王勤

摘 要：用微生物（細菌、病毒、衣原體、鉤端螺旋體等）、微生物代謝產(chǎn)物、原蟲、動物血液和組織等，經(jīng)加工制成，作為預防、治療、診斷特定傳染病或其他有關(guān)疾病的免疫制劑稱之為獸用疫苗。因某些疫苗活性會對人體產(chǎn)生有害影響，用物理方法或化學方法將其滅活后制成的疫苗稱之為滅活疫苗。

關(guān)鍵詞：獸用疫苗 滅活 工藝 設備選型計算

中圖分類號：S852 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）04（b）-0225-01

1 滅活苗簡述

疫苗：凡是具有良好免疫原性的病原微生物，經(jīng)繁殖和處理后制成的制品，用以接種動物能產(chǎn)生相應的免疫力者。除一般活菌（毒）疫苗、滅活疫苗外，還包括類毒素、類毒素與菌體混合疫苗、亞單位組份苗、基因缺失疫苗、活載體疫苗、人工合成疫苗、抗獨特型抗體疫苗等。

滅活疫苗：用物理方法或化學方法將其滅活后制成的疫苗。

2 各種動物疫苗工藝流程示例

（1）滅活苗生產(chǎn)工藝過程簡述

滅活雞胚苗：采用國內(nèi)成熟的雞胚培養(yǎng)病毒的技術(shù)。將種毒接種于9～11日齡非免疫雞胚，接種后的雞胚放在孵化箱中繼續(xù)孵化，棄去接種后24 h內(nèi)死亡的雞胚，培養(yǎng)好的雞胚取出，放在2～8 ℃冷庫中冷藏，之后收獲雞胚尿囊液等。收獲的雞胚尿囊液等加入甲醛等滅活劑滅活，滅活后的雞胚尿囊液等置2～8 ℃冷庫冷藏備用。

（2）滅活細胞苗：將配制好的細胞培養(yǎng)液加入轉(zhuǎn)瓶，將轉(zhuǎn)瓶置于溫室中培養(yǎng)，待轉(zhuǎn)瓶內(nèi)長成單層細胞后，將毒種接種入轉(zhuǎn)瓶中，之后在溫室中繼續(xù)培養(yǎng)，收獲病毒原液。收獲的病毒原液加入甲醛等滅活劑滅活，滅活后的病毒原液置2～8 ℃冷庫冷藏備用。

（3）滅活細菌苗：采用發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)細菌和固體培養(yǎng)細菌兩種技術(shù)。將菌種接種于培養(yǎng)液中，經(jīng)發(fā)酵罐培養(yǎng)或接種在瓊脂平板上培養(yǎng)，收獲菌液（苔）。收獲的細菌加入甲醛等滅活劑滅活，滅活后的菌液置2～8 ℃冷庫或儲液罐中冷藏備用。

（4）乳化配滅活苗：在乳化罐中加入佐劑，滅菌冷卻后，按配比加入從冷庫中取出的抗原液，經(jīng)乳化后分裝入疫苗瓶，分裝后的產(chǎn)品待檢驗合格后，包裝入庫。

3 滅活疫苗工藝設備計算示例

滅活疫苗車間的計算

A.前孵化箱計算

根據(jù)生產(chǎn)大綱，若年產(chǎn)雞胚滅活疫苗10000萬mL，疫苗水相與油相的配比為25%：75%，折合水相（病毒原液）2500萬mL。

每枚非免疫雞胚可生產(chǎn)病毒原液10 mL，雞胚前孵化成功率為90%，后孵化成功率為90%，疫苗分裝成品率為90%，則年需雞胚量為：

2500萬mL/年÷10mL/胚÷90%÷90%÷90%≈342.9萬胚/年

雞胚前孵化10天計，每年生產(chǎn)日數(shù)為300天，則全年可孵化30批。

每批需孵化雞胚

342.9萬胚/年÷30批/年≈11.4萬胚/批

前孵化采用6臺19200蛋位的孵化箱可滿足生產(chǎn)的需要。

B.后孵化箱計算

本項目雞胚接毒后采用孵化箱繼續(xù)孵化，年孵化量為

2500萬mL/年÷10mL/胚÷90%÷90%≈308.6萬胚/年

雞胚后孵化時間以3天計，每年生產(chǎn)日數(shù)為300天，則全年可孵化100批。

每批需孵化雞胚

308.6萬胚/年÷100批/年≈3.09萬胚/批

本項目配置3臺19200蛋位的孵化箱作為后孵化箱，可以滿足生產(chǎn)的需要。

C.轉(zhuǎn)瓶機計算

年產(chǎn)細胞滅活苗2000萬ml，

滅活苗水相（病毒原液）：油相=25%：75%

則年需病毒原液

2000萬ml/年×25%=500萬ml/年

采用容積為3000ml的轉(zhuǎn)瓶，轉(zhuǎn)瓶的裝量為轉(zhuǎn)瓶容積的10%，即300ml/轉(zhuǎn)瓶，細胞培養(yǎng)的成功率為90%，病毒培養(yǎng)的收獲率為90%，疫苗分裝成品率為90%。

全年需培養(yǎng)細胞：

500萬mL/年÷90%÷90%÷90%≈685.9萬mL/年

細胞培養(yǎng)的時間為4天，全年生產(chǎn)日數(shù)為300天每批需培養(yǎng)細胞：

685.9萬mL/年÷75批/年÷300mL/轉(zhuǎn)瓶≈305轉(zhuǎn)瓶/批

需配置3000mL、40瓶位轉(zhuǎn)瓶機

305轉(zhuǎn)瓶/批÷40瓶/臺≈8臺

全年需培養(yǎng)病毒：

500萬mL/年÷90%÷90%≈617.3萬mL/年

病毒培養(yǎng)時間為2天，全年生產(chǎn)日數(shù)為300天，每批需培養(yǎng)病毒：

617.3萬mL/年÷150批/年÷300mL/轉(zhuǎn)瓶≈137轉(zhuǎn)瓶/批

需配置3000mL、40瓶位轉(zhuǎn)瓶機

137轉(zhuǎn)瓶/批÷40瓶/臺≈4臺

D.發(fā)酵罐計算

根據(jù)生產(chǎn)大綱，年產(chǎn)細菌滅活疫苗650萬mL，滅活苗水相（細菌原液）：油相=25%：75%

則年需細菌原液

650萬mL/年×25%=162.5萬mL/年

年工作日按300天計，細菌液每5天可培養(yǎng)一批，全年可培養(yǎng)60批，每批需培養(yǎng)細菌原液（細菌培養(yǎng)的成功率為90%，細菌液的收獲率為90%，疫苗分裝成品率為90%。）

162.5萬mL/年÷60批/年÷90%÷ 90%÷90%≈3.7萬mL/批

細菌發(fā)酵罐裝量為罐容積的70%，則發(fā)酵罐的容積為：

3.7萬mL÷70%≈5.3萬mL=53L

故配置100L發(fā)酵罐一套，可滿足生產(chǎn)的要求，并預留一定的生產(chǎn)能力以滿足擴產(chǎn)的需要。

E.乳化分裝工序設備計算

根據(jù)生產(chǎn)大綱，滅活疫苗年產(chǎn)量為12650萬mL，共分為120批進行配苗乳化，則每批需配苗

12650萬mL/年÷120批/年≈100萬mL/批

配置一套1500L的乳化設備（含油佐劑制備罐1臺，乳化罐1臺，儲液罐1臺，高壓勻漿泵1臺），可滿足生產(chǎn)的需要。

液體灌裝機：

每批疫苗需分裝的瓶數(shù)為

100萬mL/批÷100mL/瓶=10000瓶/批（以100mL/瓶計）

選用2臺ZD-Ⅱ型全自動液體灌裝機，該機灌裝速度為60瓶/min，每小時可灌裝3600瓶，2 h可完成全部灌裝量，滿足生產(chǎn)的需要。

軋蓋機、貼簽機、熱風循環(huán)烘箱、脈動真空蒸汽滅菌器、細胞瓶洗瓶機等設備按生產(chǎn)能力配套設置。

參考文獻

[1] 中國獸藥典委員會.中國獸藥典[M].中國農(nóng)業(yè)出版社，2010.

[2] 中國建筑科學研究院.生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范[M].中國建筑工業(yè)出版社，2004.

[3] 潔凈廠房設計規(guī)范[M].中國計劃出版社，2001.endprint