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        阿托伐他汀對大鼠腦缺血再灌注腦組織TNF-α表達的影響

        2014-09-05 12:27:22董春瑤高政
        中國實用醫(yī)藥 2014年32期
        關鍵詞:汀對陽性細胞腦缺血

        董春瑤 高政

        ·實驗研究·

        阿托伐他汀對大鼠腦缺血再灌注腦組織TNF-α表達的影響

        董春瑤 高政

        目的 探討阿托伐他汀對大鼠腦缺血再灌注后腦組織中炎性細胞腫瘤壞死因子-α (TNF-α)表達的影響。方法 將54只SD大鼠隨機分為三組, 各18例, 假手術組、腦缺血再灌注組(對照組)、阿托伐他汀組(實驗組)。利用線栓法制備SD大鼠腦缺血再灌注模型, 實驗組于造模前14 d給予阿托伐他汀10 mg/(kg·d)灌胃治療;假手術組、對照組分別給予等容積生理鹽水。免疫組織化學方法檢測不同再灌注時間點TNF-α的表達。結果 對照組TNF-α陽性表達細胞數(shù)在缺血2 h再灌注2、6、24 h均明顯高于假手術組(P<0.01);實驗組較對照組TNF-α陽性表達細胞數(shù)明顯減少, 再灌注2、6 h差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05), 再灌注24 h, 差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。結論 阿托伐他汀能抑制大鼠腦缺血再灌注腦組織炎性細胞TNF-α的表達。

        阿托伐他??;腦缺血;再灌注;腫瘤壞死因子-α

        阿托伐他汀是他汀類藥物的一種, 它除了具有強效安全的調脂、抗動脈粥樣硬化的療效外, 還有多種其他作用, 如抗炎、抗氧化等[1]。臨床常用于治療高膽固醇血癥, 此外對于糖尿病導致的血管動脈硬化、急性冠狀動脈綜合征和急性缺血性腦血管病的治療方面也發(fā)揮了積極的作用[2]。本研究利用大鼠腦缺血再灌注模型, 對該模型預處理阿托伐他汀藥物, 探討其對腦缺血再灌注后腦組織炎性細胞腫瘤壞死因子-α(TNF-α)表達的影響。

        1 材料與方法

        1.1 材料 健康雄性(SD)大鼠54只, 體重180~220 g, 隨機分為3組,各18例, 分別為假手術組、對照組、實驗組。

        1.2 方法

        1.2.1 動物模型制備及給藥 參照文獻[3, 4]描述的大腦中動脈線栓法制作大腦中動脈腦缺血模型。實驗組大鼠術前14 d開始1次/d給予阿托伐他汀混懸液10.0 mg/(kg·d)灌胃,阿托伐他汀劑量選擇參考Oria de Suarez[5]和Hong[6];假手術組和對照組給予等容積生理鹽水灌胃。各組按缺血2 h再灌注2、6、24 h分別進行檢測。

        1.2.2 取材及SP免疫組織化學染色 不同再灌注時間點麻醉處死大鼠后斷頭取腦速凍, 行冠狀切片、石蠟包埋、做免疫組化染色, 顯微鏡下觀察并計數(shù)陽性細胞數(shù)。

        1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。計量資料以均數(shù)±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

        2 結果

        對照組TNF-α陽性表達細胞數(shù)在缺血2 h再灌注2、6、24 h均明顯高于假手術組,差異具統(tǒng)計學意義(P<0.01);實驗組較對照組TNF-α陽性表達細胞數(shù)明顯減少, 再灌注2、6 h差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05), 再灌注24 h, 差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01), 詳見表1, 圖1。

        表1 三組缺血2 h再灌注2、6、24 h的TNF-α陽性表達( x-±s)

        圖1 各相同再灌注時間點TNF-α表達的比較

        假手術組可見少量TNF-α的陽性細胞表達;對照組、實驗組在缺血2 h再灌注24 h TNF-α陽性細胞表達數(shù)達高峰;對照組和實驗組與假手術組比較, TNF-α陽性細胞表達數(shù)均顯著增多, 實驗組與對照組比較TNF-α陽性細胞表達數(shù)減少, 再灌注24 h差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。

        3 討論

        近年來研究發(fā)現(xiàn), 他汀類藥物具有降脂和非降脂雙重作用。非降脂作用包括抗炎、抗氧化和抗興奮毒性等, 其中抗炎作用在腦缺血再灌注損傷中發(fā)揮了重要的作用。腦缺血和再灌注損傷中炎癥反應的多個過程均可被阿托伐他汀所抑制[7]。研究中發(fā)現(xiàn), 腦缺血再灌注會引起一系列炎癥反應包括黏附分子的表達、白細胞激活和多種細胞因子的共同作用[8]。其中TNF-α在腦缺血再灌注損傷中發(fā)揮的作用日益受到人們的重視。實驗數(shù)據(jù)表明, TNF-α參與了急性腦損傷過程, 阿托伐他汀可抑制腦缺血再灌注損傷過程中TNF-α的表達,從而減輕神經功能損傷[9]。阿托伐他汀減少TNF-α表達的機制可能與其減弱炎癥細胞向斑塊內趨化和聚集有關, 此外抑制巨噬細胞sICAM-1及MMP的表達也是減少TNF-α的重要機制[10]。

        本實驗采用阿托伐他汀預處理大鼠腦缺血再灌注模型,檢測不同再灌注時間點大鼠腦組織中TNF-α的變化, 結果發(fā)現(xiàn):阿托伐他汀治療后腦組織與單存缺血再灌注組比較TNF-α陽性細胞表達數(shù)明顯減少, 表明阿托伐他汀對炎癥反應的多個過程產生抑制作用, 減少炎性因子TNF-α的表達, 從而減少神經元的缺血損傷, 起到了神經保護的作用,可見阿托伐他汀是值得推薦的腦保護劑,在臨床治療過程中發(fā)揮積極的作用。

        [1] 趙水平,吳軍,譚利明,等.他汀類藥物對急性腦梗死的抗炎作用.中華醫(yī)學雜志, 2005, 85(40):2841-2845.

        [2] Amarenco P, Bogousslavsky J, Callahan A 3rd, et al.High-dose atorvastatin after stroke or transient ischemic attack.N Engl J Med, 2006, 355(6):549-559.

        [3] 李建生,劉敬霞,于海濱,等.大鼠自體血栓結合線栓阻塞大腦中動脈制備腦缺血模型的建立與評價中國危重病重急救醫(yī)學, 2006, 18(5):272-274.

        [4] 盧英,蔡光先,譚琥,等.大腦中動脈線栓法腦缺血模型制作的改進及經驗探討.湖南中醫(yī)藥大學學報, 2014, 34(1):6-9.

        [5] Oria de Suarez C, Suarez Rodriguez S, Ponce Hernandez L, et al.Effect of atorvastatin on Fas (CD95/Apo-1) expression in normal or ischemic brain.An Med Interna, 2006, 23(4):156-160.

        [6] Hong H, Zeng JS, Kreulen DL, et al.Atorvastatin protects against cerebral infarction via inhibition of NADPH oxidase-derived superoxide in ischemic stroke.Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2006, 291(5):2210-2215.

        [7] 祝春燕,周濤.辛伐他汀對腦出血患者神經功能恢復的作用.腦與神經疾病雜志, 2014, 22(1):54-55.

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        [9] 秦國強,施波,黃衛(wèi)民,等.阿托伐他汀對重型顱腦外傷患者血清炎癥介質的影響.中國藥房, 2014, 25(16):1461-1464.

        [10] 王荔,石娜,張小菊,等.阿托伐他汀對腦梗死患者hs-CRP、MMP-9水平的影響.卒中與神經疾病, 2014, 1(20):23-25.

        2014-06-27]

        110041 沈陽市第一人民醫(yī)院神經內三科(董春瑤);大連醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院神經內科(高政)通訊作者:高政

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