趙 鵑，蔡 力，劉 洲，廖 菁，韓 亮，王海江，楊榮芳，武文博，曹 強(qiáng)，張 璇，鄭 蘭

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院，四川 成都 610072)

IS1200全自動化學(xué)發(fā)光測定儀是首批被遴選為創(chuàng)新醫(yī)療器械產(chǎn)品應(yīng)用示范工程(四川)示范產(chǎn)品，是“儀器+校準(zhǔn)品+試劑”全自動化的免疫分析系統(tǒng)，為免疫診斷提供了整體解決方案。IS1200以化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)為原理，使用磁性微粒子為免疫固相，通過儀器實現(xiàn)免疫分析過程的全自動化操作，可以同時對樣本進(jìn)行不同分析項目的聯(lián)合檢測，并達(dá)到試劑分析性能的最優(yōu)化。該設(shè)備實現(xiàn)樣本記錄、加樣、試劑加注、清洗、檢測、廢棄品收集等過程的自動化，極大程度地減少了手工操作程序，大大降低生物安全事故和人工錯誤操作發(fā)生概率。為驗證該檢測系統(tǒng)的性能，我院檢驗科組織進(jìn)行了相關(guān)評價，在2013年6～8月對激素類項目中的促甲狀腺激素(TSH)，以及兩對半定量中的乙肝表面抗原(HBsAg)進(jìn)行了檢測，主要從性能(精密度、靈敏度)、安全性(攜帶污染率)等方面與對照設(shè)備進(jìn)行對比分析評價。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 生物原材料 精密度樣本:具有不同臨床意義二個水平的混合血清;攜帶污染樣本:TSH高值樣本，濃度不低于1000 mIU/L;HBsAg強(qiáng)陽性樣本:COI≥300;蒸餾水或去離子水;靈敏度樣本，TSH靈敏度測定樣本:WHO標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(81/565);HBsAg靈敏度測定樣本:WHO標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(00/588);4%BSA稀釋液;臨床比對樣本，TSH臨床樣本:總數(shù)60例，要求所收集的樣本濃度應(yīng)覆蓋整個檢測范圍，超過參考區(qū)間上限臨床樣本數(shù)不少于總數(shù)的50%［3］;HBsAg臨床樣本:總數(shù)60例，要求陰性樣本與陽性樣本各30例［4］?；颊哐鍢?biāo)本來源于四川省人民醫(yī)院城東病區(qū)的門診和住院病人，共計483份。

1.1.2 儀器與試劑IS1200全自動化學(xué)發(fā)光測定儀及配套試劑 醫(yī)院臨床所采用的貝克曼全自動化學(xué)發(fā)光儀1800及原裝試劑和安圖化學(xué)發(fā)光免疫儀配套試劑。

1.2 方法

1.2.1 批內(nèi)精密度 在同一條件下，使用IS1200全自動化學(xué)發(fā)光測定儀及配套試劑，將兩個水平樣本分別連續(xù)測定20次，計算均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。所有實驗必須在2個小時內(nèi)完成。

1.2.2 中間精密度 使用IS1200全自動化學(xué)發(fā)光測定儀及配套試劑，將二個水平樣本連續(xù)測定5個工作日，每個工作日連續(xù)測定4次，每個水平分別共20例數(shù)據(jù)，計算其均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。

1.2.3 攜帶污染 高濃度或強(qiáng)陽性樣本和蒸餾水或去離子水作為樣本，按照高濃度樣品、高濃度樣品、高濃度樣品、蒸餾水、蒸餾水、蒸餾水的順序為一組，在分析儀上進(jìn)行測定，共進(jìn)行6組測定。取每一組的測定中第4個樣品的測定值為A4，第6個樣品的測定值為A6，按照公式計算每組的攜帶污染率，然后再計算平均攜帶污染率。若因試劑盒線性范圍限制而使得系統(tǒng)無法準(zhǔn)確檢測TSH高于1000mIU/L的樣品，可采用稀釋推算法，在測完三組蒸餾水后，再測量三組稀釋100倍后的高濃度樣品，以經(jīng)推算后的高濃度值平均值作為TSH高濃度樣品值。

式中:A4為每組中第4個樣品的測定值;A6為每組中第6個樣品的測定值;A原為高濃度樣品三次測定結(jié)果平均值:(A1+A2+A3)/3。

1.2.4 靈敏度 ①TSH靈敏度測定［1］:WHO標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(81/565)用基質(zhì)(4%BSA)稀釋成0.04、0.02、0.01 mIU/L、測定基質(zhì)、0.01、0.02、0.04 各 20 次，分別計算濃度值和發(fā)光值的均值、SD和CV。計算最低檢測限LoD=Mean+2SD(基質(zhì));濃度值LoD=發(fā)光值LoD在基質(zhì)和0.02的直線回歸中對應(yīng)的濃度值。計算最低定量限LoQ:各點的濃度值～CV值進(jìn)行軟件曲線擬合。計算CV=20%對應(yīng)的濃度值。②HBsAg靈敏度測定［2］:WHO標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(00/588)用基質(zhì)(4%BSA)稀釋成0.1mIU/L。測定基質(zhì)和0.1各20次，分別計算發(fā)光值的均值、SD和CV。計算最低檢測限LoD:發(fā)光值LoD=Mean+2SD(基質(zhì));濃度值LoD=發(fā)光值LoD在基質(zhì)和0.1的直線回歸中對應(yīng)的濃度值。

1.2.5 臨床樣本比對 使用醫(yī)院臨床所采用的貝克曼全自動化學(xué)發(fā)光儀I800及原裝試劑和安圖化學(xué)發(fā)光免疫儀配套試劑測定60例臨床樣本后，再用IS 1200全自動化學(xué)發(fā)光測定儀及配套試劑測定該批樣本，然后分別記錄測定結(jié)果。所有試驗必須進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，只有在室內(nèi)質(zhì)控合格的情況下，當(dāng)天的實驗室數(shù)據(jù)才有效。

1.2.6 可接受性判斷

1.2.6.1 精密度可接受性判斷 TSH批內(nèi)精密度結(jié)果分析:CV≤6.25%，即衛(wèi)生部室間質(zhì)量評估允許誤差(PT)的1/4。TSH天間精密度結(jié)果分析:CV≤8.4%，即衛(wèi)生部室間質(zhì)量評估允許誤差(PT)的1/3。HBsAg批內(nèi)精密度結(jié)果分析:CV≤10%(廠家說明書標(biāo)示);HBsAg天間精密度結(jié)果分析:CV≤15%(廠家說明書標(biāo)示)。

1.2.6.2 攜帶污染可接受性判斷 攜帶污染率≤10PPM。

1.2.6.3 比對實驗可接受性判斷 ①TSH數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析［6］:以醫(yī)院臨床所用儀器及配套試劑測定結(jié)果為X，IS 1200全自動化學(xué)發(fā)光測定及及配套試劑測定結(jié)果為Y，二者作線性回歸，計算Y=Bx+a，r2。要求 r2≥0.95。②HBsAg數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析［5］:根據(jù)樣本編號分別記錄比對系統(tǒng)和待評價系統(tǒng)測定結(jié)果以及換算為定性結(jié)果，采用四格表進(jìn)行統(tǒng)計，統(tǒng)計真陽性數(shù)、假陽性數(shù)、真陰性數(shù)、假陰性數(shù)。真陽性數(shù):比對系統(tǒng)中試驗的陽性個數(shù);假陽性數(shù):待評價系統(tǒng)中試驗的陽性個數(shù);真陰性數(shù):待評價系統(tǒng)中試驗的陰性個數(shù);假陰性數(shù):比對系統(tǒng)中試驗的陰性個數(shù)進(jìn)行Kappa一致性分析:Kappa系數(shù)＞0.8為高度一致，認(rèn)為兩系統(tǒng)等效;0.4＜Kappa系數(shù)＜0.8為一致，需進(jìn)行陽性符合率和陰性符合比較并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析;Kappa系數(shù)＜0.4為兩系統(tǒng)不一致，兩系統(tǒng)不等效。陽性符合率、陰性符合率滿足臨床要求，認(rèn)為兩個方法或產(chǎn)品等效;相差過大，則需重新設(shè)計臨床方案。

2 結(jié)果

2.1 精密度 表1顯示批內(nèi)和中間精密度的驗證結(jié)果的CV值均低于判斷標(biāo)準(zhǔn)，證明該設(shè)備精密度良好。

表1 HBsAg、TSH批內(nèi)和中間精密度

2.2 攜帶污染率 表2顯示儀器的攜帶污染率均低于判斷標(biāo)準(zhǔn)，證明該設(shè)備在工作中的攜帶污染能夠被臨床接受，安全性可靠。

表2 HBsAg、TSH攜帶污染率

2.3 靈敏度(最低檢測限LoD)HBsAg最低能檢測到 0.0231 mIU/L，TSH最低能檢測到 0.0013 mIU/L，完全能滿足臨床要求。

2.4 臨床樣本比對邁克IS1200和安圖檢測系統(tǒng)比對HBsAg檢測結(jié)果，邁克IS1200與貝克曼全自動化學(xué)發(fā)光儀I800比對TSH檢測結(jié)果，結(jié)果均一致，見表3、圖1。

表3 邁克IS1200和安圖檢測系統(tǒng)HBsAg比對結(jié)果

3 討論

通過我院的臨床使用結(jié)果對比分析可以看出:①IS1200全自動化學(xué)發(fā)光測定儀定性和定量分析的靈敏度均完全滿足臨床需求，保證低濃度標(biāo)本結(jié)果的準(zhǔn)確性;②儀器的精密度完全符合國家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，能保證檢測結(jié)果的穩(wěn)定性，檢測結(jié)果與其他同類產(chǎn)品之間的符合程度也非常高;③樣本加注過程中均使用一次性TIP頭和反應(yīng)杯，避免了攜帶污染，在反應(yīng)過程中采用了專利設(shè)計的非接觸式反應(yīng)液混勻裝置，在保證了充分混勻反應(yīng)液的前提下又徹底杜絕了樣本攜帶污染的問題;④設(shè)備實現(xiàn)樣本記錄、樣本加注、試劑加注、清洗、檢測、廢棄品收集等過程的自動化，極大程度地減少了手工操作程序，并且IS1200全自動化學(xué)發(fā)光免疫測定儀擁有全中文操作界面和智能化軟件設(shè)計，更好地實現(xiàn)人機(jī)對話，使臨床操作更方便、簡單，減輕工作人員負(fù)擔(dān)，提高工作效率。還大大降低了生物安全事故和人工錯誤操作發(fā)生幾率;⑤該設(shè)備在保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的前提下，且試劑及耗材價格均比進(jìn)口同類設(shè)備便宜，購買及維護(hù)成本較低。遠(yuǎn)低于國外同類產(chǎn)品，約低20%;⑥儀器配備了全中文操作系統(tǒng)，可與實驗室現(xiàn)有LIS系統(tǒng)相接，支持雙向通訊，并完成樣本流和數(shù)據(jù)流的智能化管理。

綜上所述，邁克IS 1200全自動化學(xué)發(fā)光測定儀擁有先進(jìn)的硬件設(shè)備、智能化的軟件設(shè)計，有極強(qiáng)的抗攜帶污染能力，具有靈敏度高、檢測范圍寬、檢測速度快及檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠等特點，是一臺值得推薦的國產(chǎn)先進(jìn)醫(yī)療設(shè)備。

［1］鄭沁，黃亨健，張國福，等.Roche E170檢測系統(tǒng)測定促甲狀腺激素(TSH)分析靈敏度的驗證［J］.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2007，22(3):58-60.

［2］曹艷林，劉德貝.Chemclin 600檢測系統(tǒng)測定乙型肝炎病毒表面抗原分析靈敏度與功能靈敏度的驗證［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，34(10):1290-1292.

［3］楊永業(yè)，張秀明.臨床檢驗方法學(xué)評價［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2008:142-152.

［4］張俊峰，許現(xiàn)偉.不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果評價［J］.中國實用醫(yī)藥，2013，27(第27 期):129-130

［5］孫蓉，魯軍.電化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附實驗測定乙型肝炎標(biāo)志物的比較與探討［J］.檢驗醫(yī)學(xué)，2013，28(第4期):351-352.

［6］張衛(wèi)國，吳國球.自動化學(xué)發(fā)光免疫分析法測定血清T3、T4和TSH 的評價［J］.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2005，33(2):111-113.