馮志芬，李瑞玲，馮志瑾

（1.河南大學(xué)護(hù)理學(xué)院，河南開(kāi)封475004；2.鶴壁市中心血站，河南鶴壁458030）

微量注射泵添加二甲基亞砜對(duì)冰凍機(jī)采血小板微聚物的效果分析

馮志芬1，李瑞玲1，馮志瑾2

（1.河南大學(xué)護(hù)理學(xué)院，河南開(kāi)封475004；2.鶴壁市中心血站，河南鶴壁458030）

目的通過(guò)手工和微量注射泵兩種方法添加二甲基亞砜（DMSO）并進(jìn)行比較，系統(tǒng)總結(jié)使用微量注射泵降低血小板微聚物發(fā)生的主要成效，為各地成分血的推廣提供參考。方法應(yīng)用美國(guó)Trima血細(xì)胞分離機(jī)采集血小板，對(duì)冰凍血小板制備過(guò)程及整改前后微聚物陽(yáng)性率進(jìn)行比較分析。結(jié)果微量注射泵添加DMSO冰凍單采血小板微聚物陽(yáng)性率明顯下降。說(shuō)明DMSO注入速度和操作規(guī)范狀況對(duì)血小板質(zhì)量影響較大。整改前，微聚物出現(xiàn)陽(yáng)性率為14.77%；整改后，微聚物出現(xiàn)陽(yáng)性率為2.75%。結(jié)論使用微量注射泵添加DMSO能明顯降低血小板微聚物陽(yáng)性率。而加強(qiáng)全程質(zhì)控，嚴(yán)格篩選獻(xiàn)血者、規(guī)范單采血小板的制備、保證冰凍溫度等是降低微聚物發(fā)生的重要方面。

冰凍單采血小板；微聚物；微量注射泵；陽(yáng)性率

機(jī)采血小板具有儲(chǔ)存期長(zhǎng)、使用方便、療效好、副作用少等優(yōu)點(diǎn)，主要適用于血小板計(jì)數(shù)低或功能障礙引起的出血病人的搶救和治療[1]。鶴壁市中心血站自2003年開(kāi)展冰凍單采血小板成分血以來(lái)，臨床應(yīng)用逐年增多。但是，冰凍單采血小板因采集制備過(guò)程比較復(fù)雜，在解凍過(guò)程中出現(xiàn)微聚物的情況屢屢發(fā)生。筆者通過(guò)總結(jié)工作經(jīng)驗(yàn)，得到一些行之有效的整改方法，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

Trima血細(xì)胞分離機(jī)及相應(yīng)耗材，－80℃深低溫冰箱（日本SANYO公司），DK－8A型電熱恒溫水浴箱（揚(yáng)州三發(fā)電子有限公司），WZ－50C2系列微量注射泵（浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)儀器有限公司），二甲基亞砜（DMSO，美國(guó)），血小板震蕩儀（蘇州醫(yī)用儀器廠），一次性注射器（山東威高公司），4號(hào)半一次性靜脈針頭（山東威高公司），一次性加藥件（四川南格爾公司）。

1.2 方法

（1）應(yīng)用美國(guó)Trima血細(xì)胞分離機(jī)進(jìn)行采集。嚴(yán)格按照《獻(xiàn)血者健康檢查標(biāo)準(zhǔn)》進(jìn)行獻(xiàn)血者篩選，年齡18～55歲，進(jìn)行獻(xiàn)血者體重、性別、血型、血細(xì)胞比容（HCT）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）等信息錄入，設(shè)備自動(dòng)計(jì)算并顯示采集雙份或單份。一個(gè)U的血小板總?cè)萘繛?20～250 ml，采后血小板計(jì)數(shù)≥2．5×1011/袋。采血過(guò)程順暢，沒(méi)有沖紅和血小板的凝聚，外觀呈云霧狀。

（2）采集完成后震蕩30～60 min，采用兩種方法嚴(yán)格在百級(jí)凈化間添加DMSO。整改前傳統(tǒng)手工添加DMSO按照5%的終濃度計(jì)算DMSO用量，用注射器抽取DMSO后去掉針頭，連接一次性靜脈針頭，消毒后加入DMSO，速度緩慢而均衡，以1 ml/ min為宜，同時(shí)震蕩儀不斷搖動(dòng)血小板袋，使加入的DMSO迅速擴(kuò)散混勻，避免局部溫度過(guò)高，大量產(chǎn)熱會(huì)損壞血小板。加完后排凈血袋中的氣泡于－80℃深低溫冰箱保存。整改后用微量注射泵添加DMSO：在百級(jí)凈化間用一次性注射器準(zhǔn)確抽取所需DMSO的量，同時(shí)連上加藥件、一次性靜脈針頭，排出注射器內(nèi)的空氣，正確置入注射泵卡座中，加入速度為50 ml/h，將單采血小板置于震蕩儀上，設(shè)置旋轉(zhuǎn)參數(shù)，啟動(dòng)微量注射泵勻速注入DMSO。液體完全加入后，排出血袋內(nèi)空氣，水平置于－80℃深低溫冰箱保存。

（3）于37℃電子恒溫水浴箱內(nèi)解凍，解凍時(shí)固定冰凍血小板，完全浸沒(méi)水中，水平振蕩，5～10 min完全融化。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

對(duì)使用微量注射泵添加DMSO實(shí)施前、后3個(gè)月冰凍血小板解凍時(shí)出現(xiàn)微聚物的陽(yáng)性率進(jìn)行對(duì)比，見(jiàn)表1～3。

表1 整改前冰凍血小板解凍出現(xiàn)微聚物陽(yáng)性率

表2 整改后冰凍血小板解凍出現(xiàn)微聚物陽(yáng)性率

表3 整改前后冰凍血小板解凍出現(xiàn)微聚物陽(yáng)性率對(duì)比

從表3可以看出整改前后陽(yáng)性率分別為14．77%、2．75%，存在顯著性差異（χ2=15．67，P＜0．01）。說(shuō)明整改后效果明顯，有效提高了冰凍血小板的質(zhì)量，降低了冰凍血小板因微聚物而造成的報(bào)廢。

3 討論

劉作斌[2]、馬海峰等[3]等研究報(bào)道：纖維蛋白和血小板的損傷正是冰凍血小板融化后出現(xiàn)析出物的主要原因。筆者應(yīng)用以上兩種方法添加DMSO制備冰凍單采血小板，解凍后對(duì)比效果分析可以說(shuō)明微量注射泵添加DMSO對(duì)減少血小板微聚物有較好效果。微量注射泵能保證DMSO溶液緩慢勻速地添加而使管壁顏色無(wú)變化，從而保證血小板解聚擴(kuò)散界面的溫度控制在40℃以下，避免了血漿蛋白遇熱變性和血小板的熱灼傷，保護(hù)了血小板的功能。同時(shí)這也符合深低溫保存血小板的關(guān)鍵技術(shù)指導(dǎo)原則[4]。傳統(tǒng)的手工添加DMSO受人為因素影響較大，因添加時(shí)間在10～15 min，人工手推DMSO不能保證緩慢而勻速的要求，易造成血袋管壁產(chǎn)熱變白，從而出現(xiàn)微聚物現(xiàn)象，使血液報(bào)廢。其原因是由于DMSO不宜與塑料接觸，加入過(guò)快局部產(chǎn)熱使蛋白變性，且使血小板聚集、激活，影響了血小板的質(zhì)量及功能[5]?？傊?，與傳統(tǒng)手工添加DMSO相比，微量注射泵添加DMSO大大降低了微聚物陽(yáng)性率，且符合血站基本操作規(guī)范，具有推廣價(jià)值。

綜上所述，冰凍單采血小板采集過(guò)程長(zhǎng)，操作復(fù)雜，通過(guò)比較證明添加DMSO的速度尤為重要。但是，血小板微聚物的發(fā)生是綜合因素導(dǎo)致的，需要全程質(zhì)控，包括獻(xiàn)血者的嚴(yán)格篩選、規(guī)范單采血小板的制備、保證冰凍溫度等諸多方面，以避免微聚物的發(fā)生，保證血小板的質(zhì)量。

[1]劉景漢．臨床輸血學(xué)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2011．

[2]劉作斌，徐亦清，張佐云，等．冰凍保護(hù)劑二甲基亞砜的毒副作用及應(yīng)用劑量研究[J]．中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào)，1990，11（1）：31．

[3]馬海峰，孟莉，黃慶香，等．微量注射泵在制備冰凍血小板中的應(yīng)用[J]．2007，20（6）：513．

[4]劉景漢，李茨芬，殷宗健，等．二甲基亞砜冷凍保存血小板[J]．解放軍醫(yī)學(xué)雜志，1989，14（2）：106．

[5]張潔，張偉強(qiáng)，豐炳亮，等．微量注射泵在制備冰凍血小板中的應(yīng)用[J]．中國(guó)輸血雜志，2003，16（3）：190－191．

R472.9

B

1671-1246（2015）05-0107-02

注：本文系河南大學(xué)科研基金項(xiàng)目（2012YBZR017）