徐詠書 ，方正旭 ，張 清 ，孫 堅(jiān)

（南昌大學(xué)第四附屬醫(yī)院a.干部病房；b.呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科，南昌 330003）

腦卒中是危害人類生命健康的主要疾病之一，肺炎是腦卒中后常見的并發(fā)癥之一，也是腦卒中患者病情加重和死亡的主要原因之一，卒中后肺炎的發(fā)生率為 7%～22%［1］。 2003 年，Hilker等［2-3］提出了卒中相關(guān)性肺炎的概念，即原無(wú)肺部感染的卒中患者罹患感染性肺實(shí)質(zhì)（含肺泡壁即廣義上的肺間質(zhì)）炎癥。 1974 年，Howard 等［4-5］報(bào)道了卒中后存在免疫抑制狀態(tài)，而卒中誘導(dǎo)免疫抑制是卒中相關(guān)性肺炎的重要因素。為此，本研究探討了卒中相關(guān)性肺炎患者血清Th1/Th2細(xì)胞因子［干擾素-γ（IFN-γ），白細(xì)胞介素-4（IL-4）］水平的變化及意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2012年1月至2013年7月在南昌大學(xué)第四附屬醫(yī)院住院的腦血管病患者70例，其中卒中相關(guān)性肺炎（卒中相關(guān)性肺炎組）34例，均符合卒中相關(guān)性肺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］。排除與肺炎臨床表現(xiàn)相近的疾病，如肺結(jié)核、肺部腫瘤、非感染性肺間質(zhì)病、肺水腫、肺不張、肺栓塞等。卒中（卒中組）36例。選擇同期在本院門診體檢的健康體檢者（健康對(duì)照組）30例。3組的性別、年齡比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均 P＞0.05）。 見表 1。

表1 3組一般資料的比較

1.2 標(biāo)本采集與檢測(cè)方法

標(biāo)本采集:3組晨空腹抽取肘靜脈血2 mL，至肝素抗凝的血液采集管中。采集后，于20～28℃ 室溫靜置 30～60 min。 3000 r·min-1離心 5 min， 取血清，放置-20℃ 冰箱保存，待測(cè)。

檢測(cè)方法:1）采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELISA法）檢測(cè)3組血清IFN-γ、IL-4水平，試劑盒購(gòu)自上海船夫生物科技有限公司，具體操作步驟見試劑盒說(shuō)明書。2）采用 Anthos 2010酶標(biāo)儀（鄭州安圖生物工程公司，450nm）檢測(cè)各組吸光度值（OD值）。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算公式，IFN-γ:x=（y+0.0019）/5.1414×100，IL-4:x=（y+0.0083）/4.3484×100。x分別為 IFN-γ、IL-4的濃度，y為ELISA實(shí)驗(yàn)測(cè)得的OD值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

與健康對(duì)照組、卒中組比較，卒中相關(guān)性肺炎組血清IFN-γ、IFN-γ/IL-4比值均明顯降低（均P＜0.05），血清 IL-4 水平明顯升高（P＜0.05）。 見表 2。

表2 3組IFN-γ、IL-4和IFN-γ/IL-4比值的比較，ρ/（ng·L-1）

表2 3組IFN-γ、IL-4和IFN-γ/IL-4比值的比較，ρ/（ng·L-1）

*P＜0.05與健康對(duì)照組比較，#P＜0.05與卒中組比較。

組別 n IFN-γ IL-4 IFN-γ/IL-4比值卒中組 36 20.78±3.94 2.64±0.17 7.90±1.64卒中相關(guān)性肺炎組 3415.82±1.93*# 3.89±0.82*# 4.22±0.93*#健康對(duì)照組 30 25.75±2.34 2.47±0.47 10.80±2.32

3 討論

急性腦卒中患者發(fā)生感染的概率為16%～27%，可能與免疫系統(tǒng)功能紊亂有密切的關(guān)系［6］。根據(jù)神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)理論，正常生理?xiàng)l件下，中樞神經(jīng)系統(tǒng)參與免疫系統(tǒng)的調(diào)控。腦卒中發(fā)病后，調(diào)控能力減弱或紊亂，繼而出現(xiàn)與細(xì)胞免疫功能失調(diào)相關(guān)的感染性疾?。?］。

人活化T細(xì)胞依據(jù)所分泌細(xì)胞因子的不同而分為 Th1（如 IFN-γ）和 Th2（如 lL-4）。 Prass 等［8］發(fā)現(xiàn)腦缺血局部促炎癥細(xì)胞因子增加，同時(shí)發(fā)現(xiàn)通過(guò)激活交感腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)，導(dǎo)致快速、持久的細(xì)胞免疫功能抑制，表現(xiàn)為單核細(xì)胞活性下降、T細(xì)胞減少和Th1/Th2轉(zhuǎn)換，從而使IFN-γ產(chǎn)生減少，引起自發(fā)性全身性細(xì)菌感染和肺炎。本研究結(jié)果顯示，與健康對(duì)照組、卒中組比較，卒中相關(guān)性肺炎組血清 IFN-γ、IFN-γ/IL-4 比值均明顯降低（均 P＜0.05），血清 IL-4水平明顯升高（P＜0.05）。

除了細(xì)胞因子 IFN-γ 和 lL-4，Johansson 等［9］研究發(fā)現(xiàn)，腦損傷后TNF-α、IL-6及IL-1β等細(xì)胞因子產(chǎn)生增多，導(dǎo)致下丘腦-垂體-腎上腺軸功能紊亂，使這些腺體合成和釋放激素異常，作用于胸腺和淋巴細(xì)胞，使T細(xì)胞功能下降。同樣，Woiciechowsky等［10］研究發(fā)現(xiàn)，急性腦缺血患者腦內(nèi) TNF-α、IL-1β及IL-6等細(xì)胞因子增加，從而在預(yù)先沒(méi)有全身炎癥反應(yīng)的情況下，通過(guò)抑制性神經(jīng)內(nèi)分泌免疫調(diào)節(jié)機(jī)制，產(chǎn)生全身抗炎癥反應(yīng)綜合征，抑制淋巴細(xì)胞功能。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，單核細(xì)胞失活，可致免疫功能不全，影響其抗原呈遞功能，促炎癥細(xì)胞因子釋放受到抑制，并發(fā)感染的風(fēng)險(xiǎn)增加。

為了進(jìn)一步更多地了解卒中相關(guān)性肺炎與免疫抑制之間的關(guān)系，本課題組將在后續(xù)的研究中探討TNF-α、IL-6和IL-1β在卒中相關(guān)性肺炎患者中的水平，以期更好地提高卒中相關(guān)性肺炎的免疫治療效果。

［1］郭偉，張杰.關(guān)注卒中相關(guān)性肺炎［J］.中華內(nèi)科雜志，2011，50（3）:191-192.

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［3］卒中相關(guān)性肺炎診治中國(guó)專家共識(shí)組.卒中相關(guān)性肺炎診治中國(guó)專家共識(shí)［J］.中華內(nèi)科雜志，2010，49（12）:1075-1078.

［4］Howard R J,Simmons R L.Acquired immunologic deficiencies after trauma and surgical procedures ［J］.Surg Gynecol Obstet，1974，139（5）:771-782.

［5］Dirnagl U，Klehmet J，Braun J S，et al.Stroke-induced immunodepression:experimental evidence and clinical relevance［J］.Stroke，2007，38（S 2）:S770-S773.

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［10］Woiciechowsky C，Sch?ning B，Lanksch W R，et al.Mechanisms of brain-mediated systemic anti-inflammatory syndrome causing immunodepression［J］.J MolMed （Berl）,1999，77（11）:769-780.