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        HPLC法測定鹽酸美沙酮口服溶液中鹽酸美沙酮的含量

        2014-12-14 06:56:04嚴(yán)明娟錢硯燕
        中外醫(yī)療 2014年3期
        關(guān)鍵詞:美沙酮光度法分光

        嚴(yán)明娟 錢硯燕

        1.云南省藥物依賴防治研究所;2.昆明振華制藥有限公司,云南昆明650000

        鹽酸美沙酮(Methadone hydrochloride)屬于人工合成的二苯甲烷類麻醉性鎮(zhèn)痛藥之一,并且是當(dāng)今許多國家用于戒毒和維持療法的一種有效藥物[1-2]。在當(dāng)前,國內(nèi)對阿片類的成癮者主要采取鹽酸美沙酮口服溶液維持治療的方式。鹽酸美沙酮含量的測定選擇紫外分光光度法是以國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-514)-2003Z 為依據(jù);而2010年版《中國藥典》((二部)規(guī)定采用HPLC法測定鹽酸美沙酮口服溶液中鹽酸美沙酮的含量。各取4個批次比較兩者含量測定結(jié)果,見表1,表2。

        表1 紫外分光光度法測鹽酸美沙酮含量

        表2 HPLC法測鹽酸美沙酮含量

        試驗結(jié)果表明:采用不同的方法測定,并不過大影響鹽酸美沙酮口服溶液中鹽酸美沙酮的含量。但HPLC法較紫外分光光度法卻有著簡單、快速、準(zhǔn)確的優(yōu)勢突出,比較適合推廣,因此建立了HPLC法測定鹽酸美沙酮口服溶液中鹽酸美沙酮的含量,該文結(jié)合該我所紫外分光光度法實踐,對HPLC法測定鹽酸美沙酮口服溶液中鹽酸美沙酮的含量進行回顧分析。

        1 儀器與試劑

        1.1 儀器

        ①紫外分光光度法儀器:紫外分光光度計(TU-1800,北京普析通用儀器有限責(zé)任公司);島津電子分析天平BT25S。②HPLC法儀器:島津C-R4A型數(shù)據(jù)處理機;島津LC-2010A型高效液相色譜儀。

        1.2 試藥

        由中國藥品生物制品檢驗所提供鹽酸美沙酮對照品,符合藥典規(guī)格(含量:100.0%,批號:171243-200602)。

        鹽酸美沙酮口服溶液:經(jīng)云南省藥物依賴防治研究所生產(chǎn),批號(紫外分光光度法):120401、120402、120403、120404、120405、120406、120407、120408、120409、120410;批號(HPLC法):130401、130402、130403、130404、130405、130406、130407、130408、130409、130410。

        規(guī)格為1 mL∶1 mg。優(yōu)級純的甲醇和純化水;別的試劑均為分析純。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 紫外分光光度法測定方法

        測定以國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-514)-2003Z 為依據(jù)進行,在353 nm 波長處測定所取對照品溶液、樣品溶液的吸光度。

        2.2 HPLC法測定方法

        測定以《中國藥典》2010年版(二部) 附錄V A 高效液相色譜譜法為依據(jù)進行。

        色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗。Spherisorb C18 色譜柱 (5×200 mm,大連物化所);流動相:無水甲醇-四氫呋喃-水(24∶16∶60);流速:0.6 mL/min;柱溫:25 ℃;檢測波長:λ=270 nm;用2 mol/L磷酸或氫氧化鈉溶液作為流動相調(diào)節(jié)pH 到6.0;靈敏度:0.02AUFS。定量方法:外標(biāo)峰面積標(biāo)準(zhǔn)曲線法。

        含量測定方法。精密量取鹽酸美沙酮口服溶液10 μL,注入液相色譜儀進行測定,并對色譜圖進行記錄;按外標(biāo)法計算峰面積,經(jīng)10次測定10批樣品,平均含量分別為101.69%,

        100.45 %,104.50%,103.00%,99.00%,97.60%,100.20%,98.73%,100.12%,97.92%;并與國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-514)-2003Z 中紫外分光光度法的測定方法,運用相關(guān)儀器進行對比實驗,同樣測定了10次,其平均結(jié)果分別相應(yīng)為:99.28%,98.56%,98.83%,99.01%和100.45%,100.99%,99.37%,99.19%,99.10%,98.30%。

        線性關(guān)系。把鹽酸美沙酮對照品25 mg 準(zhǔn)確稱取,溶解是加入甲醇后并對其進行稀釋,按照25 mL 定容,進行配置鹽酸美沙酮標(biāo)準(zhǔn)溶液的含量為1 mg/mL。將上述色譜作為分析標(biāo)準(zhǔn),一一分析進標(biāo)準(zhǔn)溶液1、3、5、7、10、12 μl,并做記錄行色譜圖工作,測算各次的峰面積。鹽酸美沙酮含量X 為橫坐標(biāo),峰面積Y 為縱坐標(biāo),做線性回歸分析,鹽酸美沙酮的濃度在10~100 μg/mL 的范圍內(nèi)與其峰面積呈良好線性關(guān)系,線性方程為Y=2.2×102X+4.5×102,相關(guān)系數(shù)r=0.9998(n=6)。

        試驗回收率。先取30 mg 空白基質(zhì),分別按6份精密稱定,再各自放入50 mL 量瓶之中,分別把對照品適量的鹽酸美沙酮精密加入并稱定,并加入流動相溶解讓其含約相當(dāng)于樣品量的80%、100%、120%鹽酸美沙酮的量,測定以含量測定法為依據(jù)行,計算后獲得99.8%的平均回收率,0.85%的RSD。試驗沒有受到空白基質(zhì)及溶劑的干擾,見表3。

        表3 回收率試驗

        精密度試驗。分別先取6份連續(xù)進樣的鹽酸美沙酮對照溶液以及樣品溶液,在同一日內(nèi)完成日內(nèi)差試驗測定,平均為0.57%(n=6);測定日間差試驗在連續(xù)5 d 內(nèi)進行,平均為0.66%(n=6)。

        重復(fù)性試驗。6份溶液樣品做鹽酸美沙酮的連續(xù)測定,10 μL的進樣,0.5%的RSD。

        溶的穩(wěn)定性試驗。在室溫下取對照溶液及樣品溶液放置24 h,接著每隔1 h 進樣10 μL,測定其峰面積,得出對照溶液及樣品品溶液峰面積穩(wěn)定性比較好,1.0%RSD。

        3 討論

        鹽酸美沙酮作為常用的一種麻醉性鎮(zhèn)痛臨床藥物,當(dāng)前已經(jīng)其為被很多國家用于有效進行戒毒和維持療法的一種藥物。屬于二苯基甲烷類的美沙酮,也屬于阿片受體激動劑之一,能在中樞μ 和阿片受體產(chǎn)生激活,同時也能非競爭性拮抗NMDA 受體。對于人體能夠產(chǎn)生包括鎮(zhèn)痛、縮瞳、呼吸抑制、抗利尿等一系列藥理作用效應(yīng)的美沙酮。所組成的由左旋和右旋異構(gòu)體混合的消旋體基本都是臨床所用的美沙酮。左旋體幾乎成為其鎮(zhèn)痛作用的主要來源,而阿片受體則主要對中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生作用。在美沙酮與μ 受體的兩者之間的親和力極強。

        在研究結(jié)果中,筆者還發(fā)現(xiàn),美沙酮這一受體拮抗劑是屬于非競爭性的,通過拮抗NMDA 受體還可以產(chǎn)生一種鎮(zhèn)痛效果??诜}酸美沙酮后能完全吸收,有著比較大的脂溶性,能高度結(jié)合血漿蛋白(85%),也能很好的與α 酸性糖蛋白融合,遍布于體內(nèi),特別是肝、脾臟、肺和腎等部位。利用度高的生物(90%),與3倍的嗎啡的大體相當(dāng)[3]。血藥濃度峰值由于胃腸道給藥3 h 而達到,其能能維持2~6 h 的血峰濃度。15 h 的t1/2,經(jīng)過口服后鎮(zhèn)痛作用能有效發(fā)揮,并能發(fā)揮24~32 h 的抑制戒斷癥狀作用。0.48~0.86 mg/L 為治療的血液質(zhì)量濃度,2 mg/L 為中毒的血液質(zhì)量濃度,致死血液有著>4 mg/L 的質(zhì)量濃度[4-5]。在肝臟進行代謝活動,其中藥量沒發(fā)生變化的比服入量要少于0%可以從尿中和大便中排出來。選用甲醇-水系統(tǒng)作為流動相來進行鹽酸美沙酮口服液中鹽酸美沙酮含量的測定,對于色譜柱的使用壽命的延長有利,實驗經(jīng)費也可節(jié)約,從pH值在5.0~7.0 穩(wěn)定來考慮,因而調(diào)節(jié)pH值為6.0。

        按國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-514)-2003Z 中紫外分光光度法進行鹽酸美沙酮含量的測定,存在一定的不足?!吨袊幍洹?010年版(二部)采用HPLC法測定鹽酸美沙酮的含量。在該研究中用HPLC法對鹽酸美沙酮口服溶液中的鹽酸美沙酮的含量進行測定,其結(jié)果證明這一方法建起的HPLC法不僅非常準(zhǔn)確靈敏、操作不復(fù)雜,而且有著很高的回收率,是比較好的質(zhì)量控制鹽酸美沙酮口服液的方法。

        [1]肖國椿,肖李莉,賴朝東,等.美沙酮與丁丙諾啡聯(lián)合梯度治療1028例海洛因依賴者的臨床療效分析[J].贛南醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2001(21):136.

        [2]何艷,趙幸福,楊荷葉.美沙酮與丁丙諾啡治療海洛因依賴的對照研究[J].健康心理醫(yī)學(xué)雜志,2001(9):295.

        [3]林彩,代青,劉松青,等.高效液相色譜法測定人血漿中鹽酸美沙酮濃度[J].中國藥物依賴性雜志,2003,12(2):126.

        [4]王文甫.關(guān)于鹽酸美沙酮維持治療應(yīng)考慮的幾個問題[J].中國藥物濫用防治雜志,2004(4):244.

        [5]徐本樹,率銀良,王志強,等.鹽酸美沙酮維持治療臨床療效觀察[J].中國藥物濫用防治雜志,2005(2):72.

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