高 陽，楊敏飛，蘇婭萍，霍雅玉，米 潔，王欣芮，尤曉娟，張海龍（西安交通大學藥學院，西安 710061）

老山芹（Heracleum dissectum）又名東北牛防風、山芹菜、土當歸，為傘形科（Umbelliferae）獨活屬多年生草本植物，主要分布在黑龍江、吉林和新疆等地。它是一種藥食兩用的植物，其幼嫩莖葉是美味的蔬菜，具有特殊的香味，深受當?shù)厝说南矏郏o葉中含有豐富的膳食纖維，可以促進胃腸蠕動，清理腸道垃圾。它具有顯著的降血壓作用以及降血脂、降血糖、祛風、除濕、止痛等作用［1－2］，尤其是對高血壓病人具有顯著的降壓作用，而對正常人的血壓無任何影響。

獨活屬植物的分類及鑒定一直很混亂，其屬間和屬內(nèi)的劃分也一直是傘形科系統(tǒng)學研究的一大難題［3］，因此本研究通過對老山芹的化學成分的分析不但對獨活屬植物的分類具有重要的參考意義，同時鑒于老山芹的多種藥用活性，通過首次對老山芹根中親脂性化學成分的GC－MS分析，為今后系統(tǒng)分離鑒定老山芹的化學成分及進一步闡明其活性成分具有一定的參考價值。

1 儀器與試藥

1.1 儀 器 日 本 島 津 （Shimadzu）公 司 GC－MS／QP2010氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀。

1.2 試藥 老山芹的根于2011年9月采自黑龍江省北安市，經(jīng)西安交通大學醫(yī)學部藥學院牛曉峰教授鑒定為傘形科獨活屬植物Heracleum dissectum Ledeb.的根。甲醇、石油醚、氯仿為分析純，乙酸乙酯為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品的制備 取老山芹的干燥根4.0kg，剪成1～2cm的小段，甲醇回流提取3次，每次2h，合并提取液并減壓回收溶劑得到甲醇總提物，甲醇總提物分散于水中，先后用石油醚和氯仿分別萃取，得石油醚層68.3g，氯仿層85.1g。

2.2 GC－MS分析條件

2.2.1 石油醚部分 GC條件 RTX－5MS柱（30m×0.25mm，0.25μm）；柱溫：始溫150℃（保持5min），以8℃·min－1升溫至220℃，再以5℃·min－1升溫至280℃（保持15min），氣化溫度為280℃；分流比5∶1。

石油醚部分MS條件 EI離子源，電離能量70eV；離子源溫度200℃；接口溫度280℃；質(zhì)量掃描范圍50～600 m／z；溶劑峰切除時間0.5s，起測時間3.00min，結(jié)束時間40.75min；NIST147質(zhì)譜圖計算機檢索數(shù)據(jù)庫。

2.2.2 氯仿部分GC條件 色譜柱型號與石油醚部位相同；柱溫：始溫150℃，20℃·min－1升溫至230℃，1℃·min－1升溫至240℃，5℃·min－1升溫至250℃，最后8℃·min－1升溫至280℃（保持5min）；分流比10∶1。

氯仿部分MS條件 質(zhì)譜檢測起測時間3.00min，結(jié)束時間24.75min；其余條件均與石油醚部位相同。

2.3 結(jié)果 對老山芹的石油醚部分和氯仿部分的總離子流圖中各峰分別經(jīng)質(zhì)譜掃描后得到質(zhì)譜圖，通過NIST147質(zhì)譜圖計算機檢索數(shù)據(jù)庫進行檢索，鑒定出石油醚部分19個化合物，氯仿部分14個化合物，按面積歸一化法計算各化合物的相對百分含量。結(jié)果分別見圖1和圖2及表1和表2。

圖1 石油醚層的總離子流圖Fig.1 Total ion chromatogram of petroleum ether fraction

圖2 氯仿層的總離子流圖Fig.2 Total ion chromatogram of chloroform fraction

表1 石油醚層親脂性化學成分分析結(jié)果Tab.1 Results of the petroleum ether fraction in the roots of Heracleum dissectum

3 討論

老山芹根的GC－MS分析結(jié)果表明，石油醚層中甾體類（谷甾醇，豆甾醇及其衍生物及6β，6β－二溴－6，7－亞甲基睪丸激素）化合物的含量為主要成分，占52.86%，香豆素類化合物為第二大成分，含量共32.78%，其他的長鏈烷醇、烯、烯醇及酯含量共9.75%，此外還有0.84%的薁類化合物以及1.99%的三環(huán)衍生物等。氯仿部分的14個化合物中絕大多數(shù)為香豆素類化合物，其含量高達54.14%。從兩部分的分析結(jié)果可以看出，老山芹根中尤其是氯仿層的親脂性成分主要是香豆素類化合物。

香豆素類化合物具有多種多樣的生物活性，如：抗 病 毒 及 抗 HIV 活 性［4－7］，抗 菌 和 抗 寄 生 蟲 活性［8－11］，抗癌活性［12－15］，抗炎和抗氧化活性［16－18］，以及抗糖尿病和抗高血壓活性［19－21］等。老山芹發(fā)揮降壓作用的物質(zhì)基礎可能就是其中所含有的香豆素類化合物，為驗證這一推測和闡明其中的降壓活性成分，系統(tǒng)的化學成分研究和降壓活性研究正在進行。

表2 氯仿部分化學成分分析結(jié)果Tab.2 Results of the chloroform fraction in the roots of Heracleum dissectum

市面上獨活品種很多，主要來自傘形科當歸屬和獨活屬植物，而這2個屬的主要化學成分為香豆素類，目前已經(jīng)從不同品種的獨活中分離得到的香豆素類化合物達70多種［22－23］。通過 GC－MS分析得知，老山芹根中的化學成分絕大多數(shù)為香豆素類化合物，這不僅為老山芹的歸屬提供了依據(jù)，同時也為老山芹的開發(fā)利用奠定了實驗基礎。

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