張倩+管遠清+李青

摘 要：以薄荷莖段為外植體，研究了4種不同類型培養(yǎng)基（MS、1/2MS、B5、N6）對愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化以及根誘導(dǎo)的影響。結(jié)果表明：1/2MS培養(yǎng)基愈傷組織誘導(dǎo)率最高，為100%，N6培養(yǎng)基愈傷組織的生長量最高；B5培養(yǎng)基芽的誘導(dǎo)率最高，為40%，但1/2MS培養(yǎng)基芽的長勢較好；1/2MS培養(yǎng)基最適合根的誘導(dǎo)，誘導(dǎo)率為82.5%。綜合分析確定薄荷愈傷組織和根系誘導(dǎo)的最適宜培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基，芽分化的最適宜培養(yǎng)基為B5培養(yǎng)基。

關(guān)鍵詞：薄荷；組織培養(yǎng)；培養(yǎng)基；誘導(dǎo)率

中圖分類號：S567.23+5.035.3 文獻標識號：A 文章編號：1001-4942（2014）11-0030-03

薄荷（Mentha canadensis L.）是唇形科多年生宿根性草本植物，味甘辛，性涼，歸肺、肝經(jīng)，具有清利頭目、透疹、殺菌消炎等功效[1]，在我國自古就有藥食兼用的傳統(tǒng)。目前，薄荷已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、食品、化妝品等工業(yè)，具有很高的經(jīng)濟價值。薄荷繁殖方式以扦插、種子和秧苗繁殖為主，存在品種更新緩慢、易感染病毒等缺點。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)可克服薄荷傳統(tǒng)繁殖方式的缺點，已有諸多專家進行了相關(guān)研究[2～6]。本試驗以薄荷的莖段為外植體，研究不同類型培養(yǎng)基（MS、1/2MS、B5、N6）對薄荷愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化以及根誘導(dǎo)的影響，以利于薄荷組織培養(yǎng)中不同誘導(dǎo)目的適宜培養(yǎng)基的篩選。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試品種為葡萄柚薄荷（Mentha suaveolens× piperita），選取無病且生長健壯的葡萄柚薄荷莖段作為外植體，剪去莖段外層大葉片，用洗衣粉水和清水洗凈，濾紙吸干其表面水分備用。

1.2 試驗處理

試驗于2013年4月至2013年11月進行，選取較常用的4種培養(yǎng)基：MS、1/2MS、B5、N6，培養(yǎng)基加瓊脂8 g/L，蔗糖30 g/L。薄荷愈傷組織誘導(dǎo)的試驗處理見表1，薄荷芽和根誘導(dǎo)的試驗處理見表2。

1.3 接種外植體

將薄荷莖段置于干凈燒杯中，先用75%酒精浸泡15 s，無菌水沖洗1～2次，再用 0.1% HgCl2浸泡60 s，無菌水沖洗多次。待濾紙吸干其表面水分后，切取0.5 cm長的莖段，接種到培養(yǎng)基上。

4月19日將薄荷外植體接種于1、2、3、4號培養(yǎng)基內(nèi)，每個處理接種6瓶，每瓶接種5個，共30個外植體。7月9日、10月11日分別將薄荷外植體接種于5、6、7、8號培養(yǎng)基內(nèi)，每個處理接種8瓶，每瓶接種5個，共40個外植體。

1.4 培養(yǎng)條件及觀察

保持干球溫度14.8℃，濕球溫度（25±2）℃；光照強度為1 500～2 000 lx，12 h光暗交替處理。每天觀測外植體分化情況，統(tǒng)計外植體開始萌動的時間，記錄愈傷組織、芽、根的誘導(dǎo)及生長情況，并進行比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織誘導(dǎo)率和生長量的影響

由表3可以看出，4種培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織的誘導(dǎo)率均在90%以上。其中，以1/2MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最高，為100.0%，其次是MS培養(yǎng)基，誘導(dǎo)率為96.7%，N6和B5培養(yǎng)基稍差，誘導(dǎo)率分別為93.3%和90.0%，但1/2MS和MS培養(yǎng)基愈傷組織生長量明顯低于B5和N6培養(yǎng)基。

2.2 不同培養(yǎng)基對薄荷芽誘導(dǎo)率和生長量的影響

由表4可以看出，4種培養(yǎng)基對薄荷芽誘導(dǎo)率的影響差異較大，其中以MS和1/2MS培養(yǎng)基較好，芽誘導(dǎo)率分別為25.0%和27.5%，平均芽重均高于N6和B5培養(yǎng)基。B5培養(yǎng)基芽誘導(dǎo)率雖高于MS和1/2MS培養(yǎng)基，但芽平均重量低于二者。N6培養(yǎng)基芽誘導(dǎo)效果最差。

2.3 不同培養(yǎng)基對薄荷根誘導(dǎo)率的影響

由表5可以看出，4種不同類型培養(yǎng)基中，以1/2MS培養(yǎng)基對根的誘導(dǎo)率最高，為82.5%，其次是MS培養(yǎng)基，根誘導(dǎo)率為60.0%，而N6和B5培養(yǎng)基均未誘導(dǎo)出根。

3 結(jié)論與討論

綜合分析本試驗結(jié)果，4種不同類型培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基對薄荷莖段的誘導(dǎo)效果最好，愈傷組織和根的誘導(dǎo)率最高，分別為100%和82.5%，對芽的誘導(dǎo)率也達27.5%，其次是MS培養(yǎng)基。B5培養(yǎng)基對薄荷芽的誘導(dǎo)率雖高達40%，但未誘導(dǎo)出根，其它指標也低于1/2MS和MS培養(yǎng)基。N6培養(yǎng)基的誘導(dǎo)效果最差。

試驗看出，不同類型培養(yǎng)基對薄荷莖段的誘導(dǎo)效果有較大差異，1/2MS和MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)的各項指標比較均衡，而B5培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織和芽的誘導(dǎo)率較多，雖未誘導(dǎo)出根，但可作為薄荷芽誘導(dǎo)的專用培養(yǎng)基。本試驗是在基本條件一致的情況下，研究了薄荷愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化及根誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基類型，在此基礎(chǔ)上，提高其誘導(dǎo)率的培養(yǎng)基配方，如生長調(diào)節(jié)劑的種類及濃度有待于進一步研究。

參 考 文 獻：

[1] 李辰飛，劉帥. 薄荷的妙用[J].中老年保健，2011（6）：5.

[2] 丁琤，徐衛(wèi)紅. 薄荷脫毒苗的離體培養(yǎng)及快速繁殖[J].上饒師范學(xué)院學(xué)報：自然科學(xué)版，2004，24（6）：69-72.

[3] 李延紅. 薄荷莖段誘導(dǎo)愈傷組織的研究[J].北方園藝，2008（10）：163-165.

[4] 錢森和，厲榮玉，王洲，等. 薄荷離體培養(yǎng)及植株再生的研究[J].作物雜志，2008（6）：41-44.

[5] 李格，呂國華，賈曉鷹，等. 6-BA、NAA及其組合對誘導(dǎo)薄荷莖段分化與增殖的影響[J].石河子大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2004，22（4）：305-308.

[6] 張澤宏，王兵麗，陳巧玲. 薄荷組織和細胞培養(yǎng)的研究進展[J]. 漳州師范學(xué)院學(xué)報：自然科學(xué)版，2013，26（3）：93-95. 山 東 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2014，46（11）：39～42

摘 要：以薄荷莖段為外植體，研究了4種不同類型培養(yǎng)基（MS、1/2MS、B5、N6）對愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化以及根誘導(dǎo)的影響。結(jié)果表明：1/2MS培養(yǎng)基愈傷組織誘導(dǎo)率最高，為100%，N6培養(yǎng)基愈傷組織的生長量最高；B5培養(yǎng)基芽的誘導(dǎo)率最高，為40%，但1/2MS培養(yǎng)基芽的長勢較好；1/2MS培養(yǎng)基最適合根的誘導(dǎo)，誘導(dǎo)率為82.5%。綜合分析確定薄荷愈傷組織和根系誘導(dǎo)的最適宜培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基，芽分化的最適宜培養(yǎng)基為B5培養(yǎng)基。

關(guān)鍵詞：薄荷；組織培養(yǎng)；培養(yǎng)基；誘導(dǎo)率

中圖分類號：S567.23+5.035.3 文獻標識號：A 文章編號：1001-4942（2014）11-0030-03

薄荷（Mentha canadensis L.）是唇形科多年生宿根性草本植物，味甘辛，性涼，歸肺、肝經(jīng)，具有清利頭目、透疹、殺菌消炎等功效[1]，在我國自古就有藥食兼用的傳統(tǒng)。目前，薄荷已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、食品、化妝品等工業(yè)，具有很高的經(jīng)濟價值。薄荷繁殖方式以扦插、種子和秧苗繁殖為主，存在品種更新緩慢、易感染病毒等缺點。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)可克服薄荷傳統(tǒng)繁殖方式的缺點，已有諸多專家進行了相關(guān)研究[2～6]。本試驗以薄荷的莖段為外植體，研究不同類型培養(yǎng)基（MS、1/2MS、B5、N6）對薄荷愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化以及根誘導(dǎo)的影響，以利于薄荷組織培養(yǎng)中不同誘導(dǎo)目的適宜培養(yǎng)基的篩選。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試品種為葡萄柚薄荷（Mentha suaveolens× piperita），選取無病且生長健壯的葡萄柚薄荷莖段作為外植體，剪去莖段外層大葉片，用洗衣粉水和清水洗凈，濾紙吸干其表面水分備用。

1.2 試驗處理

試驗于2013年4月至2013年11月進行，選取較常用的4種培養(yǎng)基：MS、1/2MS、B5、N6，培養(yǎng)基加瓊脂8 g/L，蔗糖30 g/L。薄荷愈傷組織誘導(dǎo)的試驗處理見表1，薄荷芽和根誘導(dǎo)的試驗處理見表2。

1.3 接種外植體

將薄荷莖段置于干凈燒杯中，先用75%酒精浸泡15 s，無菌水沖洗1～2次，再用 0.1% HgCl2浸泡60 s，無菌水沖洗多次。待濾紙吸干其表面水分后，切取0.5 cm長的莖段，接種到培養(yǎng)基上。

4月19日將薄荷外植體接種于1、2、3、4號培養(yǎng)基內(nèi)，每個處理接種6瓶，每瓶接種5個，共30個外植體。7月9日、10月11日分別將薄荷外植體接種于5、6、7、8號培養(yǎng)基內(nèi)，每個處理接種8瓶，每瓶接種5個，共40個外植體。

1.4 培養(yǎng)條件及觀察

保持干球溫度14.8℃，濕球溫度（25±2）℃；光照強度為1 500～2 000 lx，12 h光暗交替處理。每天觀測外植體分化情況，統(tǒng)計外植體開始萌動的時間，記錄愈傷組織、芽、根的誘導(dǎo)及生長情況，并進行比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織誘導(dǎo)率和生長量的影響

由表3可以看出，4種培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織的誘導(dǎo)率均在90%以上。其中，以1/2MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最高，為100.0%，其次是MS培養(yǎng)基，誘導(dǎo)率為96.7%，N6和B5培養(yǎng)基稍差，誘導(dǎo)率分別為93.3%和90.0%，但1/2MS和MS培養(yǎng)基愈傷組織生長量明顯低于B5和N6培養(yǎng)基。

2.2 不同培養(yǎng)基對薄荷芽誘導(dǎo)率和生長量的影響

由表4可以看出，4種培養(yǎng)基對薄荷芽誘導(dǎo)率的影響差異較大，其中以MS和1/2MS培養(yǎng)基較好，芽誘導(dǎo)率分別為25.0%和27.5%，平均芽重均高于N6和B5培養(yǎng)基。B5培養(yǎng)基芽誘導(dǎo)率雖高于MS和1/2MS培養(yǎng)基，但芽平均重量低于二者。N6培養(yǎng)基芽誘導(dǎo)效果最差。

2.3 不同培養(yǎng)基對薄荷根誘導(dǎo)率的影響

由表5可以看出，4種不同類型培養(yǎng)基中，以1/2MS培養(yǎng)基對根的誘導(dǎo)率最高，為82.5%，其次是MS培養(yǎng)基，根誘導(dǎo)率為60.0%，而N6和B5培養(yǎng)基均未誘導(dǎo)出根。

3 結(jié)論與討論

綜合分析本試驗結(jié)果，4種不同類型培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基對薄荷莖段的誘導(dǎo)效果最好，愈傷組織和根的誘導(dǎo)率最高，分別為100%和82.5%，對芽的誘導(dǎo)率也達27.5%，其次是MS培養(yǎng)基。B5培養(yǎng)基對薄荷芽的誘導(dǎo)率雖高達40%，但未誘導(dǎo)出根，其它指標也低于1/2MS和MS培養(yǎng)基。N6培養(yǎng)基的誘導(dǎo)效果最差。

試驗看出，不同類型培養(yǎng)基對薄荷莖段的誘導(dǎo)效果有較大差異，1/2MS和MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)的各項指標比較均衡，而B5培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織和芽的誘導(dǎo)率較多，雖未誘導(dǎo)出根，但可作為薄荷芽誘導(dǎo)的專用培養(yǎng)基。本試驗是在基本條件一致的情況下，研究了薄荷愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化及根誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基類型，在此基礎(chǔ)上，提高其誘導(dǎo)率的培養(yǎng)基配方，如生長調(diào)節(jié)劑的種類及濃度有待于進一步研究。

參 考 文 獻：

[1] 李辰飛，劉帥. 薄荷的妙用[J].中老年保健，2011（6）：5.

[2] 丁琤，徐衛(wèi)紅. 薄荷脫毒苗的離體培養(yǎng)及快速繁殖[J].上饒師范學(xué)院學(xué)報：自然科學(xué)版，2004，24（6）：69-72.

[3] 李延紅. 薄荷莖段誘導(dǎo)愈傷組織的研究[J].北方園藝，2008（10）：163-165.

[4] 錢森和，厲榮玉，王洲，等. 薄荷離體培養(yǎng)及植株再生的研究[J].作物雜志，2008（6）：41-44.

[5] 李格，呂國華，賈曉鷹，等. 6-BA、NAA及其組合對誘導(dǎo)薄荷莖段分化與增殖的影響[J].石河子大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2004，22（4）：305-308.

[6] 張澤宏，王兵麗，陳巧玲. 薄荷組織和細胞培養(yǎng)的研究進展[J]. 漳州師范學(xué)院學(xué)報：自然科學(xué)版，2013，26（3）：93-95. 山 東 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2014，46（11）：39～42

摘 要：以薄荷莖段為外植體，研究了4種不同類型培養(yǎng)基（MS、1/2MS、B5、N6）對愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化以及根誘導(dǎo)的影響。結(jié)果表明：1/2MS培養(yǎng)基愈傷組織誘導(dǎo)率最高，為100%，N6培養(yǎng)基愈傷組織的生長量最高；B5培養(yǎng)基芽的誘導(dǎo)率最高，為40%，但1/2MS培養(yǎng)基芽的長勢較好；1/2MS培養(yǎng)基最適合根的誘導(dǎo)，誘導(dǎo)率為82.5%。綜合分析確定薄荷愈傷組織和根系誘導(dǎo)的最適宜培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基，芽分化的最適宜培養(yǎng)基為B5培養(yǎng)基。

關(guān)鍵詞：薄荷；組織培養(yǎng)；培養(yǎng)基；誘導(dǎo)率

中圖分類號：S567.23+5.035.3 文獻標識號：A 文章編號：1001-4942（2014）11-0030-03

薄荷（Mentha canadensis L.）是唇形科多年生宿根性草本植物，味甘辛，性涼，歸肺、肝經(jīng)，具有清利頭目、透疹、殺菌消炎等功效[1]，在我國自古就有藥食兼用的傳統(tǒng)。目前，薄荷已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、食品、化妝品等工業(yè)，具有很高的經(jīng)濟價值。薄荷繁殖方式以扦插、種子和秧苗繁殖為主，存在品種更新緩慢、易感染病毒等缺點。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)可克服薄荷傳統(tǒng)繁殖方式的缺點，已有諸多專家進行了相關(guān)研究[2～6]。本試驗以薄荷的莖段為外植體，研究不同類型培養(yǎng)基（MS、1/2MS、B5、N6）對薄荷愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化以及根誘導(dǎo)的影響，以利于薄荷組織培養(yǎng)中不同誘導(dǎo)目的適宜培養(yǎng)基的篩選。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試品種為葡萄柚薄荷（Mentha suaveolens× piperita），選取無病且生長健壯的葡萄柚薄荷莖段作為外植體，剪去莖段外層大葉片，用洗衣粉水和清水洗凈，濾紙吸干其表面水分備用。

1.2 試驗處理

試驗于2013年4月至2013年11月進行，選取較常用的4種培養(yǎng)基：MS、1/2MS、B5、N6，培養(yǎng)基加瓊脂8 g/L，蔗糖30 g/L。薄荷愈傷組織誘導(dǎo)的試驗處理見表1，薄荷芽和根誘導(dǎo)的試驗處理見表2。

1.3 接種外植體

將薄荷莖段置于干凈燒杯中，先用75%酒精浸泡15 s，無菌水沖洗1～2次，再用 0.1% HgCl2浸泡60 s，無菌水沖洗多次。待濾紙吸干其表面水分后，切取0.5 cm長的莖段，接種到培養(yǎng)基上。

4月19日將薄荷外植體接種于1、2、3、4號培養(yǎng)基內(nèi)，每個處理接種6瓶，每瓶接種5個，共30個外植體。7月9日、10月11日分別將薄荷外植體接種于5、6、7、8號培養(yǎng)基內(nèi)，每個處理接種8瓶，每瓶接種5個，共40個外植體。

1.4 培養(yǎng)條件及觀察

保持干球溫度14.8℃，濕球溫度（25±2）℃；光照強度為1 500～2 000 lx，12 h光暗交替處理。每天觀測外植體分化情況，統(tǒng)計外植體開始萌動的時間，記錄愈傷組織、芽、根的誘導(dǎo)及生長情況，并進行比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織誘導(dǎo)率和生長量的影響

由表3可以看出，4種培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織的誘導(dǎo)率均在90%以上。其中，以1/2MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最高，為100.0%，其次是MS培養(yǎng)基，誘導(dǎo)率為96.7%，N6和B5培養(yǎng)基稍差，誘導(dǎo)率分別為93.3%和90.0%，但1/2MS和MS培養(yǎng)基愈傷組織生長量明顯低于B5和N6培養(yǎng)基。

2.2 不同培養(yǎng)基對薄荷芽誘導(dǎo)率和生長量的影響

由表4可以看出，4種培養(yǎng)基對薄荷芽誘導(dǎo)率的影響差異較大，其中以MS和1/2MS培養(yǎng)基較好，芽誘導(dǎo)率分別為25.0%和27.5%，平均芽重均高于N6和B5培養(yǎng)基。B5培養(yǎng)基芽誘導(dǎo)率雖高于MS和1/2MS培養(yǎng)基，但芽平均重量低于二者。N6培養(yǎng)基芽誘導(dǎo)效果最差。

2.3 不同培養(yǎng)基對薄荷根誘導(dǎo)率的影響

由表5可以看出，4種不同類型培養(yǎng)基中，以1/2MS培養(yǎng)基對根的誘導(dǎo)率最高，為82.5%，其次是MS培養(yǎng)基，根誘導(dǎo)率為60.0%，而N6和B5培養(yǎng)基均未誘導(dǎo)出根。

3 結(jié)論與討論

綜合分析本試驗結(jié)果，4種不同類型培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基對薄荷莖段的誘導(dǎo)效果最好，愈傷組織和根的誘導(dǎo)率最高，分別為100%和82.5%，對芽的誘導(dǎo)率也達27.5%，其次是MS培養(yǎng)基。B5培養(yǎng)基對薄荷芽的誘導(dǎo)率雖高達40%，但未誘導(dǎo)出根，其它指標也低于1/2MS和MS培養(yǎng)基。N6培養(yǎng)基的誘導(dǎo)效果最差。

試驗看出，不同類型培養(yǎng)基對薄荷莖段的誘導(dǎo)效果有較大差異，1/2MS和MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)的各項指標比較均衡，而B5培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織和芽的誘導(dǎo)率較多，雖未誘導(dǎo)出根，但可作為薄荷芽誘導(dǎo)的專用培養(yǎng)基。本試驗是在基本條件一致的情況下，研究了薄荷愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化及根誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基類型，在此基礎(chǔ)上，提高其誘導(dǎo)率的培養(yǎng)基配方，如生長調(diào)節(jié)劑的種類及濃度有待于進一步研究。

參 考 文 獻：

[1] 李辰飛，劉帥. 薄荷的妙用[J].中老年保健，2011（6）：5.

[2] 丁琤，徐衛(wèi)紅. 薄荷脫毒苗的離體培養(yǎng)及快速繁殖[J].上饒師范學(xué)院學(xué)報：自然科學(xué)版，2004，24（6）：69-72.

[3] 李延紅. 薄荷莖段誘導(dǎo)愈傷組織的研究[J].北方園藝，2008（10）：163-165.

[4] 錢森和，厲榮玉，王洲，等. 薄荷離體培養(yǎng)及植株再生的研究[J].作物雜志，2008（6）：41-44.

[5] 李格，呂國華，賈曉鷹，等. 6-BA、NAA及其組合對誘導(dǎo)薄荷莖段分化與增殖的影響[J].石河子大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2004，22（4）：305-308.

[6] 張澤宏，王兵麗，陳巧玲. 薄荷組織和細胞培養(yǎng)的研究進展[J]. 漳州師范學(xué)院學(xué)報：自然科學(xué)版，2013，26（3）：93-95. 山 東 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2014，46（11）：39～42