劉美玲 曾穎

廣州醫(yī)學(xué)院荔灣醫(yī)院，廣東廣州 510170

現(xiàn)階段，隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展完善，同時也促進(jìn)了醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)的進(jìn)步，對臨床上諸多疾病的診斷提供了準(zhǔn)確的借鑒[1]。血小板由于其特殊性，檢測結(jié)果容易受到血小板聚集、紅細(xì)胞等因素的影響，然而應(yīng)用全自動血液分析儀對血小板進(jìn)行檢測有較高的準(zhǔn)確性，具有較好的臨床應(yīng)用價值。本文選擇在我院進(jìn)行血常規(guī)檢查的患者120例作為研究對象，旨在探討血小板采用XT-4000i血液分析儀兩種測定方法與血涂片復(fù)檢對比，具體信息如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本組共選擇研究對象120例，男72例，女48例，年齡6～80歲，平均（63.5±2.7）歲。均為門診和住院行血常規(guī)檢測的病例。

1.2 儀器及試劑

準(zhǔn)備EDTA-K2抗凝管，Sysmcx XT 4000i全自動血液分析儀，雙目光學(xué)顯微鏡。應(yīng)用原裝配套試劑，嚴(yán)格參照儀器說明書操作，定期校準(zhǔn)、質(zhì)控。儀器在檢測前狀態(tài)良好，應(yīng)用瑞氏染色法染色血涂片。

1.3 方法

遵循不重復(fù)原則，從Sysemx XT-4000i檢測血常規(guī)標(biāo)本中選擇研究對象，其中無提示有血小板直方圖異常，電阻抗法（PLTI）計數(shù)正常者40例（觀察組A），提示有血小板直方圖異常，PLT-I計數(shù)＞100×109/L40例 （觀察組B），提示有血小板直方圖異常，PLT-I計劃數(shù)＜100×109/L 40例（觀察組C），涂片鏡檢對血小板形態(tài)分布和數(shù)量進(jìn)行觀察，間接計數(shù)血小板，并用光學(xué)（PLT-0）行血小板計數(shù)。依據(jù)《臨床檢驗基礎(chǔ)》相關(guān)要求制作血涂片，需達(dá)邊緣整齊，頭體尾分明，厚薄適宜。待血液片干燥后，選擇瑞氏染色液進(jìn)行染色鏡檢，從50%紅細(xì)胞互相重疊區(qū)域觀察，逐漸至紅細(xì)胞完全散開區(qū)域，使用油鏡觀察血小板形態(tài)與數(shù)量。通常情況下，有10～15個血小板分布于油鏡視野之下。＜8個，可對血小板減少初步證實，＞30個為血小板增加。細(xì)胞形態(tài)異常在油鏡下標(biāo)準(zhǔn)為：紅細(xì)胞碎片：有不完整的各種形狀的細(xì)胞碎片存在；小紅細(xì)胞：＜6um直徑；血小板聚集：＞5個血小板成堆；大、巨大血小板：直徑4～6μm或直徑＞6μm。血小板顯微鏡下計數(shù)：應(yīng)用城垛式計數(shù)方法，在血片體尾交界處區(qū)，對N目測血小板數(shù)即100個血小板無重復(fù)計數(shù)，并記錄N目測白細(xì)胞數(shù)即所有涉及視野的白細(xì)胞總數(shù)，患者血小板嚴(yán)重減少，計數(shù)血小板不少于50個；參考儀器計數(shù)的白細(xì)胞數(shù)，對血小板總數(shù)進(jìn)行計算，N儀器×（N目測血小板數(shù)/N目測白細(xì)胞數(shù)）×109/L=血小板數(shù)量N。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

統(tǒng)計學(xué)軟件采用SPSS 13.0版，組間計量數(shù)據(jù)采用（x±s）表示，計量資料行t檢驗，P＜0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血小板計數(shù)結(jié)果

采用電阻抗法、光學(xué)法、鏡檢法測得的血小板計數(shù)見表1。

表 1 不同方法血小權(quán)計數(shù)結(jié)果[（s）×109/L]

表 1 不同方法血小權(quán)計數(shù)結(jié)果[（s）×109/L]

組別 例數(shù) 電阻抗法 光學(xué)法 鏡檢法觀察組A觀察組B觀察組C 40 40 40 192±48.3 249±82.7 66.7±13.5 195±48.2 200±82.1 92.4±15.8 197±49.7 203±85.6 94.8±16.2

2.2 干擾因素

觀察組A中無干預(yù)因素存在，觀察組B小紅細(xì)胞干擾12例，紅細(xì)胞碎片干擾28例，觀察組C中大血小板干預(yù)24例，血小板聚集16例。以鏡檢為參考，在觀察組A中與電阻抗法、光學(xué)法比較，P＞0.05，故大部分儀器應(yīng)用電阻抗法。

2.3 干擾因素影響

在大血小板、紅細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞組中，鏡檢和電阻抗法計數(shù)有差異（P＜0.05），鏡檢和光學(xué)法無差異（P＞0.05），就準(zhǔn)確性而方，光學(xué)法優(yōu)于電阻抗法。但在血小板聚集組織中，鏡檢法和電阻抗法有差異（P＜0.05），鏡檢法和光學(xué)法計數(shù)結(jié)果有差異（P＜0.05）。光學(xué)法有一定局限性存在。見表2。

表 2 干擾因素對計數(shù)結(jié)果影響分析[（±s），×109/L]

表 2 干擾因素對計數(shù)結(jié)果影響分析[（±s），×109/L]

注：與鏡檢法比較，*P＜0.05。

組別 小紅細(xì)胞 紅細(xì)胞碎片 大血小板 血小板聚集電阻抗法光學(xué)法鏡檢法229±99.1*203±97.4 200±99.5 257±102*237±102 240±105 75.3±8.2*94.5±7.8 96.1±8.4 53.8±8.0*58.3±8.3*102±8.5

3 討論

在臨床止血凝血的檢查中，血小板計數(shù)是較為重要的觀察指標(biāo)之一。電阻抗檢測屬于傳統(tǒng)的檢測技術(shù)，然而其檢測參數(shù)僅為細(xì)胞體積，無法將干擾物質(zhì)進(jìn)行完全的區(qū)分，例如病理樣本中的細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞、大血小板，因此不能提供準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。所以為確保血小板計數(shù)結(jié)果的可靠性，通過應(yīng)用全自動血液分析儀能夠很大程度彌補(bǔ)上述的不足[2-3]。

本次研究顯示，光學(xué)法可使大血小板、紅細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞對計數(shù)血小板的影響較好消除，但血小板計數(shù)受血小板聚集的影響無法消除。相較儀器自動血小板，血小板采用血涂片觀察優(yōu)點較明顯[4-5]。通常肉眼在顯微鏡下，可對細(xì)胞碎片、紅細(xì)胞、血小板區(qū)分，在對血小板聚集情況進(jìn)行觀察時，可將血小板凝集、大血小板、細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞對血小板的干預(yù)排除，并對各種細(xì)胞比例直接計數(shù)，為顯微鏡檢對血小板間接計數(shù)運用基礎(chǔ)[6]。可用PLT-I法作臨床實際工作的常規(guī)標(biāo)本檢測，若標(biāo)本特殊時，需行PLT-0法再檢，以獲取可靠的血小板結(jié)果，降低復(fù)查例數(shù)，節(jié)約成本，特殊病例可用顯微鏡法復(fù)查，為臨床診斷提供準(zhǔn)確參考依據(jù)。

綜上，血小板檢測中，應(yīng)用光學(xué)法可較好消除大血小板、小紅細(xì)胞等對計數(shù)的影響，但血小板聚集時產(chǎn)生的計數(shù)干擾無法消除，需結(jié)合鏡檢，以提高檢測準(zhǔn)確性。

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