仁杰 刁其玉

（1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點實驗室，北京 100081；2.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，新疆烏魯木齊 830052；3.廣西武宣金泰豐農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司，廣西武宣 545900）

隨著我國經(jīng)濟迅速發(fā)展，人們生活水平不斷提高，不僅對牛肉的消費量日益增大，而且對牛肉品質(zhì)的要求也在逐漸提高。為了應(yīng)對國民對牛肉的需求不斷增大和市場牛肉供應(yīng)不足情況，我國也采取向國外大量進口牛肉政策，一些養(yǎng)殖場也對奶公犢加以育肥利用來緩解市場需要，我國南方肉牛帶是出產(chǎn)牛肉的重要區(qū)域之一，雖與北方、中原肉牛地區(qū)存在一些差距[1]，但有著光熱雨水適宜、土地成本低廉、牛肉價格較高、粗飼料資源豐富等優(yōu)勢[2]，因此肉牛業(yè)存在巨大的發(fā)展?jié)摿?。犢牛是肉牛產(chǎn)業(yè)的后備力量，其培育的科學(xué)性與后期架子牛的育肥效果有直接關(guān)系，研究表明，在小肉牛早期培育階段日糧蛋白質(zhì)水平是影響牛肉蛋白和脂肪沉積的主要因素，而隨犢牛日漸長大后則對蛋白質(zhì)的沉積影響較小[5]，犢牛日增重隨日糧蛋白質(zhì)水平的降低呈現(xiàn)下降趨勢，25%粗蛋白17%脂肪的代乳品有助于犢牛體重增長[6]，也有研究顯示犢牛斷奶前27%粗蛋白和17%脂肪的代乳品有助于犢牛增重[7]。隨著犢牛的逐漸長大，對營養(yǎng)物質(zhì)的需求也日漸增加，而此時母牛產(chǎn)奶量逐漸降低，同時犢牛的瘤胃發(fā)育還未完善，對固體飼料的利用率較低，可能無法獲得充足的營養(yǎng)來滿足其快速的生長需要，因此適宜營養(yǎng)水平的代乳產(chǎn)品可保證犢牛健康迅速的生長。本試驗研究了不同能量和蛋白質(zhì)水平的代乳品在肉犢牛哺乳期營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率、血清生化指標(biāo)并對健康狀況進行了評估，旨在為肉犢牛早期培育的日糧配制提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗時間、地點及參試動物

試驗于2014年夏季7～9月份在廣西武宣縣金泰豐肉牛擴繁場開展。選取新生、健康德國黃牛與夏南牛雜交犢牛40頭。在犢牛達到21日齡正式進入試驗，按體重一致原則分為4組，每組10頭犢牛，斷母乳，飼喂4種不同營養(yǎng)水平的代乳品，同時開始補飼開食料；35日齡開始讓犢牛自由進食粗飼料；90日齡犢牛斷代乳品試驗結(jié)束。

1.2 試驗設(shè)計及試驗日糧

采用2×2因子設(shè)計。本試驗主要飼喂日糧為代乳品，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所研制，設(shè)立2個消化能水平（16 MJ/kg、14 MJ/kg）和2個粗蛋白水平（25%、22%），配制4種犢牛代乳品。代乳品按犢牛體重1.2%飼喂?fàn)倥＃⑶腋鶕?jù)犢牛體重進行實時調(diào)整。代乳品乳液配制方法：加熱水至沸騰后，冷卻至50℃左右，按代乳品∶水的比例為1∶7稀釋、溶解、混勻，待溫度降至38～39℃時飼喂給犢牛。犢牛開食料由當(dāng)?shù)啬蠈幎纪竽量萍加邢薰旧a(chǎn)，自由采食。場里種植的象草為犢牛粗飼料來源，自由采食。代乳品、開食料及粗飼料的營養(yǎng)水平見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

犢牛出生后盡早吃初乳，隨后測量體尺和稱量體重。20日齡使其與母牛分離，犢牛分欄飼養(yǎng)，每欄10頭犢牛，飼喂不同的代乳品，每日三次（07:00、14:00和17:00），同時讓犢牛自由采食開食料。牛欄設(shè)有犢牛頸夾、水槽并帶有運動場，保證犢牛能曬到太陽。犢牛圈舍每天兩次清理糞便，每7 d一次沖洗牛欄和欄位消毒。

1.4 樣品采集及處理

采集每批次開食料樣品，代乳品與粗飼料每兩周采樣，最后混合樣品，于烘箱中65℃烘干后待測。在21、90 d晨飼前將每頭犢牛單獨稱重。

試驗結(jié)束前犢牛77～85日齡每個處理組選取4頭犢牛進行消化試驗，其中預(yù)試期3 d，正試期4 d。詳細記錄每頭犢牛每日實際排糞量、采食量。采集日糞便總量的10%作為混合樣品，然后每100 g鮮糞加入10%的稀鹽酸10 ml固氮，-20℃冷凍保存，待測。

犢牛85日齡每組隨機選取4頭犢牛晨飼前采用頸靜脈采血方法采集10 ml血液，3 000 r/min離心10 min，分離血清，-20℃冰箱冷凍保存,待測。

表1 代乳品①、開食料及粗飼料的營養(yǎng)水平②(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.5 測定指標(biāo)及方法

測定飼料和糞樣的干物質(zhì)（DM）、粗蛋白質(zhì)（CP）、粗脂肪（EE）、粗灰分（Ash）、鈣（Ca）、磷含量（P）。烘干法測定DM，氧彈式熱量計（PARR 6400）測定GE，凱氏定氮法測定 CP，原子吸收法測定Ca，鉬黃比色法測定P。計算營養(yǎng)物質(zhì)消化率。

每天觀察犢牛糞便情況并進行糞便評分，評分標(biāo)準(zhǔn)[9]見表 2。

表2 糞便評分標(biāo)準(zhǔn)

測定血清中葡萄糖（GLU）、總蛋白（TP）、甘油三脂（TG）、尿素氮（BUN）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT），谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST），胰島素樣生長因子（IGF-1），生長激素（GH）含量。GLU、TP、TG、BUN、CHO、ALT、AST指標(biāo)采用全自動生化分析儀（日立7600生化儀）測定，用放射免疫分析法測定IGF-1、GH含量（檢測儀器：Sn-69513型免疫計數(shù)器）。

1.6 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SAS 9.2統(tǒng)計軟件GLM模型處理分析，結(jié)果差異顯著則用Duncan法進行多重比較，P＜0.05表示結(jié)果差異顯著。

2 結(jié)果及分析

2.1 能量和蛋白水平對犢牛體重的影響（見表3）

由表3可知，90日齡各組體重差異不顯著（P＞0.05），低能低蛋白組犢牛平均日增重在21～90日齡階段顯著小于其它各組（P＜0.05）。

表3 不同能量和粗蛋白水平代乳品對犢牛體重的影響

2.2 犢牛營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率（見表4）

由表4可以看出，飼喂不同能量和粗蛋白水平代乳品的犢牛，其干物質(zhì)、有機物和磷的消化率差異不顯著（P＞0.05）；然而，營養(yǎng)水平對日糧中蛋白質(zhì)、脂肪和鈣的消化率有顯著的影響（P＜0.05），相同能量水平下，高蛋白質(zhì)含量有利于提高這3種物質(zhì)的消化率；相同蛋白質(zhì)水平，高能量水平也提高了它們的消化率。綜合分析，高的能量和蛋白質(zhì)含量可以提高犢牛的營養(yǎng)物質(zhì)消化率。

2.3 犢牛部分血清生化指標(biāo)（見表5）

表4 不同能量和蛋白水平代乳品對犢牛營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響(%)

表5 不同能量、粗蛋白水平代乳品對犢牛部分血清生化指標(biāo)的影響

由表5可看出，飼喂不同能量、蛋白的代乳品，犢牛血清中TP、GLU、TG、ALT、IGF-Ⅰ、GH濃度都無顯著影響（P＞0.05），高能水平隨粗蛋白含量提高AST濃度顯著增大（P＜0.05），低能水平隨蛋白濃度增大BUN濃度顯著增大（P＜0.05）。

2.4 犢牛糞便評分（見表6）

表6 不同能量和粗蛋白水平代乳品對犢牛糞便評分的影響

由表6可知，犢牛在21～35、35～49和49～77日齡階段低能低蛋白組合糞便評分顯著高于其它各組（P＜0.05），77～90日齡各組犢牛糞便評分均呈下降趨勢且各組之間無顯著差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 不同能量和粗蛋白水平代乳品對犢牛營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

能量是維持動物生命活動必要前提，而蛋白質(zhì)則是構(gòu)成動物機體的主要成分。為了滿足動物營養(yǎng)需要而且不造成營養(yǎng)浪費，在滿足能量和蛋白需要量的前提下還要保持日糧的適宜比例，比例失衡會引起營養(yǎng)物質(zhì)利用效率降低。干物質(zhì)和有機物采食及消化不僅可以有效反映胃腸道的結(jié)構(gòu)和機體發(fā)育狀況[10]，而且也是衡量動物生產(chǎn)性能和日糧利用率的綜合指標(biāo)[11]。本試驗中各組間DM和OM表觀消化率差異不顯著，但低能低蛋白組數(shù)值上低于其它各組，說明低能量和低蛋白對動物消化吸收形成了一定障礙，該營養(yǎng)水平下不利于犢牛對日糧營養(yǎng)物質(zhì)的消化。有研究顯示提高日糧能量水平能促進蛋白的消化率[12]。Henry等[13]報道隨日糧蛋白質(zhì)水平升高，未對氮的消化率造成影響，崔祥等[14]研究了能量水平對3～6月齡犢牛營養(yǎng)物質(zhì)消化的影響發(fā)現(xiàn)能量水平不影響粗脂肪和氮的表觀消化率，有資料顯示動物機體內(nèi)的脂肪含量主要與年齡相關(guān),年老動物脂肪沉積比幼齡動物要高[15]。本試驗研究發(fā)現(xiàn)相同能量水平下隨著蛋白含量的提高粗脂肪和鈣的表觀消化率增大，脂肪在動物小腸中可直接被吸收用于氧化供能，所以對脂肪的消化吸收的效率也較高。

3.2 能量和粗蛋白水平代乳品對犢牛部分血清生化指標(biāo)的影響

動物本身血清中各種生化指標(biāo)常處于一種穩(wěn)定的狀態(tài)，然而在某個生理階段營養(yǎng)的來源和濃度不同可能影響物質(zhì)消化和代謝，進一步可導(dǎo)致血清生化指標(biāo)發(fā)生變化。犢牛斷奶前血糖與單胃動物相似，動物采食后幾個小時后葡萄糖以及其它單糖被吸收，大部分進入血液[16]，它是犢牛能量的主要來源，本試驗中血糖濃度在3.50～3.70 mmol/l之間，處于正常范圍之內(nèi)，各組之間也未出現(xiàn)顯著差異，這可能與犢牛隨年齡的增長瘤胃逐漸發(fā)育，機體調(diào)節(jié)能力增強使血糖保持在一定范圍之內(nèi)。

日糧中蛋白質(zhì)和能量如果攝入不足，容易引起血清總蛋白濃度的下降，其水平越高，則蛋白質(zhì)的同化作用越強。血清總蛋白在一定程度也代表了日糧蛋白水平和動物對蛋白質(zhì)的消化利用程度。試驗結(jié)果血清中總蛋白各組之間沒有顯著差異，這可能與各組采食量以及各組犢牛對蛋白質(zhì)消化吸收不同有關(guān)。

幼齡反芻動物瘤胃發(fā)育并未完善，對脂肪的消化利用與成年牛不同，代乳品中含有大量的甘油三酯，犢牛采食代乳品后由于酪蛋白的凝固作用使甘油三酯與不溶的凝塊滯留在皺胃幾個小時后進入十二指腸[17]，隨后由小腸上皮細胞吸收并進行重新酯化[18]。檢測參試犢牛血清甘油三酯含量，能量和蛋白因素對甘油三酯的影響不顯著，其可能是隨犢牛日齡增加，采食代乳品的量也不斷增大，攝取的脂肪的量也隨之遞增，各組采食脂肪的量不同，對脂肪的消化吸收也出現(xiàn)了差異，導(dǎo)致最終吸收的甘油三酯各組間未出現(xiàn)顯著差異。

血清中尿素氮指標(biāo)可反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸平衡狀況[19]，也與動物采食蛋白質(zhì)的量以及對蛋白質(zhì)的利用率有關(guān)系，血清尿素氮濃度較低表明氨基酸平衡較好，機體蛋白質(zhì)合成率較高[20]，當(dāng)動物采食蛋白質(zhì)的量少或者蛋白質(zhì)利用率高時，血清中尿素氮水平都會下降，相反則會升高。也有研究指出提高能量水平，會使蛋白質(zhì)的利用率升高，引起血清中尿素氮的濃度降低[21]。本研究中低能低蛋白組血清尿素氮含量顯著低于其它各組，這與上述研究相符，主要可能是由于低能低蛋白日糧能氮不平衡導(dǎo)致犢牛對蛋白質(zhì)利用率較低，并且日糧蛋白含量較低，采食蛋白量較少，進一步影響血清中尿素氮含量偏低，這也與低能低蛋白組蛋白質(zhì)表觀消化率較低相對應(yīng)。

谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶指標(biāo)主要用來反映心臟和肝臟的功能，主要存在與心肌細胞和肝臟細胞中，當(dāng)心臟或者肝臟受到損傷時血清中濃度會偏高，但其濃度的升高并不具有專一性，出現(xiàn)其它疾病或者注射抗生素等都有可能使其在血清中的含量偏高，不管怎樣血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶濃度的升高可作為動物機體出現(xiàn)異常的表現(xiàn)，李春芳研究發(fā)現(xiàn)提高日糧能量蛋白水平導(dǎo)致牛血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶含量降低[22]，而楊炳壯等研究證明不同能氮比日糧未對斷奶波隆雜交羔羊血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶造成影響[23]，李茂等研究也出現(xiàn)類似結(jié)果[24]。本試驗中高能高蛋白組出現(xiàn)較高趨勢，其它各組見未出現(xiàn)顯著差異，可能高能高蛋白組對犢牛機體造成一些代謝壓力，同時也說明未必能量和蛋白越高對犢牛的生長越有利。

生長激素(GH)有促進動物機體生長、蛋白質(zhì)的合成及增加細胞的體積和數(shù)量等作用，并且能促進肝臟產(chǎn)生胰島素樣生長因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ），IGF-Ⅰ是體內(nèi)重要的促生長、促合成類激素，有促進氨基酸合成蛋白質(zhì)的作用，一般認為GH的生長作用通過IGF-Ⅰ介導(dǎo)的。有資料顯示隨日糧水平升高3～12月齡后備牛血清IGF-Ⅰ有升高趨勢[25]，云強等[20]研究發(fā)現(xiàn)低蛋白水平出現(xiàn)降低趨勢，但有些研究也顯示許多動物生長激素呈陣發(fā)性分泌，導(dǎo)致時間點規(guī)律性較弱。本試驗犢牛血清GH和IGF-Ⅰ在不同能量蛋白組之間沒有顯現(xiàn)出差異，統(tǒng)計數(shù)值隨著能量蛋白的升高略有升高，但高能高蛋白組又出現(xiàn)降低波動，出現(xiàn)這一現(xiàn)象可能與動物神經(jīng)調(diào)節(jié)復(fù)雜性及激素陣發(fā)性分泌有關(guān)，還有待于進一步研究。

3.3 不同能量和粗蛋白水平代乳品對犢牛糞便評分和健康狀況的影響

犢牛在哺乳期消化系統(tǒng)發(fā)育不完全，日糧營養(yǎng)水平以及管理方法對犢牛的健康影響較敏感[26]，日糧營養(yǎng)水平的不合理容易引起犢牛消化吸收紊亂，導(dǎo)致犢牛腹瀉和其它疾病，糞便指數(shù)反映了犢牛腹瀉的嚴(yán)重程度[27]。本試驗21日齡斷母乳并飼喂不同能量蛋白的代乳品，由于斷奶應(yīng)激及犢牛對代乳品適應(yīng)過程，犢牛腹瀉出現(xiàn)了一個先升高后降低的趨勢，在這段時間保證日糧適宜的營養(yǎng)水平有助于動物生長性能的發(fā)揮，犢牛21～77日齡階段低能低蛋白組糞便評分顯著優(yōu)于其它各組，說明該營養(yǎng)水平下犢牛免疫等抗應(yīng)激能力減弱，消化機能減弱，表現(xiàn)為對日糧營養(yǎng)消化率降低，發(fā)生營養(yǎng)性腹瀉的幾率增加；后期各組糞便評分都呈降低趨勢，說明隨著犢牛日齡逐漸增加，消化系統(tǒng)發(fā)育逐漸完善，對飼料利用率也日漸增強，腹瀉也逐漸減少。

4 結(jié)論

4.1 代乳品中不同能量蛋白對干物質(zhì)、有機物和磷表觀消化率影響不大，同一能量水平代乳品隨蛋白含量升高粗脂肪和鈣的表觀消化率增大，22%粗蛋白水平日糧隨能量升高粗蛋白表觀消化率升高；14 MJ/kg消化能和22%蛋白水平代乳品影響犢牛對粗蛋白、粗脂肪和Ca的消化率，不利于犢牛消化吸收營養(yǎng)物質(zhì)。

4.2 犢牛血清中CP、GLU、TG、ALT、IGF-Ⅰ和GH的含量不受代乳品中能量和蛋白水平的影響，相同能量水平隨日糧蛋白升高血清中BUN和AST有升高趨勢。

4.3 不同處理組犢牛腹瀉均發(fā)生在斷母乳前期21～35和35～49日齡階段，14 MJ/kg消化能和22%蛋白水平組糞便評分高于其它各組，此營養(yǎng)水平日糧不能滿足犢牛營養(yǎng)需要，造成動物消化系統(tǒng)出現(xiàn)障礙。