李勝發(fā)，白垚（重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科 400016）

血常規(guī)檢驗(yàn)，對(duì)人體健康評(píng)估、保健預(yù)防、疾病診斷治療有其重要的參考依據(jù)。血常規(guī)檢驗(yàn)由最初手工分析2～3個(gè)項(xiàng)目，發(fā)展到血細(xì)胞分析儀的自動(dòng)化檢測(cè)，大大提高了血常規(guī)檢測(cè)效率，同一份標(biāo)本，也會(huì)報(bào)告出數(shù)十個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目，為報(bào)告使用者提供更多、更細(xì)致的參考依據(jù)。如何監(jiān)管自動(dòng)化血細(xì)胞分析儀的分析過(guò)程和分析質(zhì)量，室內(nèi)質(zhì)控具有非常重要的監(jiān)控作用。但是，室內(nèi)質(zhì)控圖還需要人為判斷儀器運(yùn)行的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確度。如何解讀室內(nèi)質(zhì)控圖，就必須了解室內(nèi)質(zhì)控構(gòu)成的要素，包括儀器、試劑、質(zhì)控品、操作手冊(cè)等。目前所用的血常規(guī)質(zhì)控品基本上都是較短有效期的全血標(biāo)本，廠家生產(chǎn)質(zhì)控品時(shí)，為了保證質(zhì)控品有足夠的質(zhì)量穩(wěn)定時(shí)間，就必須對(duì)全血標(biāo)本進(jìn)行防腐、細(xì)胞固定等處理?？紤]到血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理，血常規(guī)質(zhì)控品的細(xì)胞成分只能半固定，所以血常規(guī)質(zhì)控品的細(xì)胞成分隨著儲(chǔ)藏時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞成分的質(zhì)量可能會(huì)發(fā)生一些變化，表現(xiàn)在室內(nèi)質(zhì)控圖上，可能會(huì)被誤認(rèn)為是儀器的準(zhǔn)確度發(fā)生了趨勢(shì)性漂移。本文就對(duì)血常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控圖中平均紅細(xì)胞體積（MCV）的變化趨勢(shì)作一個(gè)合理的分析。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 Sysmex XE－5000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、原裝配套試劑、校準(zhǔn)品（SCS－1000）、中低兩水平質(zhì)控品。

1.2 方法

1.2.1 儀器準(zhǔn)備儀器功能驗(yàn)證由工程師進(jìn)行，包括光源強(qiáng)度、水路、氣路、電源及機(jī)械運(yùn)動(dòng)部分的可重復(fù)性。

1.2.2 儀器性能驗(yàn)證完全按照《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)－臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求（WS／T 406－2012）》執(zhí)行。

1.2.3 儀器項(xiàng)目校準(zhǔn)按照《血細(xì)胞分析的校準(zhǔn)指南（WS／T 347－2011）》完成。

1.2.4 正確度保證溯源校準(zhǔn)及驗(yàn)證、參加衛(wèi)生和計(jì)劃省委委員會(huì)臨檢中心開(kāi)展的血細(xì)胞分析正確度驗(yàn)證［1］。

1.2.5 準(zhǔn)確度保證室內(nèi)質(zhì)控、衛(wèi)生和計(jì)劃省委委員會(huì)臨檢中心室間質(zhì)評(píng)、Sysmex公司的在線質(zhì)控［1］。

1.2.6 確定室內(nèi)質(zhì)控圖（L－J）的中心線和標(biāo)準(zhǔn)差本室所用血常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控品由Sysmex提供配套的全血質(zhì)控品，有效期較短，因此應(yīng)按照穩(wěn)定性較短的質(zhì)控品方法設(shè)定中性線（均值）和標(biāo)準(zhǔn)差。根據(jù)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版規(guī)定方法創(chuàng)建本室室內(nèi)質(zhì)控圖（L－J）的中心線和標(biāo)準(zhǔn)差［1］。

1.2.7 室內(nèi)質(zhì)控方法運(yùn)用質(zhì)控品監(jiān)測(cè)室內(nèi)質(zhì)控的方式屬于分析中質(zhì)控［2］，每天標(biāo)本分析前，執(zhí)行中低兩水平質(zhì)控品（echeck）監(jiān)測(cè)儀器運(yùn)行狀態(tài)，儀器自動(dòng)將質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)傳入實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)（LIS）系統(tǒng)的質(zhì)控通道，只有室內(nèi)質(zhì)控在控后方可檢測(cè)臨床標(biāo)本。室內(nèi)質(zhì)控時(shí)，應(yīng)盡量與質(zhì)控品定值時(shí)的條件一致，包括開(kāi)機(jī)后儀器預(yù)熱程度，監(jiān)測(cè)時(shí)間段，質(zhì)控品混勻方法等。

2 結(jié)果

2.1 Sysmex XE－5000全血細(xì)胞分析儀2013年3月1日至4月25日中低兩水平質(zhì)控品監(jiān)測(cè)43d的MCV 室內(nèi)質(zhì)控（L－J），見(jiàn)圖1。圖1顯示Sysmex XE－5000全血細(xì)胞分析儀的MCV有升高趨勢(shì)，儀器性能可能發(fā)生漂移。

圖1 Sysmex XE－5000 MCV 室內(nèi)質(zhì)控圖（L－J）

2.2 查看Sysmex公司的在線質(zhì)控系統(tǒng)（SNCS），該分析儀在SNCS系統(tǒng)的精密度指數(shù)（SDI）圖中沒(méi)有漂移趨勢(shì)，說(shuō)明參加Sysmex公司在線質(zhì)控系統(tǒng)的約500臺(tái)血細(xì)胞分析儀的室內(nèi)質(zhì)控MCV 項(xiàng)目，隨著質(zhì)控品有效期臨近，均有升高趨勢(shì)。

2.3 該血細(xì)胞分析儀2013年4月28日?qǐng)?zhí)行衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)臨檢中心全血細(xì)胞分析2013年第1次室間質(zhì)評(píng)物檢測(cè)，回報(bào)結(jié)果成績(jī)優(yōu)良，MCV 沒(méi)有系統(tǒng)偏倚。

3 討論

正確開(kāi)展室內(nèi)質(zhì)控分析是對(duì)每批臨床標(biāo)本準(zhǔn)確度的重要保證［3－5］，失控規(guī)則的正確判斷能有效減少假失控率，降低檢測(cè)成本。現(xiàn)在市售血常規(guī)質(zhì)控品基本都是較短有效期的全血樣品，它是在全血樣品中加入適量的防腐劑和細(xì)胞固定劑?？紤]到目前血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理，某些項(xiàng)目需要將細(xì)胞破壞，檢測(cè)其內(nèi)容物，如血紅蛋白測(cè)定，表面活性劑月桂酸鈉破壞紅細(xì)胞后，將紅細(xì)胞內(nèi)容物轉(zhuǎn)化成十六烷基磺酸鈉血紅蛋白，使其與氰化高鐵血紅蛋白相似最大吸收峰的衍生物時(shí)，采用比色法測(cè)定，這就要求紅細(xì)胞不能完全固定，否則，血紅蛋白溶血?jiǎng)┚筒荒芷茐募t細(xì)胞。有些項(xiàng)目如白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類，不但需要保持細(xì)胞完整，以及細(xì)胞體積大小基本不變，而且還要保證白細(xì)胞膜具有合適的通透性，使某些化學(xué)物質(zhì)如核酸熒光染料，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，結(jié)合于細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的細(xì)胞核染色質(zhì)，血細(xì)胞分析儀檢測(cè)時(shí)，高能量激光才能使白細(xì)胞核染色質(zhì)結(jié)合的熒光染料變成可以檢測(cè)的熒光含量，從而進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類。因此，全血質(zhì)控樣品只能加入適量的固定劑，既要考慮全血樣品的保存周期，又要保證全血樣品中的細(xì)胞成分具有合適的活性。因此血常規(guī)質(zhì)控品，只能是半固定全血樣品，所以血細(xì)胞質(zhì)控品的保存時(shí)間不長(zhǎng)，有效期較短。本文看到的室內(nèi)質(zhì)控MCV 項(xiàng)目，隨著質(zhì)控品有效期臨近，呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，其原因可能是紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)細(xì)胞固定劑的作用后，固定時(shí)間越長(zhǎng)（離有效期越近），紅細(xì)胞膜越硬，剛性指數(shù)增高，不易變形，其體積就有逐漸增大的趨勢(shì)［6－7］。

但開(kāi)瓶后的質(zhì)控樣品，不斷與空氣接觸，細(xì)胞膜呼吸增加，剛性指數(shù)下降，細(xì)胞柔變性增大，受稀釋液整理能力增強(qiáng)。同時(shí)，隨著開(kāi)瓶次數(shù)增多，紅細(xì)胞內(nèi)水分逐漸丟失，其體積就會(huì)逐漸變小，因此質(zhì)控圖上可以看到，MCV 從某一天突然增高，后又逐漸降下來(lái)，這就是，一瓶質(zhì)控品從開(kāi)瓶第1次使用到該瓶用完最后1次的整個(gè)表現(xiàn)過(guò)程。根據(jù)上述原因，結(jié)合有關(guān)正確度和準(zhǔn)確度評(píng)判方法，判定全血細(xì)胞分析儀Sysmex XE－5000室內(nèi)質(zhì)控項(xiàng)目MCV 出現(xiàn)升高趨勢(shì)，并非儀器的正確度發(fā)生漂移，而是質(zhì)控品本身質(zhì)量的正常漂移所致。

［1］葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006.

［2］張莉萍，任國(guó)勝.建立醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系搭建學(xué)科建設(shè)基礎(chǔ)平臺(tái)［J］.重慶醫(yī)學(xué)，2009，38（19）：2393－2394.

［3］李勝發(fā)，徐華建，張莉萍.多個(gè)血細(xì)胞分析系統(tǒng)準(zhǔn)確性和可比性的方法保證分析［J］.重慶醫(yī)學(xué)，2009，38（19）：2416－2420.

［4］鐘堃，張傳寶，王薇，等.多種統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室間定量檢測(cè)結(jié)果的比對(duì)研究［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，2012，30（9）：697－699.

［5］呂京.常規(guī)臨床檢驗(yàn)結(jié)果不確定度的若干問(wèn)題［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，2011，29（5）：322－323.

［6］秦琴，汪懷周，胡志德，等.紅細(xì)胞體積分布寬度異質(zhì)性參數(shù)預(yù)測(cè)急性心肌梗死患者近期預(yù)后的價(jià)值［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，2012，30（7）：515－517.

［7］牛華，王天朝，謝穎夫，等.室內(nèi)質(zhì)控實(shí)時(shí)在線監(jiān)控方案的設(shè)計(jì)和實(shí)施［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，2011，29（7）：490－491.