盧志芳，楊先凱，李鳳俠

(1、徐州民政醫(yī)院,江蘇 徐州221100；2、徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院,江蘇 徐州221100)

目前徐州地區(qū)各級醫(yī)療機(jī)構(gòu)使用的生化分析儀品牌及型號眾多，性能不一，試劑品牌更是紛繁復(fù)雜，由此導(dǎo)致不同檢測系統(tǒng)測定結(jié)果間存在潛在的差異，給地區(qū)內(nèi)檢驗(yàn)結(jié)果互認(rèn)帶來挑戰(zhàn)。因此，如何進(jìn)行比對試驗(yàn)，如何評估不同檢測系統(tǒng)檢驗(yàn)結(jié)果的偏倚，以及如何判斷不同檢測系統(tǒng)結(jié)果的一致性和可比性，是目前檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)界關(guān)注和討論的熱點(diǎn)問題[1]。作者根據(jù)(CLSI)EP9-A2[2]文件《用患者樣品進(jìn)行方法比對及偏倚評估》的要求，分別對本市2家實(shí)驗(yàn)室的兩個(gè)檢測系統(tǒng)的10生化項(xiàng)目的檢測結(jié)果進(jìn)行比對分析，判斷臨床可接受性能，為實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室間檢驗(yàn)結(jié)果的可比性提供依據(jù)，為地區(qū)內(nèi)檢驗(yàn)結(jié)果互認(rèn)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 比對項(xiàng)目 血糖(Glu)、尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸 (UA)、 堿性磷酸酶 (ALP)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、鈣 (Ca)、磷(P)共10個(gè)生化項(xiàng)目。

1.1.2 標(biāo)本來源 參照EP9-A2文件，每日隨機(jī)收集徐州民政醫(yī)院檢驗(yàn)科高中低不同濃度的新鮮血清標(biāo)本 8份，連續(xù) 5 d，共 40份，標(biāo)本無溶血、乳糜和黃疸。

1.1.3 檢測系統(tǒng)的組成 徐醫(yī)附院檢測系統(tǒng)為參比系統(tǒng)(X)：羅氏C501全自動(dòng)生化分析儀 ，羅氏試劑，羅氏c.f.a.s復(fù)合定標(biāo)液和羅氏質(zhì)控品。徐州民政醫(yī)院檢測系統(tǒng)為待評系統(tǒng)(Y)：日立7080全自動(dòng)生化分析儀，上?？菩涝噭?，與參比系統(tǒng)同一批號的羅氏c.f.a.s復(fù)合定標(biāo)液和羅氏質(zhì)控品。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)條件 嚴(yán)格按照廠家要求對各自的生化分析儀施行保養(yǎng)維護(hù)，使儀器保持在最佳狀態(tài)。用羅氏c.f.a.s復(fù)合校準(zhǔn)品在各檢測系統(tǒng)上校準(zhǔn)，以中值和高值水平的羅氏質(zhì)控品做每日質(zhì)控，保證結(jié)果均在控。

1.2.2 標(biāo)本測定過程 將收集的新鮮血清標(biāo)本8份，每份標(biāo)本均分為2份，分別置于各檢測系統(tǒng)常規(guī)工作中測定，檢測順序?yàn)?-8然后8-1，在各檢測系統(tǒng)上所有標(biāo)本的測定均在2h內(nèi)完成[3]。

1.3 數(shù)據(jù)處理

1.3.1 數(shù)據(jù)收集 實(shí)驗(yàn)中嚴(yán)格按照質(zhì)控程序，在失控時(shí)進(jìn)行重測，直到獲得足夠的樣本數(shù)。所有儀器誤差和操作誤差全部記錄在冊，不計(jì)入最后的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。

1.3.2 離群值檢驗(yàn) 依據(jù)EP9-A2文件對兩系統(tǒng)間進(jìn)行組內(nèi)與組間離群值篩查，如發(fā)現(xiàn)一個(gè)離群點(diǎn)，即放棄該樣本數(shù)據(jù)，遞補(bǔ)該樣本的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，每組數(shù)據(jù)中被刪除的離群點(diǎn)不能超過 2.5%。若超過2.5%的離群值，則應(yīng)進(jìn)行調(diào)查或原因分析，實(shí)驗(yàn)是否有干擾因素、儀器故障或人為錯(cuò)誤，來決定是否需要替換增加數(shù)據(jù)。

1.3.3 參比系統(tǒng)(X)測定范圍的檢驗(yàn) 用相關(guān)系數(shù)(r)來判斷參比系統(tǒng) (X)的測定范圍是否合適，如果r≥0.975(或 r2≥0.95)，則認(rèn)為 X 有足夠?qū)挼娜≈捣秶诜治鑫餃y量范圍內(nèi)，數(shù)據(jù)范圍已抵消X的誤差，可忽略不計(jì)測定誤差對回歸估計(jì)的影響，此時(shí)用直線回歸來估計(jì)斜率(b)和截距(a)結(jié)果是可靠的；如r＜0.975，示精密度較差 或X范圍不夠?qū)?，使偏倚的估?jì)不可靠，須擴(kuò)大X的取值范圍、改進(jìn)方法精密度后重新試驗(yàn)。

1.3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用Excel 2003和SPSS 17.0軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理。計(jì)算線性回歸方程Y=bX+a。

2 結(jié)果

2.1 相關(guān)性分析 以徐醫(yī)附院檢測系統(tǒng)作為參比系統(tǒng)(X)，對徐州民政醫(yī)院檢測系統(tǒng)(Y)進(jìn)行回歸與相關(guān)分析，結(jié)果見表1，兩系統(tǒng)間的相關(guān)系數(shù)(r)均大于0.975，說明兩系統(tǒng)的相關(guān)性較好。

表1 檢測系統(tǒng)(X)與檢測系統(tǒng)(Y)的相關(guān)回歸分析

2.2 臨床可接受性能評價(jià) 根據(jù)表1的回歸方程和臨床要求，按照美國 Statland[4]的建議，分別將3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平濃度 Xc代入回歸方程，得相應(yīng)的Y值，則系統(tǒng)誤差即偏倚SE=|Yc-Xc|；相對偏倚SE%=(SE/Xc)×100%。臨床可接受性能的判斷標(biāo)準(zhǔn)為：方法學(xué)比較系統(tǒng)誤差<1/2國家衛(wèi)計(jì)委推薦的TEa(1/2TEa)范圍[5]，即兩系統(tǒng)間的測定結(jié)果具有可比性。待評檢測系統(tǒng)臨床可接受性能評價(jià)見表2。

表2 待評檢測系統(tǒng)臨床可接受性能評價(jià)

3 討論

檢測系統(tǒng)[6]是指完成一個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目的測定所涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、消耗品、操作程序、質(zhì)量控制程序、維護(hù)保養(yǎng)程序等的組合。而各檢測系統(tǒng)由于組成及性能存在差異，勢必導(dǎo)致檢測結(jié)果存在差異，這就需要對不同檢測系統(tǒng)的結(jié)果進(jìn)行可比性評估，以保證同一標(biāo)本在不同系統(tǒng)檢測時(shí)得到具有可比性的結(jié)果。

本研究的2套檢測系統(tǒng)，由于徐醫(yī)附院檢測系統(tǒng)使用的是羅氏C501全自動(dòng)生化分析儀和與之完全配套的試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，性能穩(wěn)定，歷年歷次參加衛(wèi)生部及省室間質(zhì)評成績優(yōu)秀，為溯源性好的檢測系統(tǒng)，故以此檢測系統(tǒng)作為參比系統(tǒng)(X)，進(jìn)行系統(tǒng)間的比對實(shí)驗(yàn)。

本研究相關(guān)與回歸分析顯示：待評系統(tǒng)與參比系統(tǒng)間的相關(guān)性良好。臨床可接受性能評價(jià)顯示：待評系統(tǒng)(Y)的 GGT、ALP、Cr、UA、Urea 各項(xiàng)目在各醫(yī)學(xué)決定水平與參比系統(tǒng)(X)相比SE%均小于1/2國家衛(wèi)計(jì)委推薦的TEa，為臨床可接受。而P、Glu、AST、ALT 在低醫(yī)學(xué)決定水平，Ca 在高醫(yī)學(xué)決定水平分別有1項(xiàng)SE%超出1/2國家衛(wèi)計(jì)委推薦的TEa范圍，為臨床不可接受。

上述結(jié)果表明，兩系統(tǒng)檢測結(jié)果相關(guān)性雖然良好，但部分項(xiàng)目在部分醫(yī)學(xué)決定水平處的偏倚仍超出允許誤差范圍，對待評系統(tǒng)中的此類檢測項(xiàng)目應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn)[7]，使兩系統(tǒng)偏倚在臨床可接受范圍內(nèi)。對本研究中待評系統(tǒng)未達(dá)到臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)的5個(gè)項(xiàng)目，我們利用參比系統(tǒng)(X)的溯源性對新鮮混合血清進(jìn)行定值后對待評系統(tǒng)進(jìn)行定標(biāo)，使其與參比系統(tǒng)(X)的偏倚在臨床可接受范圍內(nèi)。

[1]董家書.對不同血細(xì)胞自動(dòng)分析的比對試驗(yàn)[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2009,30(1):92-93.

[2]The National Committee for Clinical Laboratory Standards.EP9-A2·Method comparison and bias estimation using patient samples;approved guideline-second edition[S].Wayne:The National Committee for ClinicalLaboratory Standards,2002:1-8.

[3]孫杰,王麗平.測定時(shí)間對生化結(jié)果影響的探討[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2010,7(24):2739.

[4]叢玉隆,馮仁豐,陳曉東.臨床實(shí)驗(yàn)室管理學(xué)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2004:138.

[5]許斌.醫(yī)院檢驗(yàn)科建設(shè)管理規(guī)范[M].第2版,南京:東南大學(xué)出版社,2013:131-133.

[6]張秀明,莊俊華,徐寧,等.不同檢測系統(tǒng)血清酶測定結(jié)果的偏差評估和可比性的研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2006,29(4):346-349.

[7]吳平平,鄧琳娜.自建生化檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果溯源性分析[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志,2009,41(9):1099-1101.