錢英超 陳麗華

免疫熒光干式定量法檢測全血CRP的臨床應用評估

錢英超 陳麗華

目的 評估免疫熒光干式定量法檢測全血C-反應蛋白(CRP)的臨床應用價值。方法 150例住院患者, 采用免疫熒光干式定量法檢測全血CRP, 采用常規(guī)免疫比濁法檢測血清CRP, 檢測結果用統(tǒng)計學軟件進行分析。結果 與常規(guī)免疫比濁法檢測血清比較, 使用免疫熒光干式定量法檢測全血, 兩種方法所得的CRP檢測結果相符, 差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。結論 采用免疫熒光干式定量法檢測全血CRP, 具有快速、簡便、結果可靠等特點, 可作為臨床一種快速檢測感染過程和自身免疫疾病的工具。

免疫熒光干式定量法；C-反應蛋白；全血

近年來對于CRP的關注越來越多, 其在感染、心腦血管疾病、糖尿病、代謝綜合征、外周血管疾病等多種疾病中對臨床診斷和治療有較高的應用價值, CRP的檢測方法也在不斷發(fā)展, 常用的有免疫比濁法、免疫單抗法、膠乳凝集法、火箭電泳法等［1］。本院檢驗科于2013年8月采購了i-CHROMA Reader免疫熒光分析儀, 使用免疫熒光定量檢測技術, 干化學層析法快速檢測EDTAK2抗凝全血中的CRP水平。與常規(guī)生化儀上使用的免疫比濁法相比, 方法學的改變, 省去了分離血清的步驟, 可在3 min內得到檢測結果, 而免疫比濁法的檢測時間為10 min。本文就以上兩種方法分別對150份EDTAK2抗凝全血標本和血清標本中的CRP進行檢測分析, 探討免疫熒光定量檢測全血CRP的臨床應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選擇150例2014年3～5月在本院住院的患者, 同一患者的血液分別使用EDTAK2抗凝真空采血管采集全血, 使用真空促凝管采集新鮮血清。

1.2 儀器和試劑 i-CHROMA Reader免疫熒光分析儀由杭州麗珠醫(yī)療器械有限公司提供, 使用其配套測試卡；HITACHI7600-020全自動生化分析儀由日立公司提供, 所使用CRP試劑由日本和光公司提供；EDTAK2抗凝真空采血管、真空促凝管由廣州陽普公司提供。所用儀器均使用配套的校準品校準。

1.3 方法 采用免疫熒光干式定量法檢測全血中的CRP, EDTAK2抗凝真空采血管采集的全血馬上進行處理, 使用i-CHROMA Reader免疫熒光分析儀檢測；采用免疫比濁法檢測血清中的CRP, 真空促凝管采集的標本1 h內分離血清,避免溶血和脂血標本, 在HITACHI7600-020全自動生化分析儀上檢測。以上儀器均嚴格按照儀器操作說明書進行操作,所有室內質控均在控。

1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行數據分析。計量資料以均數±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

兩種檢測方法檢測的CRP結果 與常規(guī)免疫比濁法檢測血清比較, 使用免疫熒光干式定量法檢測全血, 兩種方法所得的CRP檢測結果相符, 差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表1(正常和異常以參考值范圍劃分)。

表1 150例患者使用兩種檢測方法檢測的CRP結果( x-±s, mg/L)

3 討論

CRP即C-反應蛋白(C-reactive protein), 于1930年被發(fā)現,是一種能與肺炎球菌C多糖體反應形成復合物的急性時相反應蛋白, 由肝臟合成, 正常人血清中含量極低, 一般＜10 mg/L。在人體發(fā)生細菌感染、非特異性疾病和創(chuàng)傷等情況下可以迅速升高到500 mg/L, CRP濃度的測量已經被臨床用作一種檢測感染過程和自身免疫疾病的工具, 如細菌與病毒感染的鑒別診斷可通過CRP升高的程度加以區(qū)分(細菌性感染時CRP明顯高于病毒感染)；用于治療監(jiān)測, 連續(xù)監(jiān)測CRP下降水平, 是治療效果滿意的指標；類風濕性關節(jié)炎時, CRP可高于200 mg/L, 高低與臨床癥狀和治療效果密切相關［2］。CRP和血清膽固醇一起被認為是動脈硬化的一項指標, 可以作為心血管疾病(如心肌梗死)的診斷指標, 同時也是冠狀動脈疾病的一種獨立的危險因子［3,4］。

目前, 國內大多數實驗室用于檢測CRP的方法主要是免疫透射比濁法和免疫散射比濁法, 在生化分析儀上, 利用抗原抗體結合動態(tài)測定血清中的CRP濃度。比濁法容易受到脂血的影響, 當抗原或抗體大大過剩時, 可出現可溶性復合物而造成誤差。免疫熒光干式定量法是基于免疫熒光定量檢測技術的干化學層析法：將檢測緩沖液和血液樣本在檢測瓶中進行混合, 緩沖液中的熒光標記抗CRP抗體和血液中的CRP抗原形成抗原抗體復合物, 當混合樣本被放到反應板的樣品上并通過毛細血管作用擴散到硝酸纖維基質的測試帶上, 該復合物被測試帶上的抗CRP抗體所捕獲, 熒光抗體的信號強度反映了被捕獲的CRP數量, 經過i-CHROMA Reader免疫熒光分析儀的處理, 能夠反映出血液樣品中CRP的濃度。在實際工作中, 免疫熒光干式定量法可直接檢測全血中的CRP水平, 不需要分離血清, 操作簡單, 用血量少(可以采集末梢血), 可用檢測血常規(guī)的標本進行檢測, 3 min就能得出結果, 特別適用于急診檢查。本文的實驗結果顯示,應用免疫熒光干式定量法檢測全血中的CRP含量, 與常規(guī)比濁法檢測血清中的CRP含量相比, 檢測結果差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05), 可在臨床上廣泛應用。

［1］ Pepys MB, Hirschfield GM.C-reactive protein: a critical update.J Clin Invest, 2003, 111(12):1805-1812.

［2］ 黃家財,莫甲光.免疫散射比濁法和化學發(fā)光酶免疫分析法檢測C反應蛋白的結果評價.現代醫(yī)藥衛(wèi)生, 2010, 26(15):2284-2285.

［3］ 巫一中.C反應蛋白臨床應用研究近況.實用心腦肺血管病雜志, 2010, 18(10):1558-1559.

［4］ 孟秀芹,張善輝.兩種分析儀C反應蛋白檢測結果的比對.中國實用醫(yī)藥, 2010, 5(34):23-24.

2014-07-10］

528415 南方醫(yī)科大學附屬小欖人民醫(yī)院檢驗科