劉銳

(河北省胸科醫(yī)院 河北石家莊 050041)

結(jié)核病是一種由結(jié)核桿菌感染所引起的慢性傳染病,結(jié)核桿菌會(huì)入侵到人類機(jī)體中的各個(gè)器官,對(duì)人體造成了巨大的危害。通常情況下醫(yī)院所采用的臨床診斷方法為結(jié)核菌素試驗(yàn)(TST),但此方法受患者自身的免疫力影響大,故靈敏性和特異性不夠。國(guó)外學(xué)者以結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)(T-SPOT-TB)的方法,具有高靈敏性和特異性的特點(diǎn)。本研究通過比較T-SPOT-TB與TST,探討二者在結(jié)核病診斷中的靈敏性和特異性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

該試驗(yàn)收集了2013年7月-2014年5月的某醫(yī)院的128例疑似結(jié)核病患者,這其中男72例,女56例,平均年齡(45±5.7)歲。肺結(jié)核及肺外結(jié)核疾病的明確診斷根據(jù)其臨床表現(xiàn)、影像學(xué)檢查、組織病理學(xué)和對(duì)抗癆治療反應(yīng)等判斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 檢測(cè)方法

T-SPOP-TB檢測(cè)方法:此試驗(yàn)方法需按照試劑盒中的說明書具體步驟進(jìn)行操作。首先抽取這128例患者的外周靜脈血液5ml,并分離出外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)。在抗體微量板中的4個(gè)小孔里分別注入不同的陽性對(duì)照物,分別是植物血凝素、陰性對(duì)照細(xì)胞培養(yǎng)液、A抗原早期分泌性靶抗原6以及B抗原濾液培養(yǎng)蛋白10。

之后依次向4個(gè)小孔中加入2X105濃度的PBMC,并將其放在37℃條件下的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)等待20小時(shí)。再將PBS溶液進(jìn)行洗脫處理后加入堿性磷酸酶標(biāo)記的抗干擾素抗體,在室內(nèi)常溫條件下孵育處理2個(gè)小時(shí),PBS溶液會(huì)在洗脫處理后顯色,利用PBS溶液終止反應(yīng),會(huì)在細(xì)胞因子分泌處形成斑點(diǎn),通過記錄斑點(diǎn)數(shù)量檢測(cè)出試驗(yàn)結(jié)果[1]。

TST檢測(cè)方法:針對(duì)128例患者提取0.1ml的結(jié)核菌素,并對(duì)患者進(jìn)行前臂尺側(cè)皮內(nèi)試驗(yàn),2-3天內(nèi)可看出試驗(yàn)結(jié)果,結(jié)果表明TST陽性結(jié)果是硬結(jié)直徑≥10毫米。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

本次試驗(yàn)根據(jù)靈敏性、特異性以及假陽性率和假陰性率的數(shù)據(jù)作為結(jié)核病診斷試驗(yàn)的評(píng)價(jià)指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果

表1 T-SPOT-TB試驗(yàn)結(jié)果比較

表2 TST試驗(yàn)結(jié)果比較

數(shù)據(jù)以SPSS13.0軟件分析,采用X2檢驗(yàn),P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)的意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床診斷結(jié)果

128例疑似結(jié)核病患者共確診結(jié)核病85例,其中肺結(jié)核45例。肺外結(jié)核40例。

2.2 T-SPOT-TB試驗(yàn)與最終診斷結(jié)果進(jìn)行比較

詳細(xì)結(jié)果見表1。

2.3 TST試驗(yàn)結(jié)果與最終診斷結(jié)果比較

詳細(xì)結(jié)果見表2。

2.4 兩種方法比較研究

通過這兩種方法的比較研究,T-SPOT-TB試驗(yàn)方法的靈敏度和特異性要優(yōu)于TST方法(P＜0.05),而假陰性率和假陽性率則要明顯低于TST試驗(yàn)方法[2]。

3 討論

T-SPOT-TB試驗(yàn)方法是由西方發(fā)達(dá)國(guó)家傳入到我國(guó)的,經(jīng)過近幾年的鉆研,這項(xiàng)技術(shù)在結(jié)合結(jié)核病的診斷方面被證實(shí)有較高的靈敏性和特異性。在傳統(tǒng)的結(jié)核病診斷方法中,更多的還是采取TST技術(shù),該方法對(duì)診斷活動(dòng)性結(jié)核病以及測(cè)定人類機(jī)體中的細(xì)胞免疫功能具有一定的參考意義,是臨床中十分常見的判斷結(jié)核病十分感染的重要指標(biāo)[3]。根據(jù)我國(guó)的實(shí)際情況來看,大多數(shù)人都接種了卡介苗疫苗,會(huì)導(dǎo)致TST方法中的假陽性率偏高,因此在臨床中作用有限。

而T-SPOT-TB試驗(yàn)方法主要是應(yīng)用了結(jié)核分枝桿菌特異性抗原刺激PBMC的方法來檢測(cè)抗原特異性T淋巴細(xì)胞的反應(yīng)狀況,并且不會(huì)受到卡介苗和人體自身免疫細(xì)胞的影響。

通過試驗(yàn)結(jié)果顯示,T-SPOT-TB試驗(yàn)無論從靈敏性還是特異性上來看,都要明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的TST試驗(yàn),同時(shí),其假陽性率和假陰性率還要比TST方法低。根據(jù)這項(xiàng)結(jié)論可以看出,T-SPOT-TB試驗(yàn)更加適用于結(jié)核病感染的診斷,能夠有效避免誤診的產(chǎn)生,具有十分顯著的意義。

[1]陶臻,曾娟.結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].臨床肺科雜志,2012,(09):1632-1633.

[2]趙靜,蔣彩花,汪運(yùn)山,王海英.抗結(jié)核抗體及結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用[J].中國(guó)防癆雜志,2009,(01):19-21.

[3]周晴,胡必杰,黃聲雷,周春妹,高曉東,蔣文海,王學(xué)理,陰憶青.結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在結(jié)核診斷中的價(jià)值[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2013,(07):1726-1728.