于濱+++左增艷++++++孔維佳

[摘要] 目的 觀察天麻粉對高脂飼料投喂大鼠的降血脂和減肥作用。 方法 采用雄性SD大鼠，以高脂飼料喂養(yǎng)建立高血脂和肥胖模型。實(shí)驗(yàn)設(shè)正常對照組、高脂飼料（HFD）組、HFD+天麻粉500 mg/kg和1000 mg/kg組共4組，治療30 d。試驗(yàn)前后測量動物體重，試驗(yàn)后檢測動物空腹血清總膽固醇（CHO）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和血糖（Glu）水平，處死動物后測定體脂（睪丸及腎周圍脂肪墊）重量并計算脂肪系數(shù)（體脂重量/終體重）。 結(jié)果 高脂飼料投喂30 d后，HFD組大鼠出現(xiàn)顯著高血脂和高血糖，體重、體脂重量和脂肪系數(shù)較正常對照組分別增加（13.5±2.7）%、（86.8±9.1）%、（66.5±0.5）%，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01）。HFD+天麻粉500 mg/kg組體脂重量下降（16.2±9.9）%，與HFD組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）；HFD+天麻粉1000 mg/kg組體重、體脂重量和脂肪系數(shù)均得到明顯控制，較HFD組分別下降（10.3±5.6）%、（22.0±5.9）%、（15.4±1.9）%，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01）。HFD+天麻粉500 mg/kg和1000 mg/kg組使大鼠血清CHO分別下降（12.6±5.4）%、（14.3±3.6）%，TG分別下降（8.4±4.2）%、（15.8±8.4）%，Glu分別下降（18.7±3.5）%、（23.0±7.5）%，與HFD組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。 結(jié)論 在高脂飼料誘導(dǎo)的大鼠高血脂和肥胖模型中，天麻粉500 mg/kg和1000 mg/kg具有降血脂和降血糖作用；天麻粉1000 mg/kg還具有減肥作用。

[關(guān)鍵詞] 天麻粉；大鼠；高脂血癥；肥胖

[中圖分類號] R965 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2014）10（c）-0008-04

Experimental study of the lipid-lowering and antiobesity effects of Gastrodia Powder in rats fed with a high-fat diet

YU Bin ZUO Zengyan KONG Weijia▲

Institute of Medicinal Biotechnology， Chinese Academy of Medical Sciences， Beijing 100050， China

[Abstract] Objective To study the blood lipid-lowering and antiobesity effects of Gastrodia Powder in rats fed with a high-fat diet. Methods Male SD rats were fed with a high-fat diet to induce hyperlipidemia and obesity. The animals were divided into 4 groups， which were the normal control group， high-fat diet （HFD） group， HFD+Gastrodia Powder 500 mg/kg and HFD+Gastrodia Powder 1000 mg/kg group， respectively. The duration of treatment was 30 days. Body weights （BW） of the animals were determined before and after the experiment. At the end of the experiment， serum total cholesterol （CHO）， triglyceride （TG）， high density-lipoprotein cholesterol （HDL-C） and glucose （Glu） levels were determined after fasting. The animals were executed， the weights of body fats （epididymal and perirenal fat pads） were measured， and the fat coefficients （body fat weight/BW after experiment） were calculated. Results The rats developed obvious hyperlipidemia and hyperglycemia after 30 days of HFD feeding. Compared to those of the normal control group， the BW， body fat weights and fat coefficients of the HFD group of animals increased by （13.5±2.7）%， （86.8±9.1）%， （66.5±0.5）%， the differences were significant （P < 0.05 or P < 0.01）， respectively. HFD+Gastrodia Powder 500 mg/kg group could reduce body fat weights by （16.2±9.9）%， compared to the HFD group， the difference was significant （P < 0.05）； HFD+Gastrodia Powder 1000 mg/kg group decreased BW， body fat weights and fat coefficients by （10.3±5.6）%， （22.0±5.9）%， （15.4±1.93）% （P < 0.05 or P < 0.01）， respectively. Compared to those of the HFD group， HFD+Gastrodia Powder 500 or 1000 mg/kg could reduce serum CHO by （12.6±5.4）% and （14.3±3.6）%， reduce serum TG by （8.4±4.2）% and （15.8±8.4）%， and reduce serum Glu by （18.7±3.5）% and （23.0±7.5）%， respectively， the differences were significant （P < 0.05）. Conclusion In a rat model of hyperlipidemia and obesity induced by high-fat diet feeding， Gastrodia Powder （500 or 1000 mg/kg） has lipid-lowering and glucose-lowering activities； in addition， Gastrodia Powder at 1000 mg/kg also has antiobesity activity.

[Key words] Gastrodia Powder； Rats； Hyperlipidemia； Obesity

隨著社會經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展和人民生活水平的提高，肥胖癥已成為全球的高發(fā)病之一。肥胖癥是營養(yǎng)物質(zhì)過剩導(dǎo)致體內(nèi)脂肪堆積而引起的復(fù)雜慢性疾病，如不加以干預(yù)，會引起心血管疾病、糖尿病甚至腫瘤等嚴(yán)重并發(fā)癥[1]。除了運(yùn)動和飲食控制外，減肥藥的研制一直是全球藥物研發(fā)的重點(diǎn)。大量的臨床經(jīng)驗(yàn)表明中藥可用于減肥，如中藥的復(fù)方[2-4]、單味方[5-6]以及植物提取物[7]用于降脂減肥均顯示了明確的功效。天麻（Gastrodia elata）為蘭科植物，在我國已經(jīng)有非常悠久的臨床應(yīng)用歷史?！吨袊幍洹?010年版記載，天麻味甘，性微濕，入肝經(jīng)，具有平肝熄風(fēng)、祛風(fēng)定驚的功效。天麻中含有多種成分，如天麻素（gastrodin）、香莢蘭醛（vanilline）、香莢蘭醇（vanillyl alcohol）、維生素A類、對羥基苯甲醛（p-hydroxybenzaldehyde）、對羥基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）、琥珀酸（succinic acid）、胡蘿卜苷、谷甾醇、檸檬酸、抗真菌蛋白和許多微量元素如鐵、氟、錳、鋅、碘等[8-9]。有研究表明，天麻粉及天麻粉制成的片劑具有降血脂、降血糖等作用[10-13]，還有報道顯示，天麻粉在脂肪乳劑灌胃的大鼠中具有顯著的降血脂、減少肝臟脂肪蓄積、減輕肝臟脂肪變性及改善肝功能的作用[13]。但是天麻用于肥胖癥的治療尚未見報道，本文對天麻粉在高脂飼料喂養(yǎng)的大鼠體內(nèi)的降脂減肥效果進(jìn)行研究，現(xiàn)報道如下：

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試藥 天麻粉購自陜西漢王略陽中藥科技有限公司，批號：T01-110714，由全天麻烘干超微粉碎而制[13]。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動物 SD雄性大鼠共40只，體重為（150 ± 10）g，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司，許可證編號SCXK（京）2007-0001。飼養(yǎng)環(huán)境，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所實(shí)驗(yàn)動物房（SPF級），許可證編號為：SCXK（京）2007-0013。高脂飼料及普通飼料均由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供。高脂飼料配方：78.8%普通基礎(chǔ)飼料、10%蛋黃粉、10%熟豬油、1%膽固醇、0.2%膽鹽。飼料許可證編號為SCXK（軍）2002-018。

1.1.3 試劑盒 檢測血清總膽固醇（CHO）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）及血糖（Glu）的試劑盒均購自北京中生生物工程高技術(shù)公司。

1.1.4 儀器 7060全自動生化分析檢測儀購自日本日立（HITACHI）公司；臺式離心機(jī)購自美國Sigma公司。

1.2 方法

1.2.1 分組 實(shí)驗(yàn)設(shè)4組，每組10只動物，分別為正常對照組、高脂飼料（HFD）組、HFD+天麻粉500 mg/kg組和HFD+天麻粉1000 mg/kg組。

1.2.2 方法[14] 動物試驗(yàn)方案經(jīng)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所實(shí)驗(yàn)動物倫理委員會批準(zhǔn)并遵循中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院制訂的《實(shí)驗(yàn)動物保護(hù)和使用指南》。試驗(yàn)方案參照原衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評價規(guī)范》（2003年版）“功能學(xué)評價程序和檢驗(yàn)方法，輔助降血脂功能檢驗(yàn)方法動物實(shí)驗(yàn)脂代謝紊亂模型法預(yù)防性給受試樣品；減肥功能檢驗(yàn)方法預(yù)防性肥胖模型法”進(jìn)行設(shè)計。大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后隨機(jī)分組，正常對照組大鼠給予普通基礎(chǔ)飼料，HFD組、HFD+天麻粉500 mg/kg組和HFD+天麻粉1000 mg/kg組均給予HFD飼養(yǎng)，HFD+天麻粉500 mg/kg組和HFD+天麻粉1000 mg/kg組同時按所設(shè)劑量灌胃給藥，連續(xù)給予30 d。自實(shí)驗(yàn)開始HFD組、HFD+天麻粉500 mg/kg組和HFD+天麻粉1000 mg/kg組每只動物每天均給予等量的HFD，正常對照組以同等方式給予基礎(chǔ)飼料，飼料給予量與高脂飼料相同。給藥前后大鼠稱體重；試驗(yàn)結(jié)束時禁食16 h，眼眶取血，分離血清，采用酶比色法[10]檢測CHO、TG、Glu，采用清除法[10]檢測HDL-C水平；同時剖腹取體脂（睪丸及腎周圍脂肪墊）稱重，并計算脂肪系數(shù)（體脂重量/終體重）。

1.3 結(jié)果判定[14]

1.3.1 降血脂功能結(jié)果判定 在血清CHO、TG、HDL-C三項(xiàng)指標(biāo)檢測中CHO和TG二項(xiàng)指標(biāo)陽性則可判定該受試樣品輔助降血脂功能動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。

1.3.2 減肥功能結(jié)果判定 試驗(yàn)組的體重和體脂重量，或體重和脂肪系數(shù)低于HFD組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，則可判定該受試樣品動物減肥功能試驗(yàn)結(jié)果陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析，計量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩獨(dú)立樣本的計量資料采用t檢驗(yàn)；多組間的比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 天麻粉對大鼠血脂和血糖的影響

由表1可見，與正常對照組比較，HFD組血清CHO、TG、空腹Glu明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01），提示高脂動物模型造模成功。與HFD組比較，HFD+天麻粉500 mg/kg組和HFD+天麻粉1000 mg/kg組均有明顯降低血清CHO的作用，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P < 0.05），降低率分別為（12.6±5.4）%和（14.3±3.6）%；同時具有明顯降低血清TG的作用，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05），降低率分別為（8.4%±4.2）%和（15.8±8.4）%；還有明顯降空腹Glu的作用，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05），降低率分別為（18.7±3.5）%和（23.0±7.5）%。而血清HDL-C各組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。

表1 天麻粉對大鼠血脂和血糖的影響（mmol/L，x±s，n = 10）

注：與正常對照組比較，*P < 0.05，**P < 0.01；與HFD組比較，#P < 0.05；HFD：高脂飼料；CHO：總膽固醇；TG：三酰甘油；HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇；Glu：血糖

2.2 天麻粉對大鼠體重、體脂重量和脂肪系數(shù)的影響

由表2可見，試驗(yàn)前各組動物體重接近。試驗(yàn)后HFD組動物的體重、體脂重量和脂肪系數(shù)較正常對照組分別增加（13.5±2.7）%、（86.8%±9.1）%、（66.5%±0.5）%，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01），提示大鼠肥胖模型造模成功。與HFD組比較，HFD+天麻粉500 mg/kg組體脂重量下降（16.2±9.85）%（P < 0.05）；HFD+天麻粉1000 mg/kg組體重、體脂重量和脂肪系數(shù)均得到明顯控制，較HFD組分別下降（10.3±5.6）%、（22.0±5.9）%、（15.4±1.9）%，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01）。綜上可知，HFD+天麻粉500 mg/kg和1000 mg/kg（相當(dāng)于人擬用臨床劑量52.5 mg/kg[9]的10～20倍）灌胃后高脂大鼠血清中的CHO、TG和Glu水平有明顯降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P < 0.05），提示天麻粉此劑量有輔助降血脂和降血糖功能。另外，天麻粉1000 mg/kg具有降脂減肥的功能。

表2 天麻粉對大鼠體重、體脂重量和脂肪系數(shù)的影響（x±s，n = 10）

注：與正常對照組比較，*P < 0.05，**P < 0.01；與HFD組比較，#P < 0.05，##P < 0.01；HFD：高脂飼料

3 討論

已有報道天麻粉低、中、高劑量均能降低高脂血癥金黃地鼠血清TC、TG和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C），并且統(tǒng)計學(xué)有差異[10]。本研究觀察到天麻粉500 mg/kg和1000 mg/kg灌胃后高脂大鼠血清中的CHO、TG和Glu水平有明顯降低，差異具有顯著性（P < 0.05），與文獻(xiàn)報道的相同劑量下其輔助降血脂和降血糖功能的結(jié)果具有可重復(fù)性[10，11，15]。

另外，本試驗(yàn)采用動物肥胖模型觀察到天麻的減肥作用，與筆者之前的研究結(jié)果吻合[16]。筆者之前曾報道天麻粉口服8周對高脂小鼠的體重增加有明顯的控制作用。本研究中HFD+天麻粉500 mg/kg組體脂重量顯著下降（P < 0.05）；HFD+天麻粉1000 mg/kg組體重、體脂重量和脂肪系數(shù)較HFD組均得到明顯控制（P < 0.01或P < 0.05）。以上結(jié)果均提示天麻作為減肥降脂降血糖的作用可得到試驗(yàn)支持。

目前市場上的減肥藥主要有兩大類，胰脂肪酶抑制劑和作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的食欲抑制劑[1]。但總的來說有效治療肥胖癥的手段有限，肥胖難以得到有效控制。由于藥物不良反應(yīng)問題，已經(jīng)上市的減肥藥大部分都被淘汰，肥胖正面臨無藥可治的窘迫局面。與西藥相比，中國的傳統(tǒng)中藥例如：人參、石榴葉、綠茶、苦參、生姜等[17]在防治肥胖方面雖然起效緩和，但有安全性高等優(yōu)勢。所以，天麻未來可作為輔助減肥降脂的藥物或保健食品進(jìn)行開發(fā)，這無疑將是眾多肥胖患者的福音，因?yàn)樘炻殚L期服用具有很好的安全性[18-19]。本實(shí)驗(yàn)得出天麻粉減肥降脂降血糖有效劑量為1000 mg/kg，推算到人體的推薦劑量應(yīng)為肥胖患者每人每天口服0.1 g/kg，在均衡飲食的情況下用于減肥，該劑量符合《中國藥典》2010年版記載的天麻3～10 g/d的使用劑量范圍。

天麻減肥降脂的具體機(jī)制尚不明確，下一步試驗(yàn)應(yīng)該著重于探索天麻對細(xì)胞脂代謝，包括脂肪合成和脂肪分解信號通路的作用。另外，由于氧化應(yīng)激和炎性反應(yīng)在肥胖等代謝紊亂疾病中發(fā)揮關(guān)鍵作用[20]，未來的研究工作還應(yīng)包括天麻的抗氧化和抗炎作用。事實(shí)上，已有報道天麻在糖尿病動物模型以及神經(jīng)細(xì)胞中具有抗氧化和抗炎作用[21，22]，但具體分子機(jī)制有待深入研究。

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（收稿日期：2014-06-05 本文編輯：衛(wèi) 軻）

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（收稿日期：2014-06-05 本文編輯：衛(wèi) 軻）