殷巍 王亮 馬方明 王曉明 韓志偉

作者單位：014040 內(nèi)蒙古自治區(qū)，包頭市中心醫(yī)院心外科

含酮替芬的罌粟堿液對(duì)靜脈“橋”血管保護(hù)作用的研究

殷巍 王亮 馬方明 王曉明 韓志偉

作者單位：014040 內(nèi)蒙古自治區(qū)，包頭市中心醫(yī)院心外科

目的探討并對(duì)比分析含富馬酸酮替芬的罌粟堿液與常規(guī)罌粟堿保存液對(duì)冠脈旁路移植術(shù)靜脈“橋”血管的保護(hù)作用，選擇能最大限度地保護(hù)靜脈血管壁內(nèi)皮細(xì)胞（VEC）及血管內(nèi)膜完整性的保存液，提高其在臨床上行冠脈旁路移植術(shù)后大隱靜脈“橋”血管的遠(yuǎn)期通暢率。方法篩選20例行冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)（CABG）的患者，取其CABG術(shù)后剩余的大隱靜脈（GSV）并分割成2段，常溫下分別保存在常規(guī)罌粟堿液（對(duì)照組）及含富馬酸酮替芬的罌粟堿液（實(shí)驗(yàn)組）中各1 h。①采用酶聯(lián)免疫分析法（ELISA法）檢測(cè)GSV“橋”血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1（ICAM-1）濃度的表達(dá)值；②利用高倍光鏡觀察血管“橋”肌層的肌纖維板、內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)及單位面積血管內(nèi)皮細(xì)胞的死亡數(shù)目；③采用ELISA法檢測(cè)血管內(nèi)皮素-1（ET-1）濃度的表達(dá)情況。結(jié)果①實(shí)驗(yàn)組ICAM-1濃度的表達(dá)值低于常規(guī)對(duì)照組，光鏡下“橋”血管內(nèi)皮肌層肌纖維板及單位面積VEC的死亡分級(jí)中Ⅰ級(jí)損傷低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級(jí)損傷差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。②實(shí)驗(yàn)組內(nèi)皮細(xì)胞ET-1的含量略低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論含富馬酸酮替芬的罌粟堿液能夠有效地抑制靜脈“橋”血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附因子的表達(dá)，降低單位面積VEC的死亡數(shù)目及細(xì)胞器的損傷程度。在CABG術(shù)中可以選取含富馬酸酮替芬的罌粟堿液作為橋血管的保存液，更好地保持術(shù)后遠(yuǎn)期的通暢性。

冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)； 內(nèi)皮細(xì)胞； 遠(yuǎn)期通暢率； 保存液

冠狀動(dòng)脈旁路移植手術(shù)（coronary artery bypass graft，CABG）是目前國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的治療冠心病最有效的方法之一[1]?，F(xiàn)已證明，在靜脈“橋”再狹窄的病理發(fā)展過(guò)程中，組胺釋放及平滑肌細(xì)胞增生占據(jù)了重要作用[2]。富馬酸酮替芬具有拮抗組胺H1受體、抑制血管平滑肌增生痙攣并提高NO合酶表達(dá)等作用[3]。研究表明，在手術(shù)離取大隱靜脈（GSV）時(shí)操作輕柔并以含富馬酸酮替芬的保存液保存GSV“橋”血管，能一定程度上改善“橋”血管內(nèi)膜內(nèi)皮細(xì)胞及肌層纖維板的結(jié)構(gòu)，起到保護(hù)“橋”血管肌層肌纖維板結(jié)構(gòu)及血管內(nèi)膜、內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)的相對(duì)完整性。本課題就是從GSV“橋”血管保存液方面著手研究。目前國(guó)內(nèi)外利用含有富馬酸酮替芬罌粟堿保存液的報(bào)道較少，且酮替芬能拮抗組胺H1受體、抑制血管平滑肌增生痙攣等作用已經(jīng)得到證實(shí)[4]。

1 材料與方法

1．1 標(biāo)本來(lái)源 篩選20例于包頭市中心醫(yī)院心血管外科（2009年1月至2010年1月）行CABG的住院患者，分別取其冠脈旁路移植術(shù)后剩余的大隱靜脈。

1．2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)步驟 本實(shí)驗(yàn)分兩個(gè)階段進(jìn)行。第一階段：篩選20例行CABG的患者（20例大隱靜脈均為同一組手術(shù)人員離?。∑涔诿}旁路移植術(shù)后剩余的大隱靜脈分成2段，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）的標(biāo)本每段重約3 g，HE染色試驗(yàn)標(biāo)本長(zhǎng)度約2 cm。分為兩組：實(shí)驗(yàn)組（含富馬酸酮替芬的罌粟堿液組）n=20；對(duì)照組（常規(guī)嬰粟堿液組）n=20。兩組均采用相同的擴(kuò)充液、相同的擴(kuò)張壓強(qiáng)及擴(kuò)充時(shí)間，兩組分別用不同的保存液各保存1 h進(jìn)行比較。以上各標(biāo)本按實(shí)驗(yàn)要求分別保存在0.9%鹽水和15%甲醛中，ELISA實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本予-60℃冰箱中保存。保存液的成分及濃度詳細(xì)的配置方法[5,6]：對(duì)照組，肝素（6250 U/ml）0.5 ml+罌粟堿鹽 360 mg的林格液300 ml；實(shí)驗(yàn)組，在對(duì)照組保存液中加入富馬酸酮替芬（加拿大MYDrags產(chǎn)），并將濃度調(diào)至100 μg/ml。

第二階段：標(biāo)本各保存1 h。①將大隱靜脈標(biāo)本分別取1 cm用石蠟包埋切片后經(jīng)HE染色，利用光鏡觀察內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、肌纖維板等的損傷情況[7]。②血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附因子-1（ICAM-1）的標(biāo)本處理：切割標(biāo)本，稱取量1 g，加入磷酸緩沖液（PBS液，pH=7.4），保持溫度在 2℃～8℃（本實(shí)驗(yàn)控制在4℃，數(shù)據(jù)由預(yù)實(shí)驗(yàn)獲得），利用勻漿器充分勻漿，用DL7M-12L離心機(jī)離心3～5 min（轉(zhuǎn)速2500 r/min），取離心后的上清液2 ml，利用ELISA法檢測(cè)兩組ICAM-1濃度的表達(dá)值。③內(nèi)皮素-1（ET-1）標(biāo)本的處理：將組織吸去血跡，切割成質(zhì)量1 g的段，加入1 g蒸餾水（H2O）細(xì)細(xì)研磨8 min，40℃水浴中6 min，勻漿，溫度4℃；離心機(jī)高速離心（3000 r/min）15 min后取上清液，用ELISA法測(cè)定ET-1濃度。

光鏡下比較上述兩組保存液保存后的GSV內(nèi)膜、肌層肌纖維板及VEC的損傷情況；通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ICAM-1濃度的表達(dá)值及ET-1含量的不同，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組經(jīng)SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)統(tǒng)計(jì)對(duì)比后，獲得對(duì)GSV損傷最小的保存液，以此為臨床提供增加GSV“橋”血管遠(yuǎn)期通暢的理論依據(jù)。

1.2.2 觀察血管細(xì)胞損傷的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 光鏡：根據(jù)每高倍鏡視野下血管內(nèi)膜的表層內(nèi)皮細(xì)胞及肌纖維板所占比例分為4級(jí)：比例＞75%為Ⅰ級(jí)，50%～75%為Ⅱ級(jí)，25%～50%為Ⅲ級(jí)，＜25%為Ⅳ級(jí)[8]。

1.2.3 采取各實(shí)驗(yàn)方法的依據(jù)

1.2.3.1 光鏡下觀察血管細(xì)胞情況 光鏡下觀察VEC的形態(tài)、結(jié)構(gòu)及肌層纖維板等的損傷變化，依據(jù)上述分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí)，從而對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，這符合國(guó)內(nèi)外的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.3.2 ELISA法檢測(cè)ICAM-1的濃度表達(dá)值 采用組織勻漿法，測(cè)量ICAM-1表達(dá)的濃度，通過(guò)兩組保存液對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞濃度的不同表達(dá)情況，判斷兩組保存液的不同保存效果。該方法在國(guó)內(nèi)外都有應(yīng)用，可以使實(shí)驗(yàn)結(jié)果相對(duì)準(zhǔn)確。

1.2.3.3 ELISA法檢測(cè)ET-1 將組織制成勻漿，3000 r/min離心后取上清液，檢測(cè)ET-1濃度的表達(dá)，通過(guò)兩組保存液對(duì)血管ET-1濃度的表達(dá)差異，判斷兩組保存液的不同保存效果。該方法基于目前國(guó)內(nèi)外對(duì)ET-1表達(dá)水平與血管粥樣硬化（AS）致使血管狹窄的研究[9]，并且這與國(guó)內(nèi)外的相關(guān)報(bào)道一致。采用該方法，可以使實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較準(zhǔn)確，且更有說(shuō)服力。

1．3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有的數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)分析軟件處理。ELISA實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)分析（四格表χ2檢驗(yàn)），同質(zhì)受試對(duì)象間的資料采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組光鏡結(jié)果比較 含富馬酸酮替芬的罌粟堿液作為GSV橋血管保存液保存后的血管，利用光鏡觀察其內(nèi)皮細(xì)胞脫落情況，Ⅰ級(jí)損傷占90%，Ⅱ級(jí)損傷占10%，Ⅲ級(jí)損傷無(wú)，Ⅳ級(jí)損傷無(wú)，管壁固有膜、基層細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞很少變性；常規(guī)罌粟堿保存液作為GSV橋血管保存液保存后的血管，利用光鏡觀察其內(nèi)皮細(xì)胞脫落情況，Ⅰ級(jí)損傷占55%，Ⅱ級(jí)損傷占40%，Ⅲ級(jí)損傷占5%，無(wú)Ⅳ級(jí)損傷，管壁固有膜、肌層細(xì)胞排列較紊亂，細(xì)胞變形較多。（見(jiàn)表1，圖1～3）。觀察結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，Ⅰ級(jí)損傷差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級(jí)損傷均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 兩組經(jīng)不同保存液保存后光鏡結(jié)果比較（例）

2．2 兩組ICAM-1比較 應(yīng)用含富馬酸酮替芬的罌粟堿保存液保存后的“橋”血管，ELISA法檢測(cè)ICAM-1的濃度表達(dá)值，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組ICAM-1濃度分別為（32.20±7.70）ng/ml和（36.69±5.75）ng/ml，實(shí)驗(yàn)組ICAM-1濃度明顯低于常規(guī)罌粟堿組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-2.454，P＜0.05）。

2.3 兩組ET-1比較 應(yīng)用含富馬酸酮替芬的罌粟堿保存液保存后的“橋”血管，ELISA法檢測(cè)ET-1的濃度表達(dá)情況，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組ET-1濃度分別為（21.10±7.30）ng/L 和（21.69±7.71）ng/L，實(shí)驗(yàn)組ET-1濃度低于常規(guī)罌粟堿組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-2.117，P＜0.05）。

3 討論

目前，冠狀動(dòng)脈旁路移植手術(shù)是治療冠心病最有效的方法之一。動(dòng)脈管腔雖然比大隱靜脈有較高的遠(yuǎn)期通暢率，術(shù)后10年通暢率達(dá)到90%，但自體大隱靜脈也有易于獲得、材料豐富、安全性能好等獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，長(zhǎng)期以來(lái)一直被臨床上作為標(biāo)準(zhǔn)的搭橋材料[2]。但隨著時(shí)間延長(zhǎng)，其缺點(diǎn)也逐漸為心臟外科醫(yī)生所掌握。長(zhǎng)期隨訪結(jié)果表明，冠狀動(dòng)脈搭橋術(shù)后10年僅有60%的移植靜脈保持通暢[3]?？梢?jiàn)，CABG術(shù)后靜脈橋血管再狹窄嚴(yán)重影響了冠心病患者的預(yù)后。因此，如何提高靜脈橋血管的遠(yuǎn)期通暢率成為目前冠心病外科領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。橋血管獲取過(guò)程中的牽拉、充盈、保存條件及缺血缺氧環(huán)境，都可能直接或間接地引起橋血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷、脫落及體液因子的改變，引起血管內(nèi)皮功能障礙，促進(jìn)橋血管粥樣硬化形成，從而影響CABG的成功率和遠(yuǎn)期通暢率[8,9]。為了減輕對(duì)橋血管內(nèi)皮的損傷程度，將CABG橋血管放入保存液中進(jìn)行保存。保存液的種類有肝素化的生理鹽水、罌粟堿保存液、硝酸甘油-維拉帕米保存液（gv-保存液）等，臨床上常用罌粟堿保存液對(duì)橋血管進(jìn)行保護(hù)。本課題從CABG橋血管保存液的角度進(jìn)行研究，為尋求新型保存液，增加對(duì)橋血管內(nèi)皮細(xì)胞的進(jìn)一步保護(hù)，提高橋血管的遠(yuǎn)期通暢率，進(jìn)而改善CABG術(shù)后患者的生活質(zhì)量提供理論依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)前通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)得出實(shí)驗(yàn)組均優(yōu)于對(duì)照組的結(jié)論。

從大隱靜脈的形態(tài)結(jié)構(gòu)上看，其管壁分為三層：內(nèi)膜、中膜和外膜。內(nèi)膜和中膜較薄，外膜較厚。其中內(nèi)膜的結(jié)構(gòu)是否完整對(duì)橋血管的近遠(yuǎn)期通暢率起著關(guān)鍵的作用[10]。內(nèi)膜主要由大量的內(nèi)皮細(xì)胞和少量的膠原纖維構(gòu)成，是血管壁與流動(dòng)的血液之間的界面，擔(dān)負(fù)著血液與組織之間能量交換及運(yùn)輸通透性屏障的任務(wù)；同時(shí)，內(nèi)皮細(xì)胞還具有抗血栓形成、保持內(nèi)膜完整性的重要作用。內(nèi)皮細(xì)胞通過(guò)感知血流力度、理化及體液因素的刺激等變化，能夠合成并分泌ICAM-1、mcsf、NO等多種生物活性物質(zhì)，而作出相應(yīng)的代償性應(yīng)答，防止或減輕發(fā)生粥樣硬化的可能[11]。ICAM-1的表達(dá)在這個(gè)過(guò)程中起著重要的作用[11,12]。再加上CABG術(shù)中獲取GSV時(shí)，由于對(duì)橋血管的“外力”損傷是不可避免的，因此，針對(duì)橋血管采取必要的保護(hù)措施，以減少VEC對(duì)黏附因子的表達(dá)，對(duì)提高橋血管的遠(yuǎn)期通暢率是非常重要的。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，Ⅰ級(jí)損傷χ20.05=6.144，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明CABG術(shù)中離取“橋”血管的過(guò)程中，內(nèi)膜及肌層的肌纖維板不可避免地都要受到輕微的損傷，這和前述關(guān)于CABG術(shù)后“橋”通暢率低的理論分析相吻合，只是損傷的輕重程度有所不同，含酮替芬組與常規(guī)組相比對(duì)內(nèi)皮損傷較輕一些，并且在兩組中Ⅰ級(jí)損傷占絕大比例，而這種損傷屬于最輕度損傷；Ⅱ級(jí)損傷 χ20.05=4.80，P＞0.05，Ⅲ、Ⅳ級(jí)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而此時(shí)根據(jù)內(nèi)皮損傷的分級(jí)加重，較重度的損傷比例反而減少甚至沒(méi)有，這進(jìn)一步說(shuō)明了CABG術(shù)中用GSV“橋”血管沒(méi)有嚴(yán)重的損傷，可以用于搭橋。從光鏡結(jié)果理論上分析，可以得出含富馬酸酮替芬的罌粟堿保存液略優(yōu)于常規(guī)保存液組。通過(guò)ELISA法檢測(cè)組織ICAM-1濃度表達(dá)情況來(lái)看，P 值為 0.024（P＜0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，由酮替芬保存后的“橋”血管ICAM-1表達(dá)較常規(guī)組明顯偏低，說(shuō)明富馬酸酮替芬組在保存血管時(shí)，通過(guò)其拮抗組胺H1受體、抑制血管平滑肌增生痙攣并提高NO合酶表達(dá)等作用，有效地防止了大隱靜脈的痙攣，使VEC處在一個(gè)相對(duì)平衡穩(wěn)定的溫和環(huán)境中，VEC受到外界刺激因素導(dǎo)致的損傷大大減輕，細(xì)胞脫落及變性都較少，因此對(duì)ICAM-1的表達(dá)很低。含富馬酸酮替芬的罌粟堿組優(yōu)于常規(guī)罌粟堿組的原因可能與富馬酸酮替芬對(duì)血管作用的如下機(jī)制有關(guān)：①穩(wěn)定細(xì)胞膜，抑制肥大細(xì)胞脫顆粒而減少組胺、肥大細(xì)胞蛋白水解酶的釋放，從而抑制組胺作用于H1受體激活，減少花生四烯酸的釋放，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca2+的濃度，維持循環(huán)血液在血管內(nèi)的流動(dòng)狀態(tài)，防止血小板的聚集和早期血栓形成，從而降低血管壁粥樣硬化的發(fā)生率，提高靜脈橋血管的近遠(yuǎn)期通暢率。②降低血管壁的通透性，抑制其合成前列環(huán)素和NO的速率；同時(shí)減少VEC多種AM受體的表達(dá)，降低或阻斷中性粒細(xì)胞的快速聚集和白細(xì)胞的附壁，這個(gè)機(jī)制可能是含富馬酸酮替芬的罌粟堿組ICAM-1的OD值低于常規(guī)罌粟堿組的原因之一。與此對(duì)比，常規(guī)罌粟堿液容易損傷血管內(nèi)皮超極化因子（EDHF）介導(dǎo)的內(nèi)皮依賴性舒縮活動(dòng)，加大血管壁的張力，高張力下更容易造成VEC內(nèi)膜的損傷，導(dǎo)致VEC對(duì)ICAM-1的表達(dá)偏高，甚至傷及肌層的肌纖維板和外膜[13-17]；同時(shí)，ICAM-1又是整合素-1的重要配體，兩者結(jié)合會(huì)導(dǎo)致中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，成為VEC損傷和功能障礙的基礎(chǔ)。在這種條件下黏附因子表達(dá)增加，加強(qiáng)了細(xì)胞間的黏附，是血管疾病發(fā)生、發(fā)展的重要階段[15]。這可能是目前CABG術(shù)后橋血管遠(yuǎn)期通暢率偏低的原因之一。綜上所述，在對(duì)橋血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的ICAM-1及血管組織、結(jié)構(gòu)的保護(hù)效果方面，含富馬酸酮替芬的罌粟堿組優(yōu)于常規(guī)罌粟堿組。

內(nèi)皮素（ET）是由21個(gè)氨基酸殘基組成的短肽，共有三種異構(gòu)體：ET-1、ET-2和 ET-3，它們都通過(guò)和ET受體（有ETA和或ETBR兩種）結(jié)合發(fā)揮作用。其中ET-1主要產(chǎn)生于血管壁，且極易與血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌的ETBR結(jié)合，介導(dǎo)血管的收縮反應(yīng)，是目前已知最強(qiáng)大的血管收縮因子。雖然ET-1本身的血漿循環(huán)濃度很低（以pg來(lái)記），不足以引起血管收縮，但是ET-1在VEC分泌的各種黏附因子等的共同作用下會(huì)發(fā)生強(qiáng)烈的縮血管作用；同時(shí)，ET-1的合成調(diào)節(jié)在轉(zhuǎn)錄水平，許多因素如血管活性物質(zhì)、生長(zhǎng)因子、炎性介質(zhì)及缺血、缺氧等均可促進(jìn)其釋放，然后與內(nèi)皮素B受體（ETBR）牢固結(jié)合，產(chǎn)生持久的縮血管作用，甚至引起血管強(qiáng)烈痙攣，產(chǎn)生嚴(yán)重的不良后果，進(jìn)而影響橋血管的遠(yuǎn)期通暢率。王春喜等[9]發(fā)現(xiàn)，ET-1水平升高可能是血管狹窄加劇的標(biāo)志，這與國(guó)內(nèi)外的報(bào)道相一致。所以，本實(shí)驗(yàn)從能否進(jìn)一步降低橋血管表達(dá)ET-1濃度的角度對(duì)兩種保存液進(jìn)行對(duì)比，為臨床上選擇一種性能更好的保存液奠定基礎(chǔ)，為進(jìn)一步提高橋血管的遠(yuǎn)期通暢率尋求更好的保存方法。通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)（t=-2.117，P＜0.05），由含富馬酸酮替芬的罌粟堿液保存后的“橋”血管，ET-1表達(dá)的濃度較常規(guī)罌粟堿組略偏低，其原因可能與富馬酸酮替芬對(duì)血管作用的以下機(jī)制有關(guān)：酮替芬能夠有效抑制組織肥大細(xì)胞中磷酸二酯酶的活性，致使肥大細(xì)胞中的環(huán)磷酸腺（cAMP）水平升高，減少Ca2+內(nèi)流，遏制血管壁對(duì)內(nèi)皮素-1的過(guò)度表達(dá)，從而減低ET-1的濃度。常規(guī)罌粟堿液不能有效調(diào)控血管組織中磷酸二酯酶的活性表達(dá)，可能是導(dǎo)致血管表達(dá)ET-1濃度水平偏高的原因之一。因此，通過(guò)本實(shí)驗(yàn)對(duì)血管組織表達(dá)ET-1研究的結(jié)果顯示，含富馬酸酮替芬的罌粟堿保存液與常規(guī)罌粟堿保存液相比，能更有效地降低血管表達(dá)ET-1的水平。因此，從是否能夠有效降低血管表達(dá)ET-1濃度水平的角度判斷，含富馬酸酮替芬的保存液用于CABG術(shù)中橋血管的保存，可能較明顯地防止或延緩血管粥樣硬化的發(fā)生，更好地保護(hù)橋血管，有效提高橋血管的遠(yuǎn)期通暢率。從而得出結(jié)論：含富馬酸酮替芬的罌粟堿保存液可以代替常規(guī)罌粟堿保存液應(yīng)用于臨床。

綜上所述，經(jīng)含富馬酸酮替芬的罌粟堿保存液保存后的橋血管，光鏡下顯示內(nèi)皮肌層肌纖維板及內(nèi)皮細(xì)胞損傷相對(duì)較小，組織血管對(duì)ICAM-1的表達(dá)相對(duì)較低，ET-1反應(yīng)濃度相對(duì)常規(guī)組略偏低。在理論上可以得出初步結(jié)論：含富馬酸酮替芬的罌粟堿保存液對(duì)橋血管的損傷較小，與常規(guī)罌粟堿保存液相比，更適合作為CABG術(shù)中橋血管移植前的保存液。

含酮替芬的罌粟堿液對(duì)靜脈“橋”血管保護(hù)作用的研究

圖1 HE染色實(shí)驗(yàn)照片（×200）

圖2 HE染色實(shí)驗(yàn)照片（×200）

圖3 HE染色實(shí)驗(yàn)照片（×100）

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A study of protection effect on veins“bridge”in contained ketotifenor papaverine liquid

YIN Wei，WANG Liang，MA Fang-ming，et al.Cardiovascular Surgery of BaoTou Central Hospital，Baotou 014040，China

ObjectiveTo study and analyze two preservation solutions containing Ketotifen Fumarate Papaverine and conventional Ketotifen at the same time in protective effects on the“bridge”graft of coronary artery bypass grafting choose preservation solution that can largely protect the venous wall endothelial cells （VEC）and the vascular intimal integrity to improve its long-term patency of saphenous vein grafts in clinical after coronary artery bypass grafting（CABG）.MethodsScreening 20 patients with coronary artery bypass grafting（CABG）.The remaining saphenous vein after CABG were divided into two sections，respectively stored in conventional poppylye（control group）and contain rich fumaric acid for findan poppylye ketone（group）in each hour at ambient temperatures.⑴The enzyme-linked immunoassay assay（ELISA）was performed to measure the concentration of expressionendothelial cell adhesion moleculebridge-1（ICAM-1）.⑵Observe the muscularis neoplasm board,endothelial cells，morphology and unit area of endothelial cell death at high magnification.⑶The concentration of endothelin-1（ET-1）was measured by using ELISA.Results⑴The expression of ICAM-1 levels in experimental group lower than that in control group.DeathⅠ level in grading of the muscularis neoplasm board and unit area of endothelial cell death at high magnification significantlylower than that in control group（P＜0.05）. Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ-level damage was no significant differences（P＞0.05）.⑵The expression of ET-1 levels in endothelial cells at experimental group lower than the control group significantly（P＜0.05）.ConclusionContain rich fumaric acid for findan poppylye testosterone can restrain venous bridge endothelial cell adhesion express，reduce the factor of the VEC per unit area of the number of deaths and organelles.In CABG surgery can select papaverine solution with Keto－tifen Fumarate grafts as the preservation fluid to keep the better long-term patency after surgery.

Coronary artery bypassgrafting； Endothelialcells； Long-term patency rate；Preservation solution

10．3969/j．issn．1672－5301．2014．01．019

R654.2

A

1672-5301(2014)01-0059－05

2013-05-29）