張文輝（徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院呼吸科，江蘇徐州 221002）

肺癌尤其是周圍型肺癌的早期診斷仍較為困難，影像學(xué)不能確診，痰細(xì)胞學(xué)檢查涂片陽性率低，明確診斷往往需要經(jīng)皮肺活檢及纖支鏡肺活檢等有創(chuàng)檢查。纖維支氣管鏡刷片細(xì)胞學(xué)檢查（纖支鏡刷檢）已成為臨床診斷肺癌的重要手段，具有重要的臨床價值。薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查系統(tǒng)（LCT）在婦科腫瘤的篩查和診斷方面已得到成功應(yīng)用，但在其他領(lǐng)域如纖支鏡刷檢細(xì)胞學(xué)檢測等方面應(yīng)用并不多。本研究選取本院行纖支鏡刷檢的患者，對其刷片標(biāo)本同時行薄層液基細(xì)胞學(xué)涂片與傳統(tǒng)涂片法（CS）細(xì)胞學(xué)診斷，比較分析兩種方法的檢測結(jié)果，探討LCT 檢測技術(shù)對肺癌的應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2010年1月至2012年10月于本院行纖支鏡刷檢的肺癌患者132例，其中男89例，女43例；年齡28～79歲，平均（51.6±11.2）歲；所選患者胸部影像學(xué)檢查均有異常，通過纖支鏡或手術(shù)等明確診斷為肺癌；全組患者有不同程度的胸悶氣喘、胸痛、咳嗽、咯血、發(fā)熱等癥狀。電子計算機斷層掃描（CT）或X 線片顯示肺野密度增高結(jié)節(jié)狀影、塊狀影、肺不張等，其中中央型83例，周圍型49例?；颊呃w支鏡刷檢標(biāo)本同時送LCT 和CS細(xì)胞學(xué)檢測。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集與處理采用一次性細(xì)胞刷進(jìn)行黏膜刷片，將毛刷在可疑病變活檢部位刷檢，常規(guī)涂片2張。再將剩余部分連同刷頭一起立即置入抗凝液（每100毫升加入10 mL 3.8%枸櫞酸鈉）中輕微攪拌，獲取足夠多的病變區(qū)細(xì)胞后將其移于試管內(nèi)離心（1500r／min，10min），棄上清液，取沉淀物加入30mL液基保存液經(jīng)TCT 電腦程序化處理制成直徑20 mm 液基薄片。蘇木精－伊紅（HE）染色后封固，由細(xì)胞病理醫(yī)師雙盲閱片診斷。保存液可用于免疫組化及其他特殊檢查。

1.2.2 腫瘤細(xì)胞診斷檢查結(jié)果分為惡性腫瘤細(xì)胞、癌疑細(xì)胞、未見惡性細(xì)胞；陽性結(jié)果包括惡性腫瘤細(xì)胞和癌疑細(xì)胞，未見惡性細(xì)胞為陰性結(jié)果。結(jié)果由同一病理專家組診斷。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理采用SPPS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析；計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗；以α＝0.05為檢驗水準(zhǔn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肺癌發(fā)生部位纖支鏡發(fā)現(xiàn)以病變區(qū)管腔狹窄、黏膜浸潤性增厚、充血、水腫等為間接征象的患者36例，其中右下葉14例、右上葉7例、右中葉9例，左上葉6例。纖支鏡可直視結(jié)節(jié)樣、息肉樣、菜花樣腫塊等直接征象的患者96例，其中右上葉21例、右中葉23例、右下葉19例，左上葉19例、左下葉14例。

2.2 CS與LCT 檢測結(jié)果比較 LCT 檢測確診癌88例，可疑癌例5例，檢測陽性率70.5%；傳統(tǒng)直接涂片細(xì)胞學(xué)檢測確診癌56例，可疑癌12例，檢測陽性率51.5%；兩種方法檢測陽性率比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 CS與LCT 技術(shù)檢測診斷結(jié)果比較［n（%）］

2.3 LCT 檢測結(jié)果與組織病理結(jié)果比較本組實驗LCT 細(xì)胞類型不明確者達(dá)45例，占51.1%，與組織病理學(xué)類型符合率為51.8%（43／83）。有5例LCT 檢測到癌細(xì)胞，纖支鏡活檢病理組織學(xué)示慢性炎癥，有2例手術(shù)證實為肺癌。見表2。

表2 LCT 檢測法和組織病理學(xué)類型診斷比較［n（%）］

3 討論

近年來肺癌的發(fā)病率和病死率躍居全球惡性腫瘤的首位，5年生存率在14%左右［1］。由于肺癌早期癥狀不明顯，且一旦確診，大部分患者已屬中晚期。因此，早期診斷、早期治療是提高肺癌患者生存率的關(guān)鍵。纖支鏡下黏膜細(xì)胞病理學(xué)檢查在肺癌的診斷中占有極其重要的地位。目前普遍應(yīng)用于腫瘤臨床診斷的CS，由于受到標(biāo)本質(zhì)量、制片染色技術(shù)及讀片人員經(jīng)驗等多方面的限制，細(xì)胞學(xué)的靈敏性較低。LCT 是20世紀(jì)90年代發(fā)展起來，由計算機控制的自動化程度很高的細(xì)胞學(xué)涂片制作新技術(shù)，在制片和可靠性方面有很大的優(yōu)勢。CS的缺點主要是涂片過程中要拋棄大部分的樣本細(xì)胞，且玻片上有大量血細(xì)胞與黏液等雜質(zhì)干擾對腫瘤細(xì)胞觀察。與之相比，LCT技術(shù)優(yōu)勢表現(xiàn)在以下幾個方面：（1）固定及時，涂片滿意度高，涂片內(nèi)細(xì)胞分布均勻，形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰，能最大程度發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞；（2）幾乎保留了采集到的所有細(xì)胞，符合不丟棄任何所取材料的原則，并自動消除非上皮細(xì)胞成分對診斷的影響［2］；（3）可重復(fù)制片，為后續(xù)特染、免疫酶標(biāo)、細(xì)胞塊技術(shù)、基因檢測的應(yīng)用提供可能。

本研究對肺癌患者支氣管鏡刷檢標(biāo)本的LCT 技術(shù)與CS結(jié)果進(jìn)行比較，LCT 陽性檢出率稍高于文獻(xiàn)［3－4］報道，與國外Fan等［5］有關(guān)報道相似，明顯優(yōu)于CS。只有1例CS檢查到癌疑細(xì)胞，LCT 示陰性，活檢病理結(jié)果顯示鱗癌?？紤]原因為送檢細(xì)胞成分少，先涂片后送LCT 檢測，導(dǎo)致檢出結(jié)果受影響。并且LCT 制片只取了一部分標(biāo)本，不能完全反映全部標(biāo)本。

兩種細(xì)胞學(xué)檢測技術(shù)對癌的確診率和檢出可疑癌所占比例比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。LCT 技術(shù)比CS對癌的確診率更高，并且降低了可疑癌的診斷率，可為臨床提供更為可靠的確診依據(jù)。LCT 技術(shù)的高陽性率除了與技術(shù)本身優(yōu)勢相關(guān)，與標(biāo)本處理方法不同亦有關(guān)，具體如下：（1）CS將毛刷直接涂片檢查，無法將所有細(xì)胞均勻涂布在玻片上，該過程難以避免脫落細(xì)胞發(fā)生形態(tài)變化，而LCT 直接將毛刷置入盛有專用固定液的標(biāo)本瓶中，從而最大限度地采集到新鮮脫落細(xì)胞；（2）CS涂片后直接在顯微鏡下檢查，而LCT 將標(biāo)本放入薄層液基細(xì)胞處理器中，首先對標(biāo)本輕微振蕩，使成團(tuán)的細(xì)胞離散、黏液溶解，然后通負(fù)壓吸引標(biāo)本處理液通過半濾膜，濾去血細(xì)胞和細(xì)胞碎片而在玻片上僅留下待檢細(xì)胞，最后洗脫留下的待檢細(xì)胞，均勻涂于玻片上。

本試驗中LCT 對肺癌確診率高，但類型不明確者比例較高，與病理組織類型符合率為51.8%。細(xì)胞類型以鱗癌最多，其次為小細(xì)胞肺癌，腺癌最少，與Fan等［5］及國內(nèi)報道的多以小細(xì)胞肺癌為主不相符。聯(lián)合LCT 檢測可提高肺癌的檢出率和確診率，是纖支鏡檢的有益補充［6］。但CS價格低廉、方法簡單、出結(jié)果快，而LCT 檢測費用高，且因標(biāo)本需要特殊處理，出結(jié)果慢，所以CS依然具有其可選擇性。因此，CS與LCT 檢測兩者聯(lián)用，可在某些方面互補不足，提高應(yīng)用效果。

綜上所述，LCT 技術(shù)對提高腫瘤細(xì)胞學(xué)診斷的敏感性和特異性有明顯優(yōu)勢，結(jié)果的可靠性和可比性大幅提高，較CS更適于進(jìn)行免疫組化、聚合酶鏈反應(yīng)分析和多種實驗性研究，為肺癌細(xì)胞學(xué)診斷提供了更廣闊的視野，也為肺癌早期診斷這一難題提供了可靠的解決途徑。

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［4］梁偉強，喻延，吳澤龍.支氣管鏡刷檢薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查在肺癌診斷中的臨床價值［J］.現(xiàn)代診斷與治療，2012，23（8）：1127－1128.

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