廖君群，楊清秀，畢小云（.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗科，重慶 40006；.重慶醫(yī)科大學(xué)，重慶 40006）

多發(fā)性骨髓瘤（MM）是一種骨髓漿細(xì)胞惡性增殖性疾病，又稱骨髓瘤、漿細(xì)胞骨髓瘤或Kahler病，它的特征是單克隆漿細(xì)胞惡性增殖并分泌大量單克隆免疫球蛋白（Ig），以中老年人發(fā)病為主。中國MM年發(fā)病率約為1／10萬，占所有惡性腫瘤的1%，在惡性血液系統(tǒng)疾病中占10%左右，而目前隨著人口老齡化以及檢測技術(shù)的不斷提高，MM 的發(fā)病率不斷增加［1］。由于該病起病隱匿，臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，常伴貧血、骨折、感染、腎功能不全等癥狀，極易漏診或誤診，以致許多患者錯過最佳治療時期。因此，對MM 的早期診斷和鑒別顯得極其重要。免疫固定電泳（IFE）具有周期短、敏感性高、特異性強(qiáng)和分辨率高的優(yōu)點，主要用于M 蛋白的鑒定以明確診斷MM。本文收集本院2011年4月至2012年10月經(jīng)IFE 檢測的患者標(biāo)本，分析其電泳特征，旨在探討其在MM 臨床診斷、鑒別診斷及分型中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2011年4月至2012年10月本院經(jīng)IFE檢測的患者155例，年齡19～90歲，平均60.8歲。所有病例均經(jīng)臨床確診，其中MM 患者73人，均符合臨床MM 診斷標(biāo)準(zhǔn)。MM 患者中男41例（56.16%），女32例（43.84%）；年齡42～78歲，平均59.7歲。73例MM 患者中，IFE 檢測陽性51例。

1.2 儀器與試劑儀器為法國Sebia公司生產(chǎn)的Hydarsys 2瓊脂糖凝膠電泳儀；試劑為法國Sebia公司生產(chǎn)的Hydarsys 2瓊脂糖凝膠電泳儀配套試劑。

1.3 方法采集空腹（8～12h）靜脈血4mL，3000r／min離心5～10min。采用IFE的方法（包括瓊脂糖凝膠蛋白電泳和免疫沉淀兩個過程），對患者血清的M 蛋白進(jìn)行分型，即先對血清蛋白進(jìn)行電泳分離，然后應(yīng)用固定劑和各型Ig及其輕鏈的抗血清，加入凝膠道，與對應(yīng)抗原結(jié)合，從而對各類Ig及其輕鏈進(jìn)行分型。具體方法：（1）取患者血清用A、B稀釋液分別按1∶2（血清30μL＋稀釋液60μL）、1∶5（血清20μL＋稀釋液100μL）倍稀釋，其中A 液用于血清和IgA、IgM、κ、λ，B 液用于IgG；（2）稀釋后點樣10μL（1、8、15號位不加，3、10號位加B液，其余各孔加A 液）；（3）加抗血清（ELP加固定液8μL，其余各孔加8μL抗血清，依次為IgG、IgA、IgM、κ、λ；（4）吸液、烘干；（5）染色、脫色、烘干；（6）掃描并觀察結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理所有數(shù)據(jù)應(yīng)用Microsoft Excel 2003版進(jìn)行處理。

2 結(jié)果

2.1 血清IFE結(jié)果155例患者的血清IFE 檢測結(jié)果中，67例陽性，其中MM 51例。電泳陽性結(jié)果及免疫分型結(jié)果見表1、2，由表1可得出IFE對MM 診斷的靈敏度和特異度分別為69.9%，80.5%。

表1 155例患者血清IFE四格表分析結(jié)果

表2 51例MM 患者血清IFE分型結(jié)果［n（%）］

2.2 相關(guān)實驗室檢查結(jié)果73例MM 患者相關(guān)實驗室檢查結(jié)果見表3。

表3 73例MM 患者相關(guān)實驗室檢查結(jié)果

表4 42例IFE陽性患者初診斷及入住科室分布

2.3 51例IFE陽性MM 患者初診斷及入院科室情況對51例IFE陽性MM 患者病例資料的進(jìn)行回顧性分析，由于這51例IFE陽性的MM 患者中，有9例患者入院前已確診為MM，無法確定患者初診斷及入住科室，因此只做其余42例MM 患者的初診斷及入住科室分析。見表4。

3 討論

MM 是惡性漿細(xì)胞病中最常見的一種類型，是一種進(jìn)行性的腫瘤性疾病。其特征為骨髓漿細(xì)胞瘤和一株完整性的單克隆免疫球蛋白（IgG，IgA，IgD 或IgE）或Bence Jones蛋白質(zhì)（游離的單克隆性κ或γ輕鏈）過度增生。MM 早期癥狀不明顯，有的甚至無自覺癥狀，當(dāng)出現(xiàn)癥狀時，其臨床表現(xiàn)也是多種多樣，常伴有多發(fā)性溶骨性損害、高鈣血癥、貧血、腎臟損害，而且對細(xì)菌性感染的易感性增高，正常Ig的生成受抑。但這些異常檢查結(jié)果缺乏特異性，需要與其他漿細(xì)胞疾病和實體瘤骨侵犯鑒別。IFE是一種免疫沉淀反應(yīng)的混合技術(shù)，將區(qū)帶電泳和免疫擴(kuò)散結(jié)合起來，是一種靈敏度很高的分離及鑒定M 蛋白的方法，具有很強(qiáng)的特異性［2－3］。本文中IFE 對MM 診斷的靈敏度和特異度，分別為69.9%和80.5%，與臨床報道有一定差異［3］，可能與研究病例較少有關(guān)。IFE 可對M 蛋白進(jìn)行免疫分型，MM 的每一型都有自己的特點，臨床可根據(jù)分型結(jié)果，采取個體化治療，選擇適合患者的治療方法，以達(dá)到緩解病情和治愈疾病的目的。

按照國內(nèi)MM 的診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］，67例IFE 陽性患者中，51例被確診為MM，IFE的陽性預(yù)測值達(dá)76.1%，說明IFE 陽性患者被診斷為MM 的可能性很大，但本次陽性預(yù)測值低于以往的報道［5］，可能與病例數(shù)較少有關(guān)。22例IFE 陰性的MM患者中，大部分患者入院前已被確診為MM，經(jīng)過治療后，病情有所改善，以致血清中M 蛋白水平降低；另有少部分患者為低分泌型或未分泌型，因此出現(xiàn)IFE 檢測為陰性的情況。16例IFE陽性的非MM 患者中，有2例巨球蛋白血癥，2例漿細(xì)胞病，3例淋巴系統(tǒng)腫瘤，1例POEMS綜合征，這些疾病都會引起血清中Ig不同程度的升高，從而造成假陽性的出現(xiàn)。因此，可以通過IFE對血清M 蛋白進(jìn)行分離及鑒定，對MM 進(jìn)行診斷，療效監(jiān)測，指導(dǎo)臨床治療。

本研究中，73例MM 患者中，男41例（56.16%），女32例（43.84%），男女患病比例約為1.28∶1，說明男性發(fā)病率高于女性。

MM 患者的臨床表現(xiàn)多種多樣，出現(xiàn)不同程度的貧血、骨痛、蛋白尿、感染、高鈣血癥、腎功能不全等癥狀。由于MM 患者臨床表現(xiàn)的多樣化，極易被漏診、誤診。據(jù)不同醫(yī)院的統(tǒng)計資料分析，MM 誤診率可達(dá)54.00%～69.11%［6］，許多MM 患者因此錯過了最佳治療時期。本研究中初診為骨痛骨折的有11例，腎病、腎功能不全5例，冠心病、心絞痛2例，貧血待查者9例，色素性紫癜性皮膚病2例，發(fā)熱1例，其他12例。由于原發(fā)疾病被掩蓋，患者常會就診于其他科室。因此，對于40歲以上的患者，若出現(xiàn)不明原因的腰痛、骨關(guān)節(jié)痛、病理性骨折、不明原因的蛋白尿、貧血、高鈣血癥、感染等，均應(yīng)考慮MM的可能［7］。IFE結(jié)合了蛋白質(zhì)電泳的高分辨率和抗原抗體反應(yīng)的特異性，結(jié)果判斷簡易，大大降低了MM 的誤診率。有報道指出，IFE 可對MM 患者進(jìn)行早期診斷［8］，與本研究相符。本研究中，有2例初診斷為色素性紫癜性皮膚病，1例發(fā)熱患者，骨髓瘤病變還沒累及腎臟，還沒造成嚴(yán)重的溶骨性損傷，但I(xiàn)FE已能對血清M 蛋白進(jìn)行檢測，對MM 進(jìn)行早期診斷，為臨床醫(yī)生提供可靠的診斷依據(jù)。

本研究中51例IFE陽性MM 患者IgG型最常見，與文獻(xiàn)［9－10］報道相符，有24例，占47.06%；IgA型15例，占29.41%；輕鏈型11例，占21.57%，其中游離輕鏈κ型7例，占13.73%；游離輕鏈λ型4例，占7.84%，而IgM型λ只有1例，占1.96%。各型別的κ∶λ比例不同，IgG 中κ∶λ為1∶1.4，IgA型中κ∶λ為1.5∶1，輕鏈型中κ∶λ為1.75∶1。在16例IFE陽性的非MM 患者中IgM 4例，占25.00%；IgG 3例，占18.75%；IgA 4例，占25.00%；游離輕鏈λ型5例，占31.25%。4例IgM 為巨球蛋白血癥或淋巴系統(tǒng)瘤。在MM患者中，IgM型所占比例很小，因此，當(dāng)IFE檢測結(jié)果出現(xiàn)IgM時，要特別注意MM 與其他漿細(xì)胞病如巨球蛋白血癥和淋巴系統(tǒng)瘤的鑒別，減少誤診率。

綜上所述，IFE是一種特異性、靈敏度及準(zhǔn)確度很高的能快速分離及鑒別單克隆M 蛋白的方法。在MM 的鑒別診斷、指導(dǎo)治療、療效監(jiān)測、預(yù)后判斷都有重要的臨床意義。隨著MM 發(fā)病率的提高，臨床表現(xiàn)的多樣化，IFE 已成為診斷MM必不可少的實驗室常規(guī)檢查項目，為臨床醫(yī)生的診斷、治療提供可靠的依據(jù)。另外，還應(yīng)加強(qiáng)多學(xué)科、多領(lǐng)域的合作研究，尋找新的快速準(zhǔn)確診斷MM 的方法，進(jìn)一步提高對MM 的診斷正確率。

［1］田永芳，賈海英，田洪燕.47例多發(fā)性骨髓瘤綜合分析［J］.臨床血液學(xué)雜志：輸血與檢驗版，2010，23（4）：473－474，478.

［2］張之南，沈悌.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)［M］.3版.北京：科學(xué)出版社，2007：32－234.

［3］羅琳，羅軍，賴穎暉，等.33例多發(fā)性骨髓瘤患者血清免疫學(xué)特征［J］.臨床血液學(xué)雜志，2006，19（1）：39－40.

［4］張之南.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)［M］.2版.北京：科學(xué)出版社，1998：373－380.

［5］張磊，高秀登，劉樹業(yè).免疫固定電泳在多發(fā)性骨髓瘤中的診斷價值［J］.中國實驗診斷學(xué)，2011，15（3）：517－519.

［6］International Myeloma Working Group.Criteria for the classification of monoclonal gammopathies，multiple myeloma and related disorders：a report of the International Myeloma Working Group［J］.Br J Haematol，2003，121（5）：749－757.

［7］孟秀琴，艾工文.18例多發(fā)性骨髓瘤臨床分析［J］.臨床血液學(xué)雜志，2005，18（1）：40－41.

［8］盧娉霞，陳鶯，張敬喜.免疫固定電泳在多發(fā)性骨髓瘤免疫分型中的應(yīng)用［J］.實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2009，27（3）：267－268.

［9］喬永紅，保方，陳蓮英，等.免疫固定電泳技術(shù)在多發(fā)性骨髓瘤31例中的診斷價值［J］.交通醫(yī)學(xué)，2011，24（5）：477－478.

［10］劉玉梅，黃琳淋，趙有利，等.296例血清免疫固定電泳檢測結(jié)果分析［J］.微循環(huán)學(xué)雜志，2012，22（2）：45－46.