徐建玲

室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評對于臨床微生物檢驗的質(zhì)量控制來說都非常關(guān)鍵, 在室內(nèi)質(zhì)控的基礎(chǔ)上進(jìn)行室間質(zhì)評, 不僅可以看出一個實驗室的標(biāo)本鑒定能力, 經(jīng)常進(jìn)行室間質(zhì)評還可以提高檢驗人員的工作水平, 進(jìn)而提高室內(nèi)質(zhì)控的水平［1］。本案將本實驗室臨床微生物檢驗的結(jié)果, 與本省臨床檢驗中心提供的標(biāo)本進(jìn)行室間質(zhì)評, 以期為其他實驗室提供參考,提高實驗室微生物檢驗的質(zhì)量。

1 材料與方法

1.1 材料 選取2009～2013年本省臨床檢驗中心的室間質(zhì)評標(biāo)本細(xì)菌共100株, 全部轉(zhuǎn)種成功。對這些菌株進(jìn)行分類,革蘭陽性桿菌43株, 革蘭陰性桿菌48株, 革蘭陰性球菌9株。實驗過程中用到的儀器和試劑有藥敏試紙、成品干粉培養(yǎng)基、微量生化管、API微生物臨定系統(tǒng)、全自動微生物分析儀等。所有的儀器和試劑符合實驗操作的鑒定要求。

1.2 方法 將本省臨床檢驗中心提供的100株細(xì)菌進(jìn)行轉(zhuǎn)種, 不同的標(biāo)本區(qū)分不同的培養(yǎng)基, 轉(zhuǎn)種后, 將標(biāo)本的環(huán)境溫度控制在35～37℃之間［2］。24 h以后觀察并記錄菌落的形態(tài), 對于生長不良的細(xì)菌可以適當(dāng)延長培養(yǎng)的時間, 根據(jù)細(xì)菌的實際生長情況停止培養(yǎng)。細(xì)菌的初步鑒定方法是通過革蘭染色后觀察菌落的形態(tài)和染色性。全面鑒定細(xì)菌時先對細(xì)菌進(jìn)行分純處理, 然后運(yùn)用全自動微生物分析儀或者是API微生物臨定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。個別菌株可能會需要進(jìn)行手工鑒定, 按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程(第 3 版)》［3］執(zhí)行。鑒定正確的菌株進(jìn)行藥敏試驗, 藥敏試驗參照美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(CLSI)標(biāo)準(zhǔn)［4］執(zhí)行。

2 結(jié)果

100株細(xì)菌全部轉(zhuǎn)種成功, 其中鑒定正確94株, 鑒定錯誤6株。錯誤的6株細(xì)菌中, 革蘭陽性桿菌與革蘭陰性桿菌各3株。94株細(xì)菌的藥敏試驗結(jié)果有92例是符合的, 試驗結(jié)果不符合的2株細(xì)菌的抗菌素都為青霉素。具體鑒定錯誤分析見表1。

表1 菌株鑒定錯誤的原因分析(n=6)

3 討論

由鑒定結(jié)果可知, 鑒定錯誤的原因大致有以下三點：首先是實驗室鑒定的手段有限, 如病牛沙門菌和流感嗜血桿菌的誤檢。其次是檢驗人員的認(rèn)知不足, 如芽孢桿菌屬的誤檢,芽孢桿菌需要培養(yǎng)3 d以上才可見芽孢, 如果檢驗人員不知道這一點, 培養(yǎng)24 h后做鑒定試驗必然會產(chǎn)生錯誤, 再次藥物含量的把握, 如G群鏈球菌的誤診。最后, 室內(nèi)質(zhì)控工作沒有做好, 如金黃色葡萄球菌的誤檢。靛基質(zhì)試驗、氧化酶試驗等在細(xì)菌鑒定中使用非常頻繁, 應(yīng)經(jīng)常監(jiān)測, 以防試劑失效。藥敏試驗中抗菌素為青霉素的檢驗有2株細(xì)菌結(jié)果不符合, 分析原因可能是青霉素本身就不穩(wěn)定, 加上本實驗室之前的保存方法也存在問題, 沒有在低溫下保存導(dǎo)致。藥物的購買應(yīng)該注意計劃性, 仔細(xì)做好記錄, 根據(jù)藥物性質(zhì)妥善保管。

綜上所述, 臨床微生物室間質(zhì)量評價對于減少實驗室細(xì)菌鑒定失誤很有幫助, 實驗室在進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗時,由于工作人員的專業(yè)水平、細(xì)菌學(xué)診斷水平和質(zhì)量控制水平等因素, 對準(zhǔn)確鑒定細(xì)菌都會起到一定的影響。臨床進(jìn)行微生物檢驗應(yīng)該在嚴(yán)格室內(nèi)質(zhì)控的基礎(chǔ)上經(jīng)常進(jìn)行室間質(zhì)評。

［1］牛華, 王天朝, 謝穎夫, 等.室內(nèi)質(zhì)控實時在線監(jiān)控方案的設(shè)計和實施.臨床檢驗雜志, 2011, 29(7):490-491.

［2］萬臘根, 張世錕, 胡意, 等.兩種方法設(shè)置室內(nèi)質(zhì)控限值時室內(nèi)質(zhì)控的結(jié)果分析.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志, 2011, 32(6):692-693.

［3］中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗操作規(guī)程.南京:東南大學(xué)出版社, 2006:30.

［4］Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).Performance goals for the internal quality control of multichannel hematology analyzers; Approved Standard H26-A.2006.