陳景明

摘要：利用不同劑量的微生態(tài)制劑（噬菌28）添加在飼料中飼養(yǎng)金鯽魚8 d、16 d、24 d，測定其與魚體生長和健康相關(guān)的血液指標(biāo)。結(jié)果顯示：試驗(yàn)組紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量等血液指標(biāo)相對于對照組均有明顯變化，且隨著微生態(tài)制劑添加量的增加和飼喂時間的延長而提高，表明噬菌28能改善金鯽魚的血液指標(biāo)，提高新陳代謝，促進(jìn)魚類健康生長。

關(guān)鍵詞：微生態(tài)制劑；金鯽魚；血液指標(biāo)

20 世紀(jì)中葉，抗生素的發(fā)現(xiàn)以及化學(xué)抗菌物質(zhì)合成的成功，作為飼料添加劑被廣泛利用，特別在畜牧生產(chǎn)和動物保健中發(fā)揮了重要作用。隨著使用率的增多，弊端也越來越得到了人們廣泛的認(rèn)識，世界各國科學(xué)家正在努力尋求和開發(fā)無毒副作用的新型飼料添加劑。微生態(tài)制劑，又名活菌制劑或生菌劑［1］，具有無毒副作用、無殘留污染、不產(chǎn)生抗藥性和成本較低等特點(diǎn)，是理想的抗生素替代品［2-3］。微生態(tài)制劑以其綠色安全、無毒副作用、無殘留的優(yōu)點(diǎn)逐步成為抗生素類添加劑替代品，已廣泛應(yīng)用于豬、雞、鴨、牛、羊、兔以及水產(chǎn)養(yǎng)殖等各個方面，在畜牧業(yè)生產(chǎn)中的作用越來越凸顯。

最早對益生菌(Probiotics)定義的是1974年P(guān)arker［4］，認(rèn)為益生菌是“有助于腸道菌群平衡的微生物和物質(zhì)(可能含有抗生素)”。而首次將益生菌應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的則是Kozasa［5］，他用了1株芽孢桿菌(從土壤中分離的)處理日本鰻鱺，發(fā)現(xiàn)能抑制或殺滅愛德華氏菌，從而降低了死亡率。此后，有關(guān)益生菌的研究開始引起人們的興趣，越來越多的成果見諸報端，對益生菌的理解也得到了相應(yīng)的發(fā)展。Moriarty把益生菌的含義擴(kuò)展為“一類添加到養(yǎng)殖水體中的有益微生物”［6］。“微生態(tài)制劑”［7］、微生態(tài)調(diào)節(jié)劑等新的名詞不斷出現(xiàn)。某些微生態(tài)制劑如噬菌蛭弧菌微生物生態(tài)制劑，具有獨(dú)特的“寄生”和“溶解”有害細(xì)菌的生態(tài)效應(yīng)［8］。有關(guān)微生態(tài)制劑對魚類血液指標(biāo)影響的研究少見報道。本試驗(yàn)旨在了解添加微生態(tài)制劑喂養(yǎng)金鯽魚后血液生理指標(biāo)的變化情況，為合理配制飼料，改善魚的體質(zhì)，實(shí)現(xiàn)魚類的健康養(yǎng)殖積累一些基礎(chǔ)資料。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1試驗(yàn)魚將48尾體重相近的金鯽魚（購買于泉州東街魚類市場），隨機(jī)分為3個試驗(yàn)組和1個對照組，各組分別放養(yǎng)12尾，各組均使用規(guī)格相同的塑料養(yǎng)殖箱養(yǎng)殖。并配有供氧設(shè)施。

1.1.2噬菌28主要成分：噬菌蛭弧菌＞5.6×107puf/mL，單胞菌噬菌體＞4.7×108puf/mL，凈水因子＞5 mg/L，促生長因子＞4 mg/L。由南京巨豹生物工程有限公司生產(chǎn)。

1.1.3試驗(yàn)試劑赫姆氏液、白細(xì)胞稀釋液、0.1 mol/L鹽酸、氯化鈉溶液、抗凝劑（3.8%的檸檬酸鈉）。

1.1.4飼喂方法將微生態(tài)制劑按飼料重的比例量取，對照組不加，試驗(yàn)組1（5 mL/kg）、試驗(yàn)組2（10 mL/kg）、試驗(yàn)組3（20 mL/kg）噴于飼料上，晾干投喂，每天早上10：00、傍晚18：00左右投喂兩次。投餌量為金鯽魚體重的2%，以魚0.5 h內(nèi)吃完并略有剩余為標(biāo)準(zhǔn)，試驗(yàn)時間8 d為一個間段，共三個間段，試驗(yàn)總時間為24 d。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1樣本處理在試驗(yàn)的第8 d、16 d、24 d，分別采用鰓部取血，進(jìn)行紅細(xì)胞壓積、白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、紅細(xì)胞滲透脆性等5個血液指標(biāo)的測定。

1.2.2測定指標(biāo)與方法

白細(xì)胞數(shù)：用白細(xì)胞稀釋液，將血樣稀釋20倍后，用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)。

紅細(xì)胞數(shù)：以赫姆氏液為稀釋液，將血樣稀釋200倍后，用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)。

血紅蛋白含量：沙利氏法。

紅細(xì)胞壓積：將抗凝血裝入帶刻度的離心管中，再以3 000 r/min的速度離心30 min，最后計算紅細(xì)胞壓積之百分?jǐn)?shù)。

紅細(xì)胞滲透脆性：試管稀釋法［9］。

1.2.3數(shù)據(jù)處理原始數(shù)據(jù)經(jīng)EXCEL處理后，再制作數(shù)據(jù)表。

2結(jié)果與分析

2.1噬菌28對血液指標(biāo)的影響情況

表1、2、3顯示，添加不同濃度的噬菌28均能使金鯽魚的血液指標(biāo)得到優(yōu)化，特別是血紅蛋白含量、紅細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞壓積等指標(biāo)影響較大，而且量效關(guān)系明顯，而紅細(xì)胞的脆性隨著噬菌28在飼料中添加量的增加，則逐漸降低。

2.2噬菌28在不同天數(shù)對血液指標(biāo)的影響情況

表1、2、3同時也表明，同一試驗(yàn)組添加相同濃度的噬菌28在飼喂時間增加時，也能使金鯽魚的血液指標(biāo)得到進(jìn)一步優(yōu)化，血紅蛋白含量、紅細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞壓積等指標(biāo)受影響較明顯。并且隨著飼喂噬菌28的時間延長，時效關(guān)系明顯，而紅細(xì)胞的滲透脆性隨著飼喂噬菌28時間的延長，也逐漸降低。

表1噬菌28在飼喂8 d后對金鯽魚血液生理指標(biāo)的影響

測定項(xiàng)目

對照組

試驗(yàn)組1

試驗(yàn)組2

試驗(yàn)組3

紅細(xì)胞數(shù)/萬·mm-3

104

111

114

118

白細(xì)胞數(shù)/萬·mm-3

5.6

5.2

5.0

4.8

血紅蛋白/g·100 mL-1

5.2

5.3

5.5

5.8

紅細(xì)胞脆性/NaCl%

開始溶血

0.48～0.45

0.47～0.44

0.45～0.43

0.42～0.40完全溶血

0.36～0.33

0.35～0.33

0.32～0.29

0.31～0.28

紅細(xì)胞比容/%

26

28

31

34

表2噬菌28在飼喂16 d后對金鯽魚血液生理指標(biāo)的影響

測定項(xiàng)目

對照組

試驗(yàn)組1

試驗(yàn)組2

試驗(yàn)組3

紅細(xì)胞數(shù)/萬·mm-3

105

112

115

123

白細(xì)胞數(shù)/萬·mm-3

5.8

5.2

5.1

4.7

血紅蛋白/g·100 mL-1

5.2

5.5

5.9

6.8

紅細(xì)胞脆性/NaCl%

開始溶血

0.48～0.44

0.46～0.44

0.44～0.42

0.40～0.38完全溶血

0.36～0.32

0.34～0.32

0.33～0.28

0.31～0.26

紅細(xì)胞比容/%

27

29

31

35

表3噬菌28在飼喂24 d后對金鯽魚血液生理指標(biāo)的影響

測定項(xiàng)目

對照組

試驗(yàn)組1

試驗(yàn)組2

試驗(yàn)組3

紅細(xì)胞數(shù)/萬·mm-3

105

114

117

126

白細(xì)胞數(shù)/萬·mm-3

6.0

5.3

5.2

4.8

血紅蛋白/g·100 mL-1

5.1

5.7

6.1

7.1

紅細(xì)胞脆性/NaCl%

開始溶血

0.48～0.44

0.46～0.42

0.44～0.40

0.40～0.34完全溶血

0.36～0.32

0.34～0.30

0.32～0.26

0.30～0.24

紅細(xì)胞比容/%

26

30

33

37

3結(jié)論與討論

3.1噬菌28與血液生理指標(biāo)

魚類血液學(xué)指標(biāo)受多種因素的影響而有較大的差異，因此被廣泛地用來評價魚類的健康狀況、營養(yǎng)狀況以及對環(huán)境的適應(yīng)狀況，是重要的生理、病理和毒理學(xué)指標(biāo)。魚類血液與機(jī)體的代謝、營養(yǎng)狀況以及疾病有著密切的關(guān)系。雌鯽魚饑餓半個月，紅細(xì)胞數(shù)下降，但當(dāng)餌料充足，營養(yǎng)條件好時血紅蛋白含量明顯增高［10］。沈曉民等在研究“團(tuán)頭魴血液指標(biāo)與水環(huán)境的關(guān)系”時發(fā)現(xiàn)，魚類缺氧代償能力的獲得主要靠增加紅細(xì)胞和血紅蛋白的數(shù)量［11］。

本試驗(yàn)在金鯽魚的飼料中添加了微生態(tài)制劑噬菌28，試驗(yàn)魚的血液中的紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積等指標(biāo)的量效關(guān)系明顯（見表1、2、3）。

3.2噬菌28與魚類健康生長

本試驗(yàn)結(jié)果也證明：當(dāng)噬菌28進(jìn)入魚體腸道后，改善了魚體內(nèi)環(huán)境以及消化和吸收的狀態(tài)，明顯改善了試驗(yàn)魚的血液指標(biāo)，特別是血紅蛋白含量和血細(xì)胞數(shù)的增加，保證了魚體組織對二氧化碳的排除和氧氣的需求，促進(jìn)了試驗(yàn)魚的健康生長。

同時，噬菌28殺菌力強(qiáng)，可以清除動物體內(nèi)及水中的假單胞菌、氣單胞菌、弧菌等多種細(xì)菌，裂解率可達(dá)97%以上。有報道稱將不同數(shù)量的蛭弧菌投放于水族箱中，用浸泡法對鯉魚進(jìn)行人工感染嗜水氣單胞菌試驗(yàn)，蛭弧菌對嗜水氣單胞菌有較強(qiáng)的裂解和凈化作用，對水中的氨氮有一定的降解作用［12］。張梁、周維祿［13］用添加蛭弧菌的飼料喂養(yǎng)草魚，能夠顯著降低餌料系數(shù)，加快草魚的生長發(fā)育。同時明顯影響各項(xiàng)免疫指標(biāo)，免疫力增強(qiáng)。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，噬菌28能使魚體血液指標(biāo)得到改善，紅細(xì)胞脆性明顯降低，這對于改善紅細(xì)胞膜的組成成分和膜的流動性，調(diào)節(jié)機(jī)體微生態(tài)平衡，促進(jìn)新陳代謝具有積極意義，在維持機(jī)體正常生理功能及正常代謝水平方面有非常重要的作用。

參考文獻(xiàn)：

［1］ Sal minen S, OuweSand A,BennoYeta1.Probiotics:How Should bfined［J］.Trends Food Sci- teeh ,1999,10 :107-110

［2］ 何明清.我國動物微生態(tài)制劑的起源、發(fā)展戰(zhàn)略及應(yīng)用前景［J］.中國微生態(tài)學(xué)雜志，2001(3)：166-167

［3］ 王建業(yè)，王永坤.微生物分類及益生菌必備條件.動物微生態(tài)研究進(jìn)展［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2000：1-24 

［4］ Parker R B. Probiotics-The other half of the antibiotics story［J］. Anim Nutr Heal,1974,29:4-8. 

［5］ Kozasa M. Toyocerin(Bacillus toyoi) as growth promoter for animal feeding［J］. Microbiol Aliment Nutr,1986, 4:121-135

［6］ Moriarty D J W.Control of lu minous vibrio species in penaeid aquaculture ponds［J］.Aqua,1998,164(1/4):351-358

［7］ 薛恒平.微生態(tài)制劑淺析［J ］.飼料工業(yè)，1996，17(1)：30-34

［8］ 秦生巨. 噬菌蛭弧菌及其微生物生態(tài)制劑在水生動物養(yǎng)殖上的應(yīng)用［J］.水產(chǎn)科技情報, 2007, 34 (2)：79-81.

［9］ 解景田，趙靜.生理學(xué)實(shí)驗(yàn)（第2版）［M］.北京：高等教育出版社，2002:62-65

［10］ 林浩然. 魚類生理學(xué)［M］.廣東：廣東高等教育出版社，1999：82-87

［11］ 沈曉民，童合一，華苒. 團(tuán)頭魴血液指標(biāo)與水環(huán)境的關(guān)系［J］. 生態(tài)學(xué)報，1991，11(1)：92-94

［12］ 楊莉，王秀茹.蛭弧菌對鯉感染嗜水氣單胞菌預(yù)防效果的觀察［J］.大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報，2000，15(4)：288-292

［13］ 張梁，周維祿.蛭弧菌對草魚生長及免疫力的影響［J］.糧食與飼料工業(yè)，2005（4）：36-37

Effect of the Microbial ecological agents on the Blood Parameters of Carasslus auratus



CHEN Jing ming



（Quanzhou Preschool Education College,Quanzhou Fujian 362000）

Abstract：Carasslus auratus were fed different amounts of Microbial ecological agents(phage 28) as additive of the fodder 8 days,16 days,24 days,and the blood parameters related to their growth and health were measured. Red blood cell number (RBC), haemoglobin content(Hb), hemotocrit(Ht) in the treatment groups were superior to those of the control group and with increasing amount of the Microbial ecological agentsadditive and the fed time.Thus,the result demonstrated that Microbial ecological agents can improve blood parameters of Carasslus auratus, enhance their metabolism and expedite their healthy growth.



Key words：Microbial ecological agents; Carasslus auratus; parameter

本試驗(yàn)在金鯽魚的飼料中添加了微生態(tài)制劑噬菌28，試驗(yàn)魚的血液中的紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積等指標(biāo)的量效關(guān)系明顯（見表1、2、3）。

3.2噬菌28與魚類健康生長

本試驗(yàn)結(jié)果也證明：當(dāng)噬菌28進(jìn)入魚體腸道后，改善了魚體內(nèi)環(huán)境以及消化和吸收的狀態(tài)，明顯改善了試驗(yàn)魚的血液指標(biāo)，特別是血紅蛋白含量和血細(xì)胞數(shù)的增加，保證了魚體組織對二氧化碳的排除和氧氣的需求，促進(jìn)了試驗(yàn)魚的健康生長。

同時，噬菌28殺菌力強(qiáng)，可以清除動物體內(nèi)及水中的假單胞菌、氣單胞菌、弧菌等多種細(xì)菌，裂解率可達(dá)97%以上。有報道稱將不同數(shù)量的蛭弧菌投放于水族箱中，用浸泡法對鯉魚進(jìn)行人工感染嗜水氣單胞菌試驗(yàn)，蛭弧菌對嗜水氣單胞菌有較強(qiáng)的裂解和凈化作用，對水中的氨氮有一定的降解作用［12］。張梁、周維祿［13］用添加蛭弧菌的飼料喂養(yǎng)草魚，能夠顯著降低餌料系數(shù)，加快草魚的生長發(fā)育。同時明顯影響各項(xiàng)免疫指標(biāo)，免疫力增強(qiáng)。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，噬菌28能使魚體血液指標(biāo)得到改善，紅細(xì)胞脆性明顯降低，這對于改善紅細(xì)胞膜的組成成分和膜的流動性，調(diào)節(jié)機(jī)體微生態(tài)平衡，促進(jìn)新陳代謝具有積極意義，在維持機(jī)體正常生理功能及正常代謝水平方面有非常重要的作用。

參考文獻(xiàn)：

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［4］ Parker R B. Probiotics-The other half of the antibiotics story［J］. Anim Nutr Heal,1974,29:4-8. 

［5］ Kozasa M. Toyocerin(Bacillus toyoi) as growth promoter for animal feeding［J］. Microbiol Aliment Nutr,1986, 4:121-135

［6］ Moriarty D J W.Control of lu minous vibrio species in penaeid aquaculture ponds［J］.Aqua,1998,164(1/4):351-358

［7］ 薛恒平.微生態(tài)制劑淺析［J ］.飼料工業(yè)，1996，17(1)：30-34

［8］ 秦生巨. 噬菌蛭弧菌及其微生物生態(tài)制劑在水生動物養(yǎng)殖上的應(yīng)用［J］.水產(chǎn)科技情報, 2007, 34 (2)：79-81.

［9］ 解景田，趙靜.生理學(xué)實(shí)驗(yàn)（第2版）［M］.北京：高等教育出版社，2002:62-65

［10］ 林浩然. 魚類生理學(xué)［M］.廣東：廣東高等教育出版社，1999：82-87

［11］ 沈曉民，童合一，華苒. 團(tuán)頭魴血液指標(biāo)與水環(huán)境的關(guān)系［J］. 生態(tài)學(xué)報，1991，11(1)：92-94

［12］ 楊莉，王秀茹.蛭弧菌對鯉感染嗜水氣單胞菌預(yù)防效果的觀察［J］.大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報，2000，15(4)：288-292

［13］ 張梁，周維祿.蛭弧菌對草魚生長及免疫力的影響［J］.糧食與飼料工業(yè)，2005（4）：36-37

Effect of the Microbial ecological agents on the Blood Parameters of Carasslus auratus



CHEN Jing ming



（Quanzhou Preschool Education College,Quanzhou Fujian 362000）

Abstract：Carasslus auratus were fed different amounts of Microbial ecological agents(phage 28) as additive of the fodder 8 days,16 days,24 days,and the blood parameters related to their growth and health were measured. Red blood cell number (RBC), haemoglobin content(Hb), hemotocrit(Ht) in the treatment groups were superior to those of the control group and with increasing amount of the Microbial ecological agentsadditive and the fed time.Thus,the result demonstrated that Microbial ecological agents can improve blood parameters of Carasslus auratus, enhance their metabolism and expedite their healthy growth.



Key words：Microbial ecological agents; Carasslus auratus; parameter

本試驗(yàn)在金鯽魚的飼料中添加了微生態(tài)制劑噬菌28，試驗(yàn)魚的血液中的紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積等指標(biāo)的量效關(guān)系明顯（見表1、2、3）。

3.2噬菌28與魚類健康生長

本試驗(yàn)結(jié)果也證明：當(dāng)噬菌28進(jìn)入魚體腸道后，改善了魚體內(nèi)環(huán)境以及消化和吸收的狀態(tài)，明顯改善了試驗(yàn)魚的血液指標(biāo)，特別是血紅蛋白含量和血細(xì)胞數(shù)的增加，保證了魚體組織對二氧化碳的排除和氧氣的需求，促進(jìn)了試驗(yàn)魚的健康生長。

同時，噬菌28殺菌力強(qiáng)，可以清除動物體內(nèi)及水中的假單胞菌、氣單胞菌、弧菌等多種細(xì)菌，裂解率可達(dá)97%以上。有報道稱將不同數(shù)量的蛭弧菌投放于水族箱中，用浸泡法對鯉魚進(jìn)行人工感染嗜水氣單胞菌試驗(yàn)，蛭弧菌對嗜水氣單胞菌有較強(qiáng)的裂解和凈化作用，對水中的氨氮有一定的降解作用［12］。張梁、周維祿［13］用添加蛭弧菌的飼料喂養(yǎng)草魚，能夠顯著降低餌料系數(shù)，加快草魚的生長發(fā)育。同時明顯影響各項(xiàng)免疫指標(biāo)，免疫力增強(qiáng)。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，噬菌28能使魚體血液指標(biāo)得到改善，紅細(xì)胞脆性明顯降低，這對于改善紅細(xì)胞膜的組成成分和膜的流動性，調(diào)節(jié)機(jī)體微生態(tài)平衡，促進(jìn)新陳代謝具有積極意義，在維持機(jī)體正常生理功能及正常代謝水平方面有非常重要的作用。

參考文獻(xiàn)：

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［9］ 解景田，趙靜.生理學(xué)實(shí)驗(yàn)（第2版）［M］.北京：高等教育出版社，2002:62-65

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Effect of the Microbial ecological agents on the Blood Parameters of Carasslus auratus

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CHEN Jing ming

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（Quanzhou Preschool Education College,Quanzhou Fujian 362000）

Abstract：Carasslus auratus were fed different amounts of Microbial ecological agents(phage 28) as additive of the fodder 8 days,16 days,24 days,and the blood parameters related to their growth and health were measured. Red blood cell number (RBC), haemoglobin content(Hb), hemotocrit(Ht) in the treatment groups were superior to those of the control group and with increasing amount of the Microbial ecological agentsadditive and the fed time.Thus,the result demonstrated that Microbial ecological agents can improve blood parameters of Carasslus auratus, enhance their metabolism and expedite their healthy growth.

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Key words：Microbial ecological agents; Carasslus auratus; parameter