姜利佳++蔣益

[摘要] 目的 研究雙歧三聯活菌膠囊對潰瘍性結腸炎患者CD4+、CD24+調節(jié)T細胞及IL-10水平的影響。 方法 選取134例潰瘍性結腸炎患者作為臨床研究資料，按照隨機對照原則將入組患者分為觀察組和對照組，各67例，對照組患者采用常規(guī)基礎治療，觀察組在對照組治療基礎上采用雙歧三聯活菌膠囊治療。比較兩組患者的療效及血清CD4+、CD24+調節(jié)T細胞及IL-10水平。結果 觀察組患者的臨床癥狀評分下降百分比顯著高于對照組，兩組患者治療后的結腸炎癥評分均顯著低于治療前，而組間比較顯示觀察組患者治療后的結腸炎癥評分均顯著低于對照組。兩組患者治療后的血清CD4+、CD24+調節(jié)T細胞占CD4+T細胞的百分比及IL-10水平均較治療前顯著升高，組間比較發(fā)現觀察組患者治療后的血清CD4+、CD24+調節(jié)T細胞占CD4+T細胞的百分比及IL-10水平均顯著高于對照組。結論 雙歧三聯活菌膠囊輔助治療潰瘍性結腸炎患者可以通過調節(jié)CD4+、CD24+調節(jié)T細胞及IL-10水平。

[關鍵詞] 雙歧三聯活菌膠囊；潰瘍性結腸炎；CD4+、CD24+調節(jié)T細胞；白介素-10

[中圖分類號] R574.62[文獻標識碼] B[文章編號] 1673-9701（2014）18-0039-03

The study of bifidobacteria triple capsule on the levels of CD4 +, CD24 + regulatory T cells and IL-10 for patients with ulcerative colitis

JIANG Lijia1 JIANG Yi2

1.Department of Gastroenterology, Wenzhou Central Hospital in Zhejiang Province, Wenzhou 325000, China; 2.Department of Gastroenterology, the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College, Wenzhou 325000, China

[Abstract] Objective To observe bifidobacteria triple capsule on the levels of CD4+, CD24+ regulatory T cells and IL-10 for patients with ulcerative colitis. Methods Selected 134 cases of patients with ulcerative colitis clinical research data beds, in accordance with the principles of the randomized patients were divided into observation group and control group, with 67 cases in each. Control patients received conventional basic therapy, observation group received probiotics in capsule treatment on the basis of the control group. The efficacy of the two groups of patients and levels of serum CD4+, CD24+ T cells and IL-10 were compared. Results The patients in clinical symptom scores decreased significantly higher percentage, two groups of patients after treatment colitis disease scores were significantly lower than before treatment, and display observed between the two groups of patients after treatment colitis disease scores were significantly lower than the control group. Two groups of patients after treatment serum CD4 +, CD24 + regulatory T cells was significantly higher in CD4+T cells and the percentage of IL-10 levels than before treatment. Conclusion Probiotics capsules adjuvant treatment of ulcerative colitis patients can be adjusted by CD4 +, CD24 + regulatory T cells and IL-10 levels.

[Key words] Probiotics capsules; Ulcerative colitis; CD4+, CD24+ regulatory T cells; Interleukin-10

雙歧三聯活菌膠囊屬微生態(tài)制劑，在潰瘍性結腸炎患者的治療中具有重要地位，且經過長期的臨床應用，其療效受到了廣泛認可[1]。而對雙歧三聯活菌膠囊治療潰瘍性結腸炎的機制研究開始成為熱點，明確機制可以更好地把握適應證，應用針對性更強，可在一定程度上提高療效，潰瘍性結腸炎患者的免疫系統(tǒng)病因已經達成共識[2]，雙歧三聯活菌膠囊是否可以通過改善腸道菌群微生態(tài)狀態(tài)而調節(jié)潰瘍性結腸炎患者的免疫功能，從而起到促進治療的效果值得研究，本研究通過評估臨床癥狀評分、結腸炎癥評分，并檢測患者血清CD4+、CD24+調節(jié)T細胞及IL-10水平研究雙歧三聯活菌膠囊對潰瘍性結腸炎患者免疫和炎癥反應的影響，現報道如下。

1資料與方法

1.1 臨床資料

本研究選取2010年2月～2013年1月間本院收治的134例潰瘍性結腸炎患者作為研究資料，所有患者均經輔助檢查并結合病史確診為潰瘍性結腸炎，其中男73例，女61例，年齡23～63歲，平均（45.61±5.82）歲，其中輕度69例，中度65例，病程0.5～4年，平均（1.41±0.33）年。本組患者入組前均未接受可能影響本研究觀察指標的治療和藥物，所有患者均無重要臟器功能損害及血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾病。按照隨機對照原則將所有患者分為兩組各67例，兩組患者在年齡、性別、病變程度以及病程方面無顯著差異，具有可比性。見表1。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 治療方法

觀察組患者采用抗生素+5-氨基水楊酸制劑奧沙拉嗪鈉膠囊（浙江眾益藥業(yè)有限公司，國藥準字H20010061）的常規(guī)治療方案，對照組患者在觀察組常規(guī)治療方案的基礎上加用雙歧三聯活菌膠囊（上海信誼藥廠有限公司，國藥準字S10950032）0.21 g 口服，2次/d，兩組患者均接受6個月的完整規(guī)律治療。

1.3 觀察指標

1.3.1 臨床癥狀評分兩組患者均于治療前及治療后6個月時進行臨床癥狀評分，具體評估標準[3]為：每天大便1～2次記0分，3次記1分，4～5次記2分，6次及以上記3分；大便成形記0分，軟便記1分，稀糊狀便記2分，稀水樣便記3分，無血便記0分，便中帶血絲記1分，便中帶血塊記2分，便血記3分；無腹痛記0分，輕度腹痛記1分，中度腹痛記2分，重度腹痛記3分；無里急后重記0分，有里急后重記1分；無腹脹記0分，有腹脹記1分。

1.3.2 結腸炎癥評分[4]所有患者均在治療前及治療6個月后接受腸鏡檢查，術中于病變最活躍處取活檢6塊，取3個高倍視野的觀察指標平均值為最終結果，按照以下分級進行評分，正常評0分，輕微黏膜及上皮下炎性滲出、水腫，片狀黏膜糜爛及毛細血管擴裝，黏膜肌層正常記1分，標本的50%以上具有1分評級特征者評為2分，以中性粒細胞滲出為主伴潰瘍深達黏膜肌層或黏膜下層評為3分，標本的50%以上具有3分評級特征者評為4分。臨床癥狀評分下降百分比=（治療前評分-治療后評分）/治療前評分×100%。

1.3.3 血清CD4+、CD24+調節(jié)T細胞及IL-10水平所有患者均于治療前及治療6個月后接受CD4+、CD24+調節(jié)T細胞及IL-10水平測定，采用流式細胞儀測定CD4+、CD24+調節(jié)T細胞水平，采用ELISA法測定IL-10水平，所有操作均嚴格按照規(guī)范進行。

1.4統(tǒng)計學方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計學軟件進行數據分析，臨床癥狀評分下降百分比、結腸炎癥評分、血清CD4+、CD24+調節(jié)T細胞及IL-10水平用（x±s）表示，采用t檢驗， P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1 臨床癥狀評分及結腸炎癥評分

本研究結果顯示，觀察組患者的臨床癥狀評分下降百分比顯著高于對照組（P=0.000），兩組患者治療后的結腸炎癥評分均顯著低于治療前（t=36.6060，P=0.000；t=7.0189，P=0.000），而組間比較顯示觀察組患者治療后的結腸炎癥評分均顯著低于對照組（P=0.000），見表2。

表2 臨床癥狀評分及結腸炎癥評分（x±s）

注：與治療前相比，*P<0.05；與對照組相比，#P<0.05

2.2血清CD4+、CD24+調節(jié)T細胞占CD4+T細胞的百分比及IL-10水平

本研究結果顯示，兩組患者治療后的血清CD4+、CD24+調節(jié)T細胞占CD4+T細胞的百分比及IL-10水平均較治療前顯著升高（t=23.7768、8.4307，P=0.000、0.000；t=10.2217，2.0285，P=0.000，0.031），組間比較發(fā)現觀察組患者治療后的血清CD4+、CD24+調節(jié)T細胞占CD4+T細胞的百分比及IL-10水平均顯著高于對照組（P=0.000、0.000），見表3。

表3 血清CD4+、CD24+調節(jié)T細胞及IL-10水平

注：與治療前相比，*P<0.05；與對照組相比，#P<0.05

3 討論

潰瘍性結腸炎患者的發(fā)病機制尚未完全明確，但腸道菌群功能以及免疫功能失調均與潰瘍性結腸炎的發(fā)生和發(fā)展存在密切的聯系[4]，微生態(tài)制劑在調節(jié)腸道正常菌群功能方面的作用已經被驗證[6]，雙歧三聯活菌膠囊主要包括長型雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌以及嗜熱鏈球菌3種細菌，此三種細菌均是腸道重要的益生菌，在維持腸道微生態(tài)平衡、防御致病菌和病毒入侵、促進腸道正常菌群生長繁殖方面作用顯著[7]。既往潰瘍性結腸炎以抗生素抗感染，5-氨基水楊酸制劑等對癥治療為主[8]，但療效差強人意，已有研究[9]證實應用微生態(tài)制劑聯合治療潰瘍性結腸炎療效顯著，但對于其起效機制的研究尚不多見。

患者機體免疫功能失調是潰瘍性結腸炎發(fā)病的重要因素，且與其病情發(fā)展密切相關[10]，而微生態(tài)制劑在調節(jié)腸道正常菌群功能的同時，對于患者的免疫功能是否也能起到有效的調節(jié)作用值得研究。調節(jié)性T細胞在調節(jié)功能性T細胞亞群功能方面具有重要作用，在多種免疫系統(tǒng)相關疾病的發(fā)生發(fā)展中均具有重要意義。有研究提出CD4+、CD24+調節(jié)T細胞具有免疫無能性與抑制性兩大功能特征，主要通過抑制自身反應性T細胞的免疫反應，從而減少TGF-β、IL-10等細胞因子的分泌，在自身免疫性疾病中具有重要意義[11]。CD4+、CD24+調節(jié)T細胞的產生可能與腸道菌群存在一定的關系，有研究[12]認為腸道長期暴露在正常菌群的外源性抗原中，可以在一定程度上誘導CD4+、CD24+調節(jié)T細胞的產生，也有研究[13]認為腸道菌群可以抑制非成熟樹突狀細胞的成熟，側面促進CD4+、CD24+調節(jié)T細胞的發(fā)育和增殖，以維持正常菌群的免疫功能，因此推測微生態(tài)制劑調節(jié)腸道正常菌群功能可能通過以上機制改善患者的免疫功能從而達到輔助治療潰瘍性結腸炎患者的作用。IL-10是重要的炎癥因子，主要由Th2細胞、單核巨噬細胞以及活化的B細胞產生，其可以通過抑制單核細胞的活性，抑制腸道炎癥反應[14]。雙歧三聯活菌膠囊所含益生菌在腸道增殖后的代謝產物也是調節(jié)腸道內環(huán)境的重要物質，可以在一定程度上調節(jié)腸道黏膜的免疫功能，促進IL-10的表達水平，這也是雙歧三聯活菌膠囊輔助治療潰瘍性結腸炎的可能機制。

本研究結果顯示采用雙歧三聯活菌膠囊輔助治療的潰瘍性結腸炎患者，治療6個月后臨床癥狀評分下降百分比以及顯著高于對照組，結腸炎癥評分顯著低于對照組。外周血CD4+、CD24+調節(jié)T細胞占CD4+T細胞的百分比及IL-10水平均顯著高于對照組。由此總結，CD4+、CD24+調節(jié)T細胞和IL-10在潰瘍性結腸炎患者的發(fā)病和發(fā)展中存在重要作用和意義，雙歧三聯活菌膠囊輔助治療的潰瘍性結腸炎患者可以調節(jié)腸道菌群功能，提高CD4+、CD24+調節(jié)T細胞和IL-10水平的表達，提高療效。

[參考文獻]

[1]陳貽平. 雙歧三聯活菌膠囊對潰瘍性結腸炎患者炎性因子的影響研究[J]. 臨床軍醫(yī)雜志，2010，38（4）：565-566.

[2]李為慧，吳正祥，陶科明，等. RAGE、sRAGE在潰瘍性結腸炎中的表達及臨床意義[J]. 安徽醫(yī)科大學學報，2013， 48（4）：394-397.

[3]李貫清，周榮斌. 消旋卡多曲治療成人急性腹瀉療效觀察[J]. 中國全科醫(yī)學，2012，15（2）：203-204.

[4]?？±?，繆應雷. 內鏡在潰瘍性結腸炎診治中的作用[J]. 世界華人消化雜志，2011，19（20）：2153-2159.

[5]Hijova E，Soltesova A. Effects of probiotics and prebiotics in ulcerative colitis[J]. Bratisl Lek Listy，2013，114（9）：540-543.

[6]Landy J，Hart A. Commentary: The effects of probiotics on barrier function and mucosal pouch microbiota during maintenance treatment for severe pouchitis in patients with ulcerative colitis[J]. Aliment Pharmacol Ther，2013， 38（11-12）：1405-1406.

[7]Cook MT，Tzortzis G，Charalampopoulos D，et al. Microencapsulation of probiotics for gastrointestinal delivery[J]. J Control Release，2012，162（1）：56-67.

[8]Mitsuro Chiba，Iwao Ono，Hideki Wakamatsu，et al. Diffuse gastroduodenitis associated with ulcerative colitis: Treatment by infliximab[J]. Dig Endosc，2013，25（6）：622-625.

[9]Lee KH，Choi CH. The effect of probiotics in ulcerative colitis[J]. Korean J Gastroenterol， 2012，60（2）：67-70.

[10]Verma R，Ahuja V，Paul J. Detection of single-nucleotide polymorphisms in the intron 9 region of the nucleotide oligomerization domain-1 gene in ulcerative colitis patients of North India[J]. J Gastroenterol Hepatol，2012， 27（1）：96-103.

[11]Siqueira-Batista R，Gomes AP，Azevedo SF，et al. CD4+CD25+ T lymphocytes and regulation of the immune system: Perspectives for a pathophysiological understanding of sepsis[J]. Rev Bras Ter Intensiva，2012，24（3）：294-301.

[12]Tsuji NM，Mizumachi K，Kurisaki J. Antigen-specific， CD4+CD25+ regulatory T cell clones induced in Peyer's patches[J]. Int Immunol，2003，15（4）：525-534.

[13]Elson CO，Cong Y，Iqbal N，et al. Immuno-bacterial homeostasis in the gut: New insights into an old enigma[J]. Semin Immunol，2001，13（3）：187-194.

[14]李國華，陳江，呂農華，等. 雙歧三聯活菌膠囊對潰瘍性結腸炎患者結腸黏膜白細胞介素-β及白細胞介素-10的影響[J]. 中華消化雜志，2007，27（5）：340-341.

（收稿日期：2014-01-21）

[7]Cook MT，Tzortzis G，Charalampopoulos D，et al. Microencapsulation of probiotics for gastrointestinal delivery[J]. J Control Release，2012，162（1）：56-67.

[8]Mitsuro Chiba，Iwao Ono，Hideki Wakamatsu，et al. Diffuse gastroduodenitis associated with ulcerative colitis: Treatment by infliximab[J]. Dig Endosc，2013，25（6）：622-625.

[9]Lee KH，Choi CH. The effect of probiotics in ulcerative colitis[J]. Korean J Gastroenterol， 2012，60（2）：67-70.

[10]Verma R，Ahuja V，Paul J. Detection of single-nucleotide polymorphisms in the intron 9 region of the nucleotide oligomerization domain-1 gene in ulcerative colitis patients of North India[J]. J Gastroenterol Hepatol，2012， 27（1）：96-103.

[11]Siqueira-Batista R，Gomes AP，Azevedo SF，et al. CD4+CD25+ T lymphocytes and regulation of the immune system: Perspectives for a pathophysiological understanding of sepsis[J]. Rev Bras Ter Intensiva，2012，24（3）：294-301.

[12]Tsuji NM，Mizumachi K，Kurisaki J. Antigen-specific， CD4+CD25+ regulatory T cell clones induced in Peyer's patches[J]. Int Immunol，2003，15（4）：525-534.

[13]Elson CO，Cong Y，Iqbal N，et al. Immuno-bacterial homeostasis in the gut: New insights into an old enigma[J]. Semin Immunol，2001，13（3）：187-194.

[14]李國華，陳江，呂農華，等. 雙歧三聯活菌膠囊對潰瘍性結腸炎患者結腸黏膜白細胞介素-β及白細胞介素-10的影響[J]. 中華消化雜志，2007，27（5）：340-341.

（收稿日期：2014-01-21）

[7]Cook MT，Tzortzis G，Charalampopoulos D，et al. Microencapsulation of probiotics for gastrointestinal delivery[J]. J Control Release，2012，162（1）：56-67.

[8]Mitsuro Chiba，Iwao Ono，Hideki Wakamatsu，et al. Diffuse gastroduodenitis associated with ulcerative colitis: Treatment by infliximab[J]. Dig Endosc，2013，25（6）：622-625.

[9]Lee KH，Choi CH. The effect of probiotics in ulcerative colitis[J]. Korean J Gastroenterol， 2012，60（2）：67-70.

[10]Verma R，Ahuja V，Paul J. Detection of single-nucleotide polymorphisms in the intron 9 region of the nucleotide oligomerization domain-1 gene in ulcerative colitis patients of North India[J]. J Gastroenterol Hepatol，2012， 27（1）：96-103.

[11]Siqueira-Batista R，Gomes AP，Azevedo SF，et al. CD4+CD25+ T lymphocytes and regulation of the immune system: Perspectives for a pathophysiological understanding of sepsis[J]. Rev Bras Ter Intensiva，2012，24（3）：294-301.

[12]Tsuji NM，Mizumachi K，Kurisaki J. Antigen-specific， CD4+CD25+ regulatory T cell clones induced in Peyer's patches[J]. Int Immunol，2003，15（4）：525-534.

[13]Elson CO，Cong Y，Iqbal N，et al. Immuno-bacterial homeostasis in the gut: New insights into an old enigma[J]. Semin Immunol，2001，13（3）：187-194.

[14]李國華，陳江，呂農華，等. 雙歧三聯活菌膠囊對潰瘍性結腸炎患者結腸黏膜白細胞介素-β及白細胞介素-10的影響[J]. 中華消化雜志，2007，27（5）：340-341.

（收稿日期：2014-01-21）