吳曉鋒 宋學(xué)山

(云南中醫(yī)學(xué)院 云南昆明 650500)

澤瀉湯加味方在治療高血壓方面具有一定的療效，然而目前報(bào)道中，普遍以臨床療效觀察為主，很少涉及組方配伍的優(yōu)化和調(diào)整，有鑒于此，本文選取造模成功的高血壓模型大鼠54只，通過3因素3水平正交實(shí)驗(yàn)來分析高血壓臨床治療中該方的最佳組方配伍。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥物

藥物主要包括澤瀉、白術(shù)、澤蘭、石菖蒲[1]。

1.2 制備方法

復(fù)方藥物和水一起煎煮，經(jīng)濃縮制成0.81g/mL-1，然后放置在-20℃的冷凍室環(huán)境中，留作備用[2]。

1.3 實(shí)驗(yàn)動物

3周齡Wistar大鼠，體質(zhì)量（57.4±4.6）g，雄性，由天津市山川紅實(shí)驗(yàn)動物科技有限公司提供，合格證號0001811[3]。

1.4 實(shí)驗(yàn)儀器

BP-6動物無創(chuàng)血壓測試儀，由成都泰盟科技有限公司提供。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 造模方法

選取3周齡Wistar雄性大鼠90只，然后使用6%的高鹽飲食予以18周的不間斷自然喂養(yǎng)，且從第8周算起，每周日予以1次血壓達(dá)標(biāo)篩選，即要求SBP＞120mmHg。具體的模型篩選方法如下：對于血壓達(dá)標(biāo)的大鼠，改行為期1周的普通飼料喂養(yǎng)，血壓仍符合標(biāo)準(zhǔn)則屬于造模成功。最終得到54只造模成功可用于實(shí)驗(yàn)的大鼠。結(jié)果顯示，于第14～16周造模能夠獲得更為理想的成模率。

2.2 因素水平確定

對于澤瀉湯加味方，其成人一般用量為：澤瀉21g（因素A）+白術(shù)9g（因素B）+石菖蒲及澤蘭各15g（因素C）。設(shè)計(jì)嚴(yán)格的3因素3水平正交實(shí)驗(yàn)，使用L9（34）正交表法，詳情如下：因素A：21g、25g、17g；因素B：9g、5g、13g；因素C：0g、15g、30g。以上述劑量為參考，設(shè)計(jì)3個不同的劑量水平，同時將動脈血壓下降率當(dāng)作觀察指標(biāo)，從而實(shí)現(xiàn)對澤瀉湯加味方組方配伍關(guān)系的深入研究，并從中選擇出最佳組方配伍。

2.3 分組

基于L9（34）正交設(shè)計(jì)對應(yīng)的實(shí)驗(yàn)序號表，共計(jì)進(jìn)行9次實(shí)驗(yàn)，所以，取造模成功的54只大鼠，基于隨機(jī)原則等分成9組進(jìn)行相應(yīng)實(shí)驗(yàn)，予以4周的不間斷灌胃給藥，1次/d，均按照“16.2g/kg/d”的劑量標(biāo)準(zhǔn)給藥。正交實(shí)驗(yàn)正式開始后，均改用普通飼料進(jìn)行喂養(yǎng)。分別于給藥的前1天及末次給藥后的第2天，對處于自然條件下的大鼠的尾動脈血壓進(jìn)行準(zhǔn)確測定。對用藥前后大鼠的平均動脈壓進(jìn)行計(jì)算，并將平均動脈壓下降率作為評價(jià)指標(biāo)。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS18.0對本研究中相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

4 結(jié)果

澤瀉湯加味方配伍劑量的正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：

注：Yi=(造模后血壓-給藥后血壓）/造模后血壓×100%；Y總（%）：6次重復(fù)實(shí)驗(yàn)收縮壓變化率之和。

由上述數(shù)據(jù)可知，A1B3C3屬于最佳組合。

Ri(極差）值可以反映因素之間的主次關(guān)系。因素A的極差＞因素C的極差＞因素B的極差，由此可知，澤瀉屬于君藥，石菖蒲和澤蘭屬于臣藥，而白術(shù)屬于佐藥。

5 討論

使用澤瀉湯加味方對造模成功后的大鼠進(jìn)行治療發(fā)現(xiàn)，其最佳組方配伍為A1B3C3，和現(xiàn)階段臨床用量比例完全相同，另外，不同組方以及不同劑量條件下澤瀉湯加味方均能夠發(fā)揮一定的利尿作用。提示澤瀉和白術(shù)是發(fā)揮利尿療效的關(guān)鍵成分，特別是澤瀉的利尿效果更加明顯，該方的降壓機(jī)制和其利尿機(jī)制存在一定的內(nèi)在關(guān)系。

[1]陳景彥,范洪亮,張樹峰.澤瀉湯加味方對高鹽致高血壓大鼠腎損害的預(yù)防作用[J].中醫(yī)雜志,2012,03:234-237.

[2]陳景彥,陳炳宏,張樹峰,范洪亮,于海榮,任立群,梅愛敏,景文莉.澤瀉湯加味方對高鹽高血壓大鼠的降壓療效及對腎功能的保護(hù)作用[J].中國老年學(xué)雜志,2012,24:5467-5469.

[3]張萬龍,張樹峰,范洪亮,于海榮,景文莉.澤瀉湯加味方治療高血壓最佳組方配伍的正交實(shí)驗(yàn)研究[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2013,02:128-131+183.