王艷敏

摘 要：目的：確保KSZ620/43-L型隧道式滅菌干燥機(jī)按設(shè)定的滅菌參數(shù)對玻瓶進(jìn)行滅菌，能有效地達(dá)到滅菌除熱原效果，保證用于無菌藥品灌裝的玻瓶的無菌和無熱原。方法：用經(jīng)過校準(zhǔn)合格的溫度探頭分別對隧道式滅菌干燥機(jī)進(jìn)行連續(xù)三次熱分布、熱穿透及內(nèi)毒素挑戰(zhàn)測試，驗(yàn)證過程滅菌溫度設(shè)定為330 ℃，網(wǎng)帶運(yùn)行速度為43 Hz。結(jié)果：滅菌過程，隧道式滅菌干燥機(jī)腔體內(nèi)各探頭最大溫差小于15℃，隧道烘箱空載熱分布均勻。滿載熱穿透及內(nèi)毒素挑戰(zhàn)結(jié)果表明，滅菌過程，在設(shè)備滿載情況下，各探頭溫度FH值均>1365，滅菌后所有內(nèi)毒素檢驗(yàn)結(jié)果均為陰性，陽性對照檢驗(yàn)結(jié)果為陽性。因此，按照預(yù)期的滅菌參數(shù)進(jìn)行滅菌除熱原，滅菌過程隧道式滅菌干燥機(jī)熱分布均勻、滅菌除熱原有效。該設(shè)備符合滅菌設(shè)備設(shè)計(jì)及GMP要求。

關(guān)鍵詞：隧道烘箱 滅菌驗(yàn)證 熱分布 熱穿透 內(nèi)毒素挑戰(zhàn)

中圖分類號：TQ460.5 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）04（b）-0210-02

隧道式滅菌干燥機(jī)滅菌驗(yàn)證的目標(biāo)是，按預(yù)期的滅菌工藝參數(shù)對凍干粉針劑灌裝用玻瓶進(jìn)行滅菌，能保證用于無菌灌裝的玻瓶的無菌及無熱原。隧道式滅菌干燥機(jī)滅菌驗(yàn)證前應(yīng)確保設(shè)備的預(yù)熱段、滅菌段及冷卻段間的壓差符合：預(yù)熱段壓力<滅菌段壓力>冷卻段壓力；灌裝間對洗瓶間的壓差應(yīng)≥10 Pa；預(yù)熱段、滅菌段及冷卻段高效過濾器應(yīng)無泄漏。影響隧道式滅菌干燥機(jī)的滅菌效果有諸多因素，如網(wǎng)帶走帶頻率、滅菌溫度、風(fēng)量及壓差等。該文就KSZ620/43-L型隧道式滅菌干燥機(jī)的驗(yàn)證介紹如下，以便互相學(xué)習(xí)和借鑒。

1 器材與試劑

1.1 KSZ620/43-L型隧道式滅菌干燥機(jī)

該設(shè)備系用層流原理和熱空氣高速滅菌工藝，使整個輸送隧道在一密封系統(tǒng)內(nèi)完成對玻瓶的干燥、滅菌和冷卻；它利用層流原理和熱空氣高速滅菌工藝，可使玻瓶在隧道烘箱內(nèi)達(dá)到國家GB50073-2001標(biāo)準(zhǔn)，即潔凈度A級標(biāo)準(zhǔn)。設(shè)備走帶最大速度149 mm/min（50 Hz）、網(wǎng)帶寬度600 mm、滅菌段長度1320 mm）。

1.2 溫度驗(yàn)證儀

多通道數(shù)據(jù)采集器為美國福祿克2635A型，溫度計(jì)量干井爐為美國福祿克9144，熱電偶為英國歐米珈K型。

1.3 玻瓶

雙峰格雷斯海姆醫(yī)藥玻璃（丹陽）有限公司生產(chǎn)、規(guī)格7 mL、批號201202012。

1.4 內(nèi)毒素指示劑

湛江安度斯生物有限公司生產(chǎn)、批號110310、效價1000EU。

2 方法與結(jié)果

2.1 熱電偶校準(zhǔn)

熱分布前后用三點(diǎn)校準(zhǔn)法（低點(diǎn)溫度、驗(yàn)點(diǎn)溫度、高點(diǎn)溫度）分別對驗(yàn)證用的10個熱電偶進(jìn)行校準(zhǔn)，校準(zhǔn)時間設(shè)定為3 min，校準(zhǔn)精度為0.5 ℃。校準(zhǔn)過程如下：

（1）將驗(yàn)證儀的10個熱電偶置于溫度干井之中，打開溫度干井的電源，待其穩(wěn)定后，將驗(yàn)證儀打開使之處于測試狀態(tài)，進(jìn)行300 ℃校驗(yàn)，記錄數(shù)據(jù)并保持3 min。

（2）將驗(yàn)證儀的10個熱電偶置于溫度干井之中，打開溫度干井的電源，待穩(wěn)定在330 ℃后，將驗(yàn)證儀打開，使之處于測試狀態(tài)，進(jìn)行330 ℃校驗(yàn)，記錄數(shù)據(jù)并保持3 min。

（3）進(jìn)行350 ℃校驗(yàn)，校驗(yàn)過程同（2）。

合格標(biāo)準(zhǔn)：

熱電偶在確認(rèn)試驗(yàn)前后于300 ℃、330 ℃、350 ℃三個點(diǎn)校驗(yàn)，恒溫保持3分鐘，各熱電偶溫差≤±0.5 ℃。

（4）數(shù)據(jù)分析

在校準(zhǔn)的3個溫度點(diǎn)，驗(yàn)證用測試熱電偶與標(biāo)準(zhǔn)探頭的溫差最大值沒有超過0.5 ℃，因此，驗(yàn)證用測試探頭的精度和范圍符合規(guī)定要求。

2.2 熱分布試驗(yàn)

本試驗(yàn)的目的是檢查滅菌腔內(nèi)的分布情況及滅菌腔內(nèi)不同位置的偏差狀況，以確定可能存在的冷點(diǎn)。⑷

（1）設(shè)定滅菌溫度為330 ℃，網(wǎng)帶運(yùn)行速度為43 Hz，按隧道式滅菌干燥機(jī)操作程序運(yùn)轉(zhuǎn)設(shè)備，當(dāng)溫度升至設(shè)定滅菌溫度后以隧道式滅菌干燥機(jī)輸送網(wǎng)帶為邊界，將10個探頭分兩組用測試支架固定，間隔均勻放置在網(wǎng)帶上，啟動干燥機(jī)手動送帶控制，測試探頭隨網(wǎng)帶移動進(jìn)入走出烘箱滅菌段，用檢測儀直接記錄各測試探頭的溫度情況（圖1）。

（2）按上述空載（熱分布）測試（1），反復(fù)進(jìn)行3次驗(yàn)證測試過程。

（3）檢測后用檢測儀讀取、打印數(shù)據(jù)。

合格標(biāo)準(zhǔn)：滅菌過程，隧道烘箱內(nèi)記錄溫度數(shù)據(jù)，各點(diǎn)溫差在15 ℃內(nèi)。

（4）數(shù)據(jù)分析

空載第一次：冷點(diǎn)探頭號為5號、10號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)槔潼c(diǎn)區(qū)域（烘箱右側(cè)）；熱點(diǎn)探頭號為1號、6號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)闊狳c(diǎn)區(qū)域（烘箱左側(cè)）。兩組溫度探頭達(dá)到恒溫時，各探頭溫度間最大溫差14.47 ℃，最小溫度12.92 ℃，符合最大溫差小于15 ℃。

空載第二次：冷點(diǎn)探頭號為5號、10號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)槔潼c(diǎn)區(qū)域（烘箱右側(cè)）；熱點(diǎn)探頭號為1號、6號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)闊狳c(diǎn)區(qū)域（烘箱左側(cè)）。兩組溫度探頭達(dá)到恒溫時，各探頭溫度間最大溫差14.71 ℃，最小溫度9.12 ℃，符合最大溫差小于15 ℃。

空載第三次：冷點(diǎn)探頭號為5號、10號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)槔潼c(diǎn)區(qū)域（烘箱右側(cè)）；熱點(diǎn)探頭號為1號、6號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)闊狳c(diǎn)區(qū)域（烘箱左側(cè)）。兩組溫度探頭達(dá)到恒溫時，各探頭溫度間最大溫差14.54 ℃，最小溫度12.05 ℃，符合最大溫差小于15 ℃。

2.3 熱穿透試驗(yàn)

進(jìn)行熱穿透試驗(yàn)的目的是在熱分布試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，確定各溫度探頭在滅菌設(shè)定時間內(nèi)能夠獲得充分的滅菌保證值。溫度探頭應(yīng)插入玻瓶底部并將其固定。

（1）設(shè)定滅菌溫度為330 ℃，網(wǎng)帶運(yùn)行速度為43 Hz，按隧道式滅菌干燥機(jī)操作程序運(yùn)轉(zhuǎn)設(shè)備，當(dāng)溫度升至設(shè)定滅菌溫度后以隧道式滅菌干燥機(jī)輸送網(wǎng)帶為邊界，將10個探頭用測試支架固定，插入玻瓶中作為驗(yàn)證點(diǎn)，間隔均勻成一直線放置在網(wǎng)帶上，啟動聯(lián)動線機(jī)組，測試探頭隨網(wǎng)帶移動進(jìn)入走出烘箱滅菌段，用檢測儀直接記錄各測試探頭的溫度情況。

（2）按上述滿載（熱穿透）測試（1），反復(fù)進(jìn)行3次驗(yàn)證測試過程（圖2）。

（3）檢測后用檢測儀讀取、打印數(shù)據(jù)。

合格標(biāo)準(zhǔn)：熱穿透干燥滅菌的滅菌熱力強(qiáng)度FH不小于1365。

（4）數(shù)據(jù)分析（如表1）。

2.4 內(nèi)毒素指示劑挑戰(zhàn)

同步熱穿透試驗(yàn)，將10支內(nèi)毒素指示劑均勻分布在隧道腔室各溫度探頭附近，連續(xù)運(yùn)行3次，并對滅菌后的各EI指示劑取樣送微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，同時做陽性對照。

接受標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)干燥滅菌后，用靈敏度為0.125EU/ml鱟試劑進(jìn)行測定，陽性對照應(yīng)為陽性，樣品檢驗(yàn)應(yīng)為陰性，即內(nèi)毒素下降3個對數(shù)點(diǎn)。

檢測結(jié)果：（如表2）

結(jié)果表明，未滅指示劑培養(yǎng)結(jié)果呈陽性，被滅指示劑培養(yǎng)結(jié)果均呈陰性，指示劑滅菌后均已失活；滅菌結(jié)果細(xì)菌內(nèi)毒素挑戰(zhàn)合格。

3 結(jié)語

三次空載運(yùn)行結(jié)果表明，滅菌過程，隧道式滅菌干燥機(jī)腔體內(nèi)各探頭最大溫差小于15 ℃，隧道烘箱空載熱分布均勻；三次滿載熱穿透及內(nèi)毒素挑戰(zhàn)結(jié)果表明，滅菌過程，在設(shè)備滿載情況下，各探頭溫度FH值均>1365，滅菌后所有內(nèi)毒素檢驗(yàn)結(jié)果均為陰性，陽性對照檢驗(yàn)結(jié)果為陽性。因此，按照預(yù)期的滅菌參數(shù)進(jìn)行滅菌除熱原，滅菌過程隧道式滅菌干燥機(jī)熱分布均勻、滅菌除熱原有效。該設(shè)備符合滅菌設(shè)備設(shè)計(jì)及GMP要求。

參考文獻(xiàn)

[1] 國家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)證管理中心編寫，藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南（2003）.

[2] 國家食品藥品監(jiān)督管理局編寫，藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范及其附錄（2010年修訂）.

[3] 國家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)證中心編寫，藥品GMP指南.

[4] 郭桂芳，谷海燕.干熱滅菌系統(tǒng)除熱原效果驗(yàn)證方法的探討[期刊論文]-醫(yī)藥與保健.endprint

摘 要：目的：確保KSZ620/43-L型隧道式滅菌干燥機(jī)按設(shè)定的滅菌參數(shù)對玻瓶進(jìn)行滅菌，能有效地達(dá)到滅菌除熱原效果，保證用于無菌藥品灌裝的玻瓶的無菌和無熱原。方法：用經(jīng)過校準(zhǔn)合格的溫度探頭分別對隧道式滅菌干燥機(jī)進(jìn)行連續(xù)三次熱分布、熱穿透及內(nèi)毒素挑戰(zhàn)測試，驗(yàn)證過程滅菌溫度設(shè)定為330 ℃，網(wǎng)帶運(yùn)行速度為43 Hz。結(jié)果：滅菌過程，隧道式滅菌干燥機(jī)腔體內(nèi)各探頭最大溫差小于15℃，隧道烘箱空載熱分布均勻。滿載熱穿透及內(nèi)毒素挑戰(zhàn)結(jié)果表明，滅菌過程，在設(shè)備滿載情況下，各探頭溫度FH值均>1365，滅菌后所有內(nèi)毒素檢驗(yàn)結(jié)果均為陰性，陽性對照檢驗(yàn)結(jié)果為陽性。因此，按照預(yù)期的滅菌參數(shù)進(jìn)行滅菌除熱原，滅菌過程隧道式滅菌干燥機(jī)熱分布均勻、滅菌除熱原有效。該設(shè)備符合滅菌設(shè)備設(shè)計(jì)及GMP要求。

關(guān)鍵詞：隧道烘箱 滅菌驗(yàn)證 熱分布 熱穿透 內(nèi)毒素挑戰(zhàn)

中圖分類號：TQ460.5 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）04（b）-0210-02

隧道式滅菌干燥機(jī)滅菌驗(yàn)證的目標(biāo)是，按預(yù)期的滅菌工藝參數(shù)對凍干粉針劑灌裝用玻瓶進(jìn)行滅菌，能保證用于無菌灌裝的玻瓶的無菌及無熱原。隧道式滅菌干燥機(jī)滅菌驗(yàn)證前應(yīng)確保設(shè)備的預(yù)熱段、滅菌段及冷卻段間的壓差符合：預(yù)熱段壓力<滅菌段壓力>冷卻段壓力；灌裝間對洗瓶間的壓差應(yīng)≥10 Pa；預(yù)熱段、滅菌段及冷卻段高效過濾器應(yīng)無泄漏。影響隧道式滅菌干燥機(jī)的滅菌效果有諸多因素，如網(wǎng)帶走帶頻率、滅菌溫度、風(fēng)量及壓差等。該文就KSZ620/43-L型隧道式滅菌干燥機(jī)的驗(yàn)證介紹如下，以便互相學(xué)習(xí)和借鑒。

1 器材與試劑

1.1 KSZ620/43-L型隧道式滅菌干燥機(jī)

該設(shè)備系用層流原理和熱空氣高速滅菌工藝，使整個輸送隧道在一密封系統(tǒng)內(nèi)完成對玻瓶的干燥、滅菌和冷卻；它利用層流原理和熱空氣高速滅菌工藝，可使玻瓶在隧道烘箱內(nèi)達(dá)到國家GB50073-2001標(biāo)準(zhǔn)，即潔凈度A級標(biāo)準(zhǔn)。設(shè)備走帶最大速度149 mm/min（50 Hz）、網(wǎng)帶寬度600 mm、滅菌段長度1320 mm）。

1.2 溫度驗(yàn)證儀

多通道數(shù)據(jù)采集器為美國福祿克2635A型，溫度計(jì)量干井爐為美國福祿克9144，熱電偶為英國歐米珈K型。

1.3 玻瓶

雙峰格雷斯海姆醫(yī)藥玻璃（丹陽）有限公司生產(chǎn)、規(guī)格7 mL、批號201202012。

1.4 內(nèi)毒素指示劑

湛江安度斯生物有限公司生產(chǎn)、批號110310、效價1000EU。

2 方法與結(jié)果

2.1 熱電偶校準(zhǔn)

熱分布前后用三點(diǎn)校準(zhǔn)法（低點(diǎn)溫度、驗(yàn)點(diǎn)溫度、高點(diǎn)溫度）分別對驗(yàn)證用的10個熱電偶進(jìn)行校準(zhǔn)，校準(zhǔn)時間設(shè)定為3 min，校準(zhǔn)精度為0.5 ℃。校準(zhǔn)過程如下：

（1）將驗(yàn)證儀的10個熱電偶置于溫度干井之中，打開溫度干井的電源，待其穩(wěn)定后，將驗(yàn)證儀打開使之處于測試狀態(tài)，進(jìn)行300 ℃校驗(yàn)，記錄數(shù)據(jù)并保持3 min。

（2）將驗(yàn)證儀的10個熱電偶置于溫度干井之中，打開溫度干井的電源，待穩(wěn)定在330 ℃后，將驗(yàn)證儀打開，使之處于測試狀態(tài)，進(jìn)行330 ℃校驗(yàn)，記錄數(shù)據(jù)并保持3 min。

（3）進(jìn)行350 ℃校驗(yàn)，校驗(yàn)過程同（2）。

合格標(biāo)準(zhǔn)：

熱電偶在確認(rèn)試驗(yàn)前后于300 ℃、330 ℃、350 ℃三個點(diǎn)校驗(yàn)，恒溫保持3分鐘，各熱電偶溫差≤±0.5 ℃。

（4）數(shù)據(jù)分析

在校準(zhǔn)的3個溫度點(diǎn)，驗(yàn)證用測試熱電偶與標(biāo)準(zhǔn)探頭的溫差最大值沒有超過0.5 ℃，因此，驗(yàn)證用測試探頭的精度和范圍符合規(guī)定要求。

2.2 熱分布試驗(yàn)

本試驗(yàn)的目的是檢查滅菌腔內(nèi)的分布情況及滅菌腔內(nèi)不同位置的偏差狀況，以確定可能存在的冷點(diǎn)。⑷

（1）設(shè)定滅菌溫度為330 ℃，網(wǎng)帶運(yùn)行速度為43 Hz，按隧道式滅菌干燥機(jī)操作程序運(yùn)轉(zhuǎn)設(shè)備，當(dāng)溫度升至設(shè)定滅菌溫度后以隧道式滅菌干燥機(jī)輸送網(wǎng)帶為邊界，將10個探頭分兩組用測試支架固定，間隔均勻放置在網(wǎng)帶上，啟動干燥機(jī)手動送帶控制，測試探頭隨網(wǎng)帶移動進(jìn)入走出烘箱滅菌段，用檢測儀直接記錄各測試探頭的溫度情況（圖1）。

（2）按上述空載（熱分布）測試（1），反復(fù)進(jìn)行3次驗(yàn)證測試過程。

（3）檢測后用檢測儀讀取、打印數(shù)據(jù)。

合格標(biāo)準(zhǔn)：滅菌過程，隧道烘箱內(nèi)記錄溫度數(shù)據(jù)，各點(diǎn)溫差在15 ℃內(nèi)。

（4）數(shù)據(jù)分析

空載第一次：冷點(diǎn)探頭號為5號、10號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)槔潼c(diǎn)區(qū)域（烘箱右側(cè)）；熱點(diǎn)探頭號為1號、6號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)闊狳c(diǎn)區(qū)域（烘箱左側(cè)）。兩組溫度探頭達(dá)到恒溫時，各探頭溫度間最大溫差14.47 ℃，最小溫度12.92 ℃，符合最大溫差小于15 ℃。

空載第二次：冷點(diǎn)探頭號為5號、10號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)槔潼c(diǎn)區(qū)域（烘箱右側(cè)）；熱點(diǎn)探頭號為1號、6號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)闊狳c(diǎn)區(qū)域（烘箱左側(cè)）。兩組溫度探頭達(dá)到恒溫時，各探頭溫度間最大溫差14.71 ℃，最小溫度9.12 ℃，符合最大溫差小于15 ℃。

空載第三次：冷點(diǎn)探頭號為5號、10號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)槔潼c(diǎn)區(qū)域（烘箱右側(cè)）；熱點(diǎn)探頭號為1號、6號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)闊狳c(diǎn)區(qū)域（烘箱左側(cè)）。兩組溫度探頭達(dá)到恒溫時，各探頭溫度間最大溫差14.54 ℃，最小溫度12.05 ℃，符合最大溫差小于15 ℃。

2.3 熱穿透試驗(yàn)

進(jìn)行熱穿透試驗(yàn)的目的是在熱分布試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，確定各溫度探頭在滅菌設(shè)定時間內(nèi)能夠獲得充分的滅菌保證值。溫度探頭應(yīng)插入玻瓶底部并將其固定。

（1）設(shè)定滅菌溫度為330 ℃，網(wǎng)帶運(yùn)行速度為43 Hz，按隧道式滅菌干燥機(jī)操作程序運(yùn)轉(zhuǎn)設(shè)備，當(dāng)溫度升至設(shè)定滅菌溫度后以隧道式滅菌干燥機(jī)輸送網(wǎng)帶為邊界，將10個探頭用測試支架固定，插入玻瓶中作為驗(yàn)證點(diǎn)，間隔均勻成一直線放置在網(wǎng)帶上，啟動聯(lián)動線機(jī)組，測試探頭隨網(wǎng)帶移動進(jìn)入走出烘箱滅菌段，用檢測儀直接記錄各測試探頭的溫度情況。

（2）按上述滿載（熱穿透）測試（1），反復(fù)進(jìn)行3次驗(yàn)證測試過程（圖2）。

（3）檢測后用檢測儀讀取、打印數(shù)據(jù)。

合格標(biāo)準(zhǔn)：熱穿透干燥滅菌的滅菌熱力強(qiáng)度FH不小于1365。

（4）數(shù)據(jù)分析（如表1）。

2.4 內(nèi)毒素指示劑挑戰(zhàn)

同步熱穿透試驗(yàn)，將10支內(nèi)毒素指示劑均勻分布在隧道腔室各溫度探頭附近，連續(xù)運(yùn)行3次，并對滅菌后的各EI指示劑取樣送微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，同時做陽性對照。

接受標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)干燥滅菌后，用靈敏度為0.125EU/ml鱟試劑進(jìn)行測定，陽性對照應(yīng)為陽性，樣品檢驗(yàn)應(yīng)為陰性，即內(nèi)毒素下降3個對數(shù)點(diǎn)。

檢測結(jié)果：（如表2）

結(jié)果表明，未滅指示劑培養(yǎng)結(jié)果呈陽性，被滅指示劑培養(yǎng)結(jié)果均呈陰性，指示劑滅菌后均已失活；滅菌結(jié)果細(xì)菌內(nèi)毒素挑戰(zhàn)合格。

3 結(jié)語

三次空載運(yùn)行結(jié)果表明，滅菌過程，隧道式滅菌干燥機(jī)腔體內(nèi)各探頭最大溫差小于15 ℃，隧道烘箱空載熱分布均勻；三次滿載熱穿透及內(nèi)毒素挑戰(zhàn)結(jié)果表明，滅菌過程，在設(shè)備滿載情況下，各探頭溫度FH值均>1365，滅菌后所有內(nèi)毒素檢驗(yàn)結(jié)果均為陰性，陽性對照檢驗(yàn)結(jié)果為陽性。因此，按照預(yù)期的滅菌參數(shù)進(jìn)行滅菌除熱原，滅菌過程隧道式滅菌干燥機(jī)熱分布均勻、滅菌除熱原有效。該設(shè)備符合滅菌設(shè)備設(shè)計(jì)及GMP要求。

參考文獻(xiàn)

[1] 國家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)證管理中心編寫，藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南（2003）.

[2] 國家食品藥品監(jiān)督管理局編寫，藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范及其附錄（2010年修訂）.

[3] 國家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)證中心編寫，藥品GMP指南.

[4] 郭桂芳，谷海燕.干熱滅菌系統(tǒng)除熱原效果驗(yàn)證方法的探討[期刊論文]-醫(yī)藥與保健.endprint

摘 要：目的：確保KSZ620/43-L型隧道式滅菌干燥機(jī)按設(shè)定的滅菌參數(shù)對玻瓶進(jìn)行滅菌，能有效地達(dá)到滅菌除熱原效果，保證用于無菌藥品灌裝的玻瓶的無菌和無熱原。方法：用經(jīng)過校準(zhǔn)合格的溫度探頭分別對隧道式滅菌干燥機(jī)進(jìn)行連續(xù)三次熱分布、熱穿透及內(nèi)毒素挑戰(zhàn)測試，驗(yàn)證過程滅菌溫度設(shè)定為330 ℃，網(wǎng)帶運(yùn)行速度為43 Hz。結(jié)果：滅菌過程，隧道式滅菌干燥機(jī)腔體內(nèi)各探頭最大溫差小于15℃，隧道烘箱空載熱分布均勻。滿載熱穿透及內(nèi)毒素挑戰(zhàn)結(jié)果表明，滅菌過程，在設(shè)備滿載情況下，各探頭溫度FH值均>1365，滅菌后所有內(nèi)毒素檢驗(yàn)結(jié)果均為陰性，陽性對照檢驗(yàn)結(jié)果為陽性。因此，按照預(yù)期的滅菌參數(shù)進(jìn)行滅菌除熱原，滅菌過程隧道式滅菌干燥機(jī)熱分布均勻、滅菌除熱原有效。該設(shè)備符合滅菌設(shè)備設(shè)計(jì)及GMP要求。

關(guān)鍵詞：隧道烘箱 滅菌驗(yàn)證 熱分布 熱穿透 內(nèi)毒素挑戰(zhàn)

中圖分類號：TQ460.5 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）04（b）-0210-02

隧道式滅菌干燥機(jī)滅菌驗(yàn)證的目標(biāo)是，按預(yù)期的滅菌工藝參數(shù)對凍干粉針劑灌裝用玻瓶進(jìn)行滅菌，能保證用于無菌灌裝的玻瓶的無菌及無熱原。隧道式滅菌干燥機(jī)滅菌驗(yàn)證前應(yīng)確保設(shè)備的預(yù)熱段、滅菌段及冷卻段間的壓差符合：預(yù)熱段壓力<滅菌段壓力>冷卻段壓力；灌裝間對洗瓶間的壓差應(yīng)≥10 Pa；預(yù)熱段、滅菌段及冷卻段高效過濾器應(yīng)無泄漏。影響隧道式滅菌干燥機(jī)的滅菌效果有諸多因素，如網(wǎng)帶走帶頻率、滅菌溫度、風(fēng)量及壓差等。該文就KSZ620/43-L型隧道式滅菌干燥機(jī)的驗(yàn)證介紹如下，以便互相學(xué)習(xí)和借鑒。

1 器材與試劑

1.1 KSZ620/43-L型隧道式滅菌干燥機(jī)

該設(shè)備系用層流原理和熱空氣高速滅菌工藝，使整個輸送隧道在一密封系統(tǒng)內(nèi)完成對玻瓶的干燥、滅菌和冷卻；它利用層流原理和熱空氣高速滅菌工藝，可使玻瓶在隧道烘箱內(nèi)達(dá)到國家GB50073-2001標(biāo)準(zhǔn)，即潔凈度A級標(biāo)準(zhǔn)。設(shè)備走帶最大速度149 mm/min（50 Hz）、網(wǎng)帶寬度600 mm、滅菌段長度1320 mm）。

1.2 溫度驗(yàn)證儀

多通道數(shù)據(jù)采集器為美國福祿克2635A型，溫度計(jì)量干井爐為美國福祿克9144，熱電偶為英國歐米珈K型。

1.3 玻瓶

雙峰格雷斯海姆醫(yī)藥玻璃（丹陽）有限公司生產(chǎn)、規(guī)格7 mL、批號201202012。

1.4 內(nèi)毒素指示劑

湛江安度斯生物有限公司生產(chǎn)、批號110310、效價1000EU。

2 方法與結(jié)果

2.1 熱電偶校準(zhǔn)

熱分布前后用三點(diǎn)校準(zhǔn)法（低點(diǎn)溫度、驗(yàn)點(diǎn)溫度、高點(diǎn)溫度）分別對驗(yàn)證用的10個熱電偶進(jìn)行校準(zhǔn)，校準(zhǔn)時間設(shè)定為3 min，校準(zhǔn)精度為0.5 ℃。校準(zhǔn)過程如下：

（1）將驗(yàn)證儀的10個熱電偶置于溫度干井之中，打開溫度干井的電源，待其穩(wěn)定后，將驗(yàn)證儀打開使之處于測試狀態(tài)，進(jìn)行300 ℃校驗(yàn)，記錄數(shù)據(jù)并保持3 min。

（2）將驗(yàn)證儀的10個熱電偶置于溫度干井之中，打開溫度干井的電源，待穩(wěn)定在330 ℃后，將驗(yàn)證儀打開，使之處于測試狀態(tài)，進(jìn)行330 ℃校驗(yàn)，記錄數(shù)據(jù)并保持3 min。

（3）進(jìn)行350 ℃校驗(yàn)，校驗(yàn)過程同（2）。

合格標(biāo)準(zhǔn)：

熱電偶在確認(rèn)試驗(yàn)前后于300 ℃、330 ℃、350 ℃三個點(diǎn)校驗(yàn)，恒溫保持3分鐘，各熱電偶溫差≤±0.5 ℃。

（4）數(shù)據(jù)分析

在校準(zhǔn)的3個溫度點(diǎn)，驗(yàn)證用測試熱電偶與標(biāo)準(zhǔn)探頭的溫差最大值沒有超過0.5 ℃，因此，驗(yàn)證用測試探頭的精度和范圍符合規(guī)定要求。

2.2 熱分布試驗(yàn)

本試驗(yàn)的目的是檢查滅菌腔內(nèi)的分布情況及滅菌腔內(nèi)不同位置的偏差狀況，以確定可能存在的冷點(diǎn)。⑷

（1）設(shè)定滅菌溫度為330 ℃，網(wǎng)帶運(yùn)行速度為43 Hz，按隧道式滅菌干燥機(jī)操作程序運(yùn)轉(zhuǎn)設(shè)備，當(dāng)溫度升至設(shè)定滅菌溫度后以隧道式滅菌干燥機(jī)輸送網(wǎng)帶為邊界，將10個探頭分兩組用測試支架固定，間隔均勻放置在網(wǎng)帶上，啟動干燥機(jī)手動送帶控制，測試探頭隨網(wǎng)帶移動進(jìn)入走出烘箱滅菌段，用檢測儀直接記錄各測試探頭的溫度情況（圖1）。

（2）按上述空載（熱分布）測試（1），反復(fù)進(jìn)行3次驗(yàn)證測試過程。

（3）檢測后用檢測儀讀取、打印數(shù)據(jù)。

合格標(biāo)準(zhǔn)：滅菌過程，隧道烘箱內(nèi)記錄溫度數(shù)據(jù)，各點(diǎn)溫差在15 ℃內(nèi)。

（4）數(shù)據(jù)分析

空載第一次：冷點(diǎn)探頭號為5號、10號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)槔潼c(diǎn)區(qū)域（烘箱右側(cè)）；熱點(diǎn)探頭號為1號、6號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)闊狳c(diǎn)區(qū)域（烘箱左側(cè)）。兩組溫度探頭達(dá)到恒溫時，各探頭溫度間最大溫差14.47 ℃，最小溫度12.92 ℃，符合最大溫差小于15 ℃。

空載第二次：冷點(diǎn)探頭號為5號、10號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)槔潼c(diǎn)區(qū)域（烘箱右側(cè)）；熱點(diǎn)探頭號為1號、6號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)闊狳c(diǎn)區(qū)域（烘箱左側(cè)）。兩組溫度探頭達(dá)到恒溫時，各探頭溫度間最大溫差14.71 ℃，最小溫度9.12 ℃，符合最大溫差小于15 ℃。

空載第三次：冷點(diǎn)探頭號為5號、10號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)槔潼c(diǎn)區(qū)域（烘箱右側(cè)）；熱點(diǎn)探頭號為1號、6號，所運(yùn)行區(qū)域?yàn)闊狳c(diǎn)區(qū)域（烘箱左側(cè)）。兩組溫度探頭達(dá)到恒溫時，各探頭溫度間最大溫差14.54 ℃，最小溫度12.05 ℃，符合最大溫差小于15 ℃。

2.3 熱穿透試驗(yàn)

進(jìn)行熱穿透試驗(yàn)的目的是在熱分布試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，確定各溫度探頭在滅菌設(shè)定時間內(nèi)能夠獲得充分的滅菌保證值。溫度探頭應(yīng)插入玻瓶底部并將其固定。

（1）設(shè)定滅菌溫度為330 ℃，網(wǎng)帶運(yùn)行速度為43 Hz，按隧道式滅菌干燥機(jī)操作程序運(yùn)轉(zhuǎn)設(shè)備，當(dāng)溫度升至設(shè)定滅菌溫度后以隧道式滅菌干燥機(jī)輸送網(wǎng)帶為邊界，將10個探頭用測試支架固定，插入玻瓶中作為驗(yàn)證點(diǎn)，間隔均勻成一直線放置在網(wǎng)帶上，啟動聯(lián)動線機(jī)組，測試探頭隨網(wǎng)帶移動進(jìn)入走出烘箱滅菌段，用檢測儀直接記錄各測試探頭的溫度情況。

（2）按上述滿載（熱穿透）測試（1），反復(fù)進(jìn)行3次驗(yàn)證測試過程（圖2）。

（3）檢測后用檢測儀讀取、打印數(shù)據(jù)。

合格標(biāo)準(zhǔn)：熱穿透干燥滅菌的滅菌熱力強(qiáng)度FH不小于1365。

（4）數(shù)據(jù)分析（如表1）。

2.4 內(nèi)毒素指示劑挑戰(zhàn)

同步熱穿透試驗(yàn)，將10支內(nèi)毒素指示劑均勻分布在隧道腔室各溫度探頭附近，連續(xù)運(yùn)行3次，并對滅菌后的各EI指示劑取樣送微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，同時做陽性對照。

接受標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)干燥滅菌后，用靈敏度為0.125EU/ml鱟試劑進(jìn)行測定，陽性對照應(yīng)為陽性，樣品檢驗(yàn)應(yīng)為陰性，即內(nèi)毒素下降3個對數(shù)點(diǎn)。

檢測結(jié)果：（如表2）

結(jié)果表明，未滅指示劑培養(yǎng)結(jié)果呈陽性，被滅指示劑培養(yǎng)結(jié)果均呈陰性，指示劑滅菌后均已失活；滅菌結(jié)果細(xì)菌內(nèi)毒素挑戰(zhàn)合格。

3 結(jié)語

三次空載運(yùn)行結(jié)果表明，滅菌過程，隧道式滅菌干燥機(jī)腔體內(nèi)各探頭最大溫差小于15 ℃，隧道烘箱空載熱分布均勻；三次滿載熱穿透及內(nèi)毒素挑戰(zhàn)結(jié)果表明，滅菌過程，在設(shè)備滿載情況下，各探頭溫度FH值均>1365，滅菌后所有內(nèi)毒素檢驗(yàn)結(jié)果均為陰性，陽性對照檢驗(yàn)結(jié)果為陽性。因此，按照預(yù)期的滅菌參數(shù)進(jìn)行滅菌除熱原，滅菌過程隧道式滅菌干燥機(jī)熱分布均勻、滅菌除熱原有效。該設(shè)備符合滅菌設(shè)備設(shè)計(jì)及GMP要求。

參考文獻(xiàn)

[1] 國家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)證管理中心編寫，藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南（2003）.

[2] 國家食品藥品監(jiān)督管理局編寫，藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范及其附錄（2010年修訂）.

[3] 國家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)證中心編寫，藥品GMP指南.

[4] 郭桂芳，谷海燕.干熱滅菌系統(tǒng)除熱原效果驗(yàn)證方法的探討[期刊論文]-醫(yī)藥與保健.endprint