王婕　尚秀葵

摘要：目的研究灸法治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的最新進(jìn)展。方法從神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)、細(xì)胞因子、蛋白、信號(hào)分子的調(diào)控及鎮(zhèn)痛和抗炎免疫作用等6個(gè)方面對(duì)自2008年至今灸法治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)行總結(jié)論述。結(jié)論通過(guò)以上總結(jié)提出問(wèn)題并在此基礎(chǔ)上對(duì)今后動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的研究方向和研究思路進(jìn)行展望。

關(guān)鍵詞：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；灸法；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

中圖分類號(hào)：R593文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1007-2349（2014）05-0084-03

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis，RA）是以類風(fēng)濕致病因子侵犯關(guān)節(jié)和周圍組織為主的一種慢性全身性自身免疫性疾病[1]，屬于中醫(yī)“痹證”范疇?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究中醫(yī)藥治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎具有良好的前景，為廣泛運(yùn)用艾灸有效治療關(guān)節(jié)炎，探討其作用機(jī)制研究，現(xiàn)將近幾年來(lái)有關(guān)艾灸對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究按其作用機(jī)制綜述如下。

1神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)的調(diào)整

灸法是通過(guò)神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)來(lái)調(diào)整內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能[2]。周海燕[3]研究艾灸腎俞、足三里穴對(duì)RA大鼠炎癥的影響，發(fā)現(xiàn)艾灸能明顯抑制實(shí)驗(yàn)性RA大鼠的炎癥反應(yīng)，調(diào)控RA大鼠CRH、ACTH、GC的異常水平，但在腹腔注射GR激動(dòng)劑后這些作用均消失，提示GR激動(dòng)劑在艾灸的抗炎作用及其對(duì)神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的調(diào)整中具有重要地位和作用。

2鎮(zhèn)痛作用

方若儀等[4]觀察溫和灸對(duì)實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎大鼠足趾腫脹及痛閾的影響，發(fā)現(xiàn)艾灸組大鼠的機(jī)械痛閾明顯高于模型組，且艾灸組的熱疼痛潛伏期較長(zhǎng)，表明溫和灸能顯著提高實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎大鼠的機(jī)械痛閾，且有一定的鎮(zhèn)痛作用。鄭保主[5]研究發(fā)現(xiàn)艾灸能提高大鼠下丘腦POMC mRNA和PDYN mRNA的表達(dá)，增強(qiáng)機(jī)體的鎮(zhèn)痛能力，從而起到提高壓痛閾的效果，以此證明艾灸具有鎮(zhèn)痛作用。

3對(duì)細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用

目前細(xì)胞因子已對(duì)關(guān)節(jié)炎癥和關(guān)節(jié)損傷具有重要的作用[6]。高駿等[7]發(fā)現(xiàn)艾灸腎俞和足三里可以抑制Th1致炎因子且促進(jìn)Th2抗炎因子分泌，發(fā)揮艾灸的整體調(diào)節(jié)及雙向良性調(diào)整作用，調(diào)整Th1/Th2細(xì)胞因子失衡，可以從從整體上治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，恢復(fù)RA過(guò)程中的致炎因子與抑炎因子失衡。并且研究[8]艾灸腎俞、足三里可能通過(guò)下調(diào)血清褪黑激素水平，促進(jìn)抗炎因子IL-4分泌，調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞因子平衡，從而發(fā)揮抗炎作用，對(duì)緩解RA慢性病程以及RA預(yù)后都可能起到積極的治療意義。羅磊等[9]觀察艾灸腎俞、足三里對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型大鼠跖關(guān)節(jié)中細(xì)胞因子的影響，證明艾灸具有降低局部跖關(guān)節(jié)中促炎癥細(xì)胞因子IL-1β和TNF-α，提高T細(xì)胞生長(zhǎng)因子IL-2的效應(yīng)，可良性調(diào)整Th1/Th2平衡，糾正細(xì)胞免疫紊亂。劉明雪等[10]研究艾灸對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠血清TNF-α、IFN-γ的影響差異，TNF-α是一種主要由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的單核因子，IFN-γ又稱免疫干擾素，IFN-γ對(duì)關(guān)節(jié)腫脹、晨僵改善明顯，因此，降低TNF-α水平、升高IFN-γ是治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎獲效環(huán)節(jié)之一，且證明艾灸降低TNF-α水平和升高IFN-γ水平作用更為顯著。周峰等[11]通過(guò)觀察艾灸對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型大鼠血清及滑膜組織細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）的影響，與模型組相比，艾灸可降低類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠血清中ICAM-1含量，可使滑膜組織中ICAM-1表達(dá)顯著降低，從而抑制炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)、黏附、跨內(nèi)皮移動(dòng)，使滑膜炎癥逐漸好轉(zhuǎn)，關(guān)節(jié)腫脹、關(guān)節(jié)僵硬等癥狀得到緩解。楊涵淇等[12]研究發(fā)現(xiàn)不同灸法治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎有明顯的抗炎效應(yīng)，且以隔姜灸作用最為顯著；不同灸法抑制IL-1、TNF-α炎性反應(yīng)因子表達(dá)可能是其發(fā)揮抗炎效應(yīng)的重要機(jī)制之一。

4對(duì)蛋白的調(diào)節(jié)作用

魏錚等[13]對(duì)實(shí)驗(yàn)性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠艾灸治療后，滑膜細(xì)胞CyclinD1和CDK4蛋白的表達(dá)降低，表明CyclinD1和CDK4可能是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞異常增殖的關(guān)鍵蛋白之一。CyclinD1和CDK4蛋白的上調(diào)，使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞內(nèi)形成的CyclinD1和CDK4復(fù)合物明顯增多，繼而完成細(xì)胞異常增殖，而艾灸對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的滑膜細(xì)胞異常增殖有抑制作用，而且可能是通過(guò)抑制CyclinD1和CDK4蛋白的過(guò)度表達(dá)而完成的。馬騰等[14]觀察不同灸法（溫和灸和疤痕灸）對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠下丘腦HSP7O的表達(dá)，與模型組相比，溫和灸組和瘢痕灸組可以降低下丘腦HSP70的表達(dá)，提高炎癥組織HSP7O的表達(dá)，不同灸法（溫和灸和瘢痕灸）抗炎效應(yīng)的機(jī)制可能是灸法的溫?zé)岽碳ふ{(diào)節(jié)了中樞器官下丘腦HSP70的表達(dá)，從而激發(fā)了炎癥組織HSP7O的大量表達(dá)。彭傳玉等[15]觀察艾灸對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠的治療作用及其發(fā)生機(jī)制，發(fā)現(xiàn)艾灸治療能顯著改善大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的癥狀，調(diào)節(jié)關(guān)節(jié)滑膜中 Fas/FasL 蛋白的表達(dá)，使滑膜細(xì)胞逐漸凋亡，這是艾灸發(fā)揮溫通作用的有效機(jī)制之一。

5對(duì)免疫功能的影響

艾灸能改善機(jī)體免疫功能是通過(guò)抗炎免疫作用達(dá)到的[16]。李建武等[17]采用隔物溫和灸治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠，觀察大鼠趾圍變化及血清中的sIL-2R的變化，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示隔物溫和灸能抑制血清中sIL-2R分泌，減輕類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠的關(guān)節(jié)腫脹，并且隔物溫和灸還能抑制類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠血清中IL-1B、TNF-A的分泌水平，減輕類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠足跖關(guān)節(jié)的腫脹程度。

6對(duì)信號(hào)分子的調(diào)控

高駿等[18]對(duì)下丘腦-垂體-腎上腺軸在艾灸治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜組織核轉(zhuǎn)錄因子信號(hào)通路中的作用進(jìn)行了相關(guān)性分析，深入探討艾灸治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎抗炎效應(yīng)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)發(fā)生、發(fā)展的作用機(jī)制。認(rèn)為艾灸可以通過(guò)調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-腎上腺軸的功能抑制類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病及遷延的過(guò)程。楊馨等[19]采用基因芯片檢測(cè)及生物信息分析技術(shù)觀察艾灸對(duì)滑膜細(xì)胞JAK-STAT信號(hào)通路相關(guān)信號(hào)分子表達(dá)的影響，表示艾灸腎俞可明顯改善實(shí)驗(yàn)性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎家兔膝關(guān)節(jié)腫脹，揭示艾灸具有明顯的抗炎消腫作用。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎家兔造模后滑膜細(xì)胞PK通路上大量信號(hào)分子表達(dá)上調(diào)，而經(jīng)艾灸腎俞治療后，這些相關(guān)信號(hào)分子的表達(dá)均下調(diào)。說(shuō)明艾灸對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的滑膜細(xì)胞MAPK信號(hào)通路中相關(guān)信號(hào)分子表達(dá)具有調(diào)控作用。endprint

7展望

目前該病病因及發(fā)病機(jī)制尚不明確，縱觀近年來(lái)的大量研究，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病被認(rèn)為是一個(gè)受抗原驅(qū)動(dòng)的連鎖反應(yīng)的病理過(guò)程。炎癥、細(xì)胞分子及自身的免疫反應(yīng)是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)生及發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[20]。而遺傳、內(nèi)分泌和環(huán)境因素等則加劇了類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的易感性。其中免疫異?？赡苁侵饕蛩?。而受遺傳因素的影響，機(jī)體在體內(nèi)、外致病因素的反應(yīng)作用下，致免疫功能平衡失調(diào)，反應(yīng)亢進(jìn)，產(chǎn)生自身抗體，激發(fā)各個(gè)血管、細(xì)胞，產(chǎn)生致炎性物質(zhì)，引起炎癥，再演變成軟骨和骨質(zhì)等組織損傷。西醫(yī)對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷和治療上針對(duì)性較強(qiáng)，大多要求依靠客觀的理化檢查指標(biāo)，但是結(jié)果癥狀緩解、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)恢復(fù)正常并不意味著病情得到控制。就此，中醫(yī)可以防治疾病并注重人體自身內(nèi)在機(jī)能狀態(tài)的調(diào)整，還可起到預(yù)防的作用。艾灸治療關(guān)節(jié)炎的機(jī)制研究表明，艾灸不僅可以緩解關(guān)節(jié)形態(tài)腫脹，保護(hù)軟骨和骨質(zhì)，同時(shí)可調(diào)節(jié)自身免疫反應(yīng)，影響關(guān)節(jié)組織的腫脹、炎癥與增殖，起到抗炎免疫的作用。

綜上所述，艾灸治療RA的實(shí)驗(yàn)研究已開(kāi)展開(kāi)展起來(lái)。灸法可以調(diào)整RA機(jī)體的機(jī)能活動(dòng)，有很好的療效。但仍存在諸多問(wèn)題：（1）目前艾灸對(duì)于類風(fēng)濕的機(jī)理研究多為溫和灸或單一灸法作為干預(yù)手段的研究對(duì)象，而不同艾灸模式（如鋪灸、隔物灸等）對(duì)RA的實(shí)驗(yàn)性研究相對(duì)較少，基于艾灸方法不同治療實(shí)驗(yàn)性RA的療效比較和作用機(jī)制尚需進(jìn)一步深入細(xì)致的研究；（2）灸法可治療多種疾病，但取效的關(guān)鍵與其灸時(shí)、灸量密切相關(guān)，選取方法針對(duì)不同程度的疾病能起到針對(duì)性的治療效果，但目前這方面的研究較少，沒(méi)有將灸時(shí)、灸量與療效的關(guān)系聯(lián)系在一起，尚需展開(kāi)研究。（3）以上實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果與臨床療效的評(píng)判仍存在一定距離，尚需將二者緊密聯(lián)系起來(lái)，將動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與臨床研究相結(jié)合，將作用機(jī)制與療效相結(jié)合，以進(jìn)一步探明灸法治療關(guān)節(jié)炎的機(jī)理，更好地提高臨床療效。（4）艾灸對(duì)于細(xì)胞因子和蛋白等研究尚多，但目前主要是集中在其中個(gè)別的幾種細(xì)胞因子及蛋白，尚不能用以說(shuō)明全部的細(xì)胞因子和蛋白，所研究的個(gè)別指標(biāo)也不夠典型，仍需按照其分類進(jìn)行多方面展開(kāi)研究與探索。（5）以上研究表明灸法對(duì)神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)、細(xì)胞因子、蛋白、信號(hào)分子的調(diào)控及鎮(zhèn)痛和抗炎免疫作用等方面的研究已取得一定進(jìn)展，但仍需要擴(kuò)展至其他各個(gè)領(lǐng)域加以研究，目前已有人從RNA領(lǐng)域探索艾灸機(jī)制，Stanczyk等[21]發(fā)現(xiàn)，與骨關(guān)節(jié)炎患者相比，在RA患者關(guān)節(jié)滑液及滑膜組織中miRNA-155高表達(dá)，同時(shí)RA患者滑液CD14+細(xì)胞和外周血CD14+細(xì)胞的miRNA-155的水平也升高。Nakasa等[22]報(bào)道，miRNA-146在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病中起重要的作用，研究證實(shí)miRNA-146a在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)滑膜組織中的表達(dá)主要集中在原始CD68+巨噬細(xì)胞中，也可見(jiàn)其存在于少量CD3+T 細(xì)胞及CD79+B細(xì)胞中。目前，已經(jīng)有越來(lái)越多的研究證實(shí)miRNA異常與RA的發(fā)生密切相關(guān)，但其作用機(jī)制還不是很清楚，基于現(xiàn)階段的研究，miRNA很可能作為新的診斷標(biāo)志和治療靶點(diǎn)應(yīng)用于臨床，相信miRNA將會(huì)給類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎疾病的診療帶來(lái)新的希望[23]。如果能從艾灸方向找到與這一新指標(biāo)的相應(yīng)關(guān)系，那么對(duì)灸法治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎將會(huì)有新的突破。

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（收稿日期：2014-02-24）endprint