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        滋肺陰合補肝腎法對陰虛陽亢型腎性高血壓大鼠收縮壓、一氧化氮的影響

        2014-09-05 02:22:10周偉
        關(guān)鍵詞:補肝腎陰虛陽一氧化氮

        周偉

        (重慶市合川區(qū)人民醫(yī)院急救中心 重慶 401520)

        滋肺陰合補肝腎法對陰虛陽亢型腎性高血壓大鼠收縮壓、一氧化氮的影響

        周偉

        (重慶市合川區(qū)人民醫(yī)院急救中心 重慶 401520)

        目的:通過檢測陰虛陽亢型腎性高血壓大鼠(RHR)血清一氧化氮(NO)的含量,探討滋肺陰合補肝腎法對RHR的降壓機制。方法:篩選2月齡健康雄性SD大鼠78只,隨機分為手術(shù)組65只與假手術(shù)組(F組)13只。手術(shù)組通過結(jié)扎左腎動脈建立腎性高血壓模型,再對高血壓大鼠給予附子湯4周,制備陰虛陽亢證模型。篩選造模成功的陰虛陽亢證RHR,隨機分為卡托普利組(B組)、滋肺陰組(C組)、補肝腎組(D組)、滋肺陰合補肝腎組(簡稱綜合組或E組)及模型組(A組)。F組與A組給予等量生理鹽水灌胃,其余各用藥組每日早8點灌胃給藥1次,連續(xù)4周。比色法測定血清NO濃度。結(jié)果:治療后各組血壓的變化:治療4周后,與A組比較,D組、E組及B組血壓明顯降低(P<0.05);與C組比較,D組、E組及B組明顯降低(P<0.05);與B組比較,E組明顯降低(P<0.05)。各組大鼠血清NO的變化:與F組比較,A組NO明顯降低(P<0.05);與A組比較,D組、E組及B組NO明顯升高(P<0.05);與C組比較,D組、E組及B組有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與B組比較,E組NO明顯升高(P<0.05)。結(jié)論:滋肺陰合補肝腎法對陰虛陽亢型RHR的降壓機制與增加舒血管物質(zhì)一氧化氮、抑制血管壁增厚有關(guān)。

        滋肺陰補肝腎;腎性高血壓大鼠;收縮壓;一氧化氮

        1 材料與方法

        1.1 實驗材料

        1.1.1 實驗動物 2月齡的健康SD大鼠78只,雄性,體重(220±20)g。

        1.1.2 主要實驗藥物 附子湯(造模用):制附子20 g,配制成含生藥0.10 g/mL溶液;滋肺陰方:沙參麥門冬湯去桑葉、扁豆,選用:北沙參15 g、麥冬15 g、玉竹15 g、天花粉12 g、甘草6 g(1號方),配制成含生藥1.3 g/mL溶液;補肝腎方:根據(jù)方顯明[1]等的正交實驗,選用:天麻 10 g、鉤藤 15 g、石決明 20 g、川牛膝10 g、桑寄生9 g(2號方),配制成含生藥1.4 g/mL溶液;滋肺陰方合補肝腎方:3號方=1號方+2號方,配制成含生藥2.7 g/mL溶液??ㄍ衅绽?、1%戊巴比妥鈉、青霉素。

        1.1.3 主要實驗試劑 NO比色法試劑盒。

        1.1.4 主要實驗儀器 ZH-HX-Z無創(chuàng)血壓測量系統(tǒng),離心機,超低溫冰箱(-70℃),722分光光度計。

        1.2 造模方法 取SD雄性大鼠78只,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,采用ZH-HX-Z無創(chuàng)血壓測量系統(tǒng)尾套法測基礎(chǔ)血壓,禁食禁水24 h后,在室溫下手術(shù)。具體步驟:1%戊巴比妥鈉45 mg/kg腹腔麻醉,仰臥固定,腹部備皮,常規(guī)消毒,沿腹正中線打開腹腔,徹底分離左腎動脈及其周圍筋膜,穿無菌線絲,將直徑0.25 mm的針灸針與左腎動脈血管長軸平行放置,用無菌線絲扎緊腎動脈和針灸針后抽出針灸針,造成腎動脈狹窄,不觸及右側(cè)腎臟和動脈,關(guān)腹,術(shù)后連續(xù)3 d腹腔注射青霉素3×104U/d預(yù)防感染;假手術(shù)組方法同模型組,只分離左腎動脈,不結(jié)扎。術(shù)后2周尾套法測血壓,所有大鼠于每日同一時間段(上午9~12時)測量血壓,連測3次取平均值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn),以收縮壓高于基礎(chǔ)血壓20 mmHg、且收縮壓高于115 mmHg者被認(rèn)為腎性高血壓大鼠造模成功[2]。對RHR加灌附子湯4周,并每隔1 d激惹使其打斗,制備陰虛陽亢證RHR模型。根據(jù)毛色變硬光澤度降低、性情易激惹、飲水量增加,確定為陰虛陽亢證模型成功。

        1.3 分組與給藥 將造模成功的陰虛陽亢證RHR大鼠50只隨機分為5組,即卡托普利(B)組、滋肺陰(C)組、補肝腎(D)組、綜合(E)組和模型(A)組,每組10只,分籠飼養(yǎng)。B組給予卡托普利,C組給予1號方,D組給予2號方,E組給予3號方,每天早8點灌胃給藥,每日1次,共4周。用藥劑量分別按人和動物體表面積進(jìn)行折算。假手術(shù)組與模型組給予等量蒸餾水灌胃。

        1.4 觀測指標(biāo) (1)血壓:采用ZH-HX-Z無創(chuàng)血壓測量系統(tǒng)測血壓。(2)一氧化氮:末次給藥24 h后,大鼠稱重,腹腔麻醉,腹主動脈取血制備血清,比色法檢測血清NO含量。

        2 結(jié)果

        2.1 各組血壓變化 各組大鼠基礎(chǔ)血壓之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。術(shù)后第2周末,與F組比較,A組、各用藥組血壓明顯增高(P<0.05),且均超過115 mmHg,與其基礎(chǔ)血壓的差值均大于20 mmHg,根據(jù)判斷標(biāo)準(zhǔn),說明造模成功。術(shù)后第6周末血壓,A組、各用藥組血壓較假手術(shù)組均明顯增高(P<0.05)。治療4周后:與A組大鼠比較,D組、E組及B組血壓明顯降低(P<0.05),C組有降低趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);與C組比較,D組、E組及B組有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與B組比較,E組明顯降低(P<0.05),D組無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。詳見表 1。

        2.2 各組血清NO的變化 與F組比較,A組NO濃度明顯降低(P<0.05);與A組比較,D組、E組及B組NO明顯升高(P<0.05),C組NO雖有升高趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);與C組比較,D組、E組及B組NO有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與B組比較,E組明顯升高血清NO(P<0.05),D組無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。詳見表2。

        表1 各組大鼠治療前后收縮壓的變化 (±S)mmHg

        表1 各組大鼠治療前后收縮壓的變化 (±S)mmHg

        注:與 F 組比較,▲P <0. 05;與 A 組比較,#P <0. 05;與 B 組比較,★P <0. 05;與 C 組比較,●P <0. 05;與 D 組比較,◆P <0.05。

        組別 n 劑量(g/kg) 基礎(chǔ)血壓 手術(shù)后第2周末血壓手術(shù)后第6周末血壓治療4周后血壓F組 A組B組C組D組E組10 10 10 10 10 10----0.0033 6.56 6.70 13.26 F值112.3±2.21 110.6±2.91 110.3±2.87 111.0±2.71 110.4±2.63 110.7±2.58 0.764 113.9±2.77 144.8±2.94▲145.8±2.53▲146.0±2.05▲145.5±2.17▲146.4±2.37▲272.141 111.9±2.69 169.7±2.67▲171.2±2.57▲171.3±2.87▲169.4±2.59▲170.9±2.51▲814.199 112.0±2.26 188.8±1.99▲144.5±2.74#●178.8±4.0★147.7±1.79#●136.1±1.78#★●◆933.041

        表2 各組大鼠血清一氧化氮的變化 (±S) μmo1/mL

        表2 各組大鼠血清一氧化氮的變化 (±S) μmo1/mL

        注:與 F組比較,▲P <0. 05;與 A 組比較,#P <0. 05;與 B 組比較,★P <0. 05;與 C 組比較,●P <0. 05;與 D 組比較,◆P <0.05。

        組別 n 劑量(g/kg) NO F組A組B組C組D組E組F值10 10 10 10 10 10----0.00331 6.56 6.70 13.26 48.36±7.05 18.79±2.34▲34.16±0.38#●19.34±0.81★33.26±0.28#●41.01±0.29#★●◆203.562

        3 討論

        高血壓是人類心、腦血管病最重要的危險因子,其發(fā)病機制及病理過程至今尚未完全闡明。血管內(nèi)皮細(xì)胞功能受損參與了高血壓的發(fā)生和發(fā)展過程。前人已通過實驗證明了天麻鉤藤飲正交方對肝陽上亢證高血壓大鼠不僅有降壓效果,且與卡托普利比較無明顯差異。本實驗在前人實驗的基礎(chǔ)上通過建立陰虛陽亢型RHR模型,觀察滋肺陰合補肝腎法對陰虛陽亢型RHR血壓、血管內(nèi)皮功能的影響。

        “五行學(xué)說”認(rèn)為,金能生水,水能涵木,金衰不能制木,故木旺化火生風(fēng),而致眩暈。針對這一病機,由天麻、鉤藤、石決明、川牛膝、桑寄生、北沙參、麥冬、玉竹、天花粉及甘草組方,以天麻和石決明平抑肝陽,鉤藤清熱平肝,川牛膝、桑寄生補肝腎,北沙參養(yǎng)陰清肺,麥冬養(yǎng)陰潤肺,玉竹滋陰潤肺,天花粉清熱生津,甘草調(diào)和諸藥:諸藥同用,共奏養(yǎng)陰潤肺、滋水涵木、平肝潛陽之功。

        血管內(nèi)皮細(xì)胞是循環(huán)血液與血管平滑肌間的機械屏障。血管內(nèi)皮細(xì)胞合成和分泌包括前列環(huán)素I2(PGI2)、NO在內(nèi)的舒血管性物質(zhì)[3]。PGI2和NO能抑制VSMC增殖,VEC可以通過調(diào)節(jié)PGI2和NO分泌的多少來維持血管的增殖平衡[4]。只要內(nèi)皮細(xì)胞的正常功能遭到破壞,其維持的舒/縮血管功能、抑制/促進(jìn)生長平衡失衡,可導(dǎo)致內(nèi)皮功能紊亂。高血壓時血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能與結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,NO合成或分泌不足[5]。NO抑制血管壁增厚引起收縮壓下降:(1)NO通過升高環(huán)磷酸鳥苷阻止ANG II的產(chǎn)生,還通過下調(diào)血管緊張素II 1型受體(AT1R)基因表達(dá)[6],使其數(shù)目下調(diào),抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖和管壁增厚、管腔狹窄[7],從而抑制血管壁彈性減退。且無論外源性NO或是內(nèi)源性NO均能抑制體外培養(yǎng)的血管平滑肌細(xì)胞增殖[8~9]。(2)NO通過升高血小板內(nèi)環(huán)磷酸鳥苷,從而抑制血小板聚集,發(fā)揮抗凝作用,避免因血栓刺激VEC造成內(nèi)皮功能紊亂而出現(xiàn)抑制/促進(jìn)生長平衡失衡。本實驗研究結(jié)果說明滋肺陰合補肝腎法可通過升高陰虛陽亢型RHR血清NO、抑制血管壁增厚及重構(gòu)降低收縮壓。

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        R 554.1

        B

        10.13638/j.issn.1671-4040.2014.01.065

        2013-08-05)

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