何霞輝

直接免疫熒光法病毒抗原測(cè)定在呼吸道感染性疾病中的診斷應(yīng)用

何霞輝

目的 研究直接免疫熒光法病毒抗原測(cè)定在呼吸道感染性疾病中的診斷應(yīng)用。方法 呼吸道感染的患者690例, 采取患者鼻咽深部的分泌物, 應(yīng)用直接免疫熒光法測(cè)定呼吸道腺病毒(ADV)、合胞病毒(RSV)、流感病毒A型(InfA)、流感病毒B型(InfB)以及副流感病毒(PIV)等7種病毒的抗原。結(jié)果 呼吸道病毒檢測(cè)陽(yáng)性者240例, 占34.8%, 其中呼吸道腺病毒(ADV)12例, 占5.0%, 合胞病毒(RSV)169例, 占70.4%, 流感病毒A型(InfA)18, 占7.5%, 流感病毒B型(InfB)2例, 占0.8%以及副流感病毒(PIV1)39例, 占16.3%。結(jié)論 直接免疫熒光法病毒抗原測(cè)定可以用于呼吸道病毒感染診斷。

直接免疫熒光法；病毒抗原測(cè)定；呼吸道感染；診斷

上呼吸道感染大多數(shù)是由病毒感染導(dǎo)致的, 特別是青少年階段和兒童時(shí)期病毒感染比較頻繁。隨著技術(shù)的發(fā)展, 病毒檢測(cè)在呼吸道感染的診斷中越來越重要［1］。本文研究直接免疫熒光法病毒抗原測(cè)定在呼吸道感染性疾病中的診斷應(yīng)用, 現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院收治的呼吸道感染的患者690例,其中成人27例, 兒童663例, 男428例, 女262例, 年齡介于1個(gè)月～83歲。

1.2 檢測(cè)方法 應(yīng)用美國(guó)Diagnostic Hybrids公司的呼吸道病毒抗原檢測(cè)試劑盒, 應(yīng)用熒光顯微鏡、37℃的水浴箱以及渦旋振蕩器。檢測(cè)材料應(yīng)用絨植試子、載玻片以及蓋玻片。將配套的絨植試子經(jīng)過鼻腔插入到鼻咽部大約有7～8 cm處,然后來回的旋轉(zhuǎn)2～3次后迅速的抽出試子, 然后放入到塑料試管中。將標(biāo)本點(diǎn)樣在載玻片上, 然后風(fēng)干后浸沒在冷丙酮中固定10 min, 取出晾干, 然后滴加D3試劑1滴, 完全覆蓋待測(cè)標(biāo)本。將載玻片防止培養(yǎng)箱中孵育15～30 min, 然后在玻片中央加一滴封閉液蓋上蓋玻片觀察標(biāo)本。

2 結(jié)果

呼吸道病毒檢測(cè)陽(yáng)性者240例, 占34.8%, 其中呼吸道腺病毒(ADV)12例, 占5.0%, 合胞病毒(RSV)169例, 占70.4%,流感病毒A型(InfA)18, 占7.5%, 流感病毒B型(InfB)2例, 占0.8%以及副流感病毒(PIV)39例, 占16.3%。見表1。

表1 患者病毒的陽(yáng)性檢測(cè)率(n, %)

3 討論

病原學(xué)檢測(cè)是呼吸道感染診斷的重要方法, 對(duì)于治療也具有一定的指導(dǎo)意義, 據(jù)統(tǒng)計(jì)95%以上的呼吸道感染以及大部分的下呼吸道感染是由細(xì)菌以外的病原體引起的, 其中以病毒感染最為常見［2］。所以在臨床上早期快速的檢測(cè)出呼吸道的病毒具有較大的臨床意義, 對(duì)指導(dǎo)用藥具有重要的價(jià)值。有報(bào)道顯示呼吸道的病毒抗原檢測(cè)陽(yáng)性的患者在接受抗菌藥物治療的時(shí)候可以明顯的縮短患者的用藥治療時(shí)間, 減少抗菌藥物的使用和住院時(shí)間。對(duì)于呼吸道病毒的檢測(cè)主要的方法有核酸檢測(cè)、分離培養(yǎng)以及抗原抗體的檢測(cè), 有學(xué)者認(rèn)為病毒感染需要應(yīng)用免疫熒光法檢測(cè)和病毒培養(yǎng)或者是聚合酶鏈反應(yīng)來確認(rèn)［3］?？赡芎推渌胤降臋z測(cè)陰性結(jié)果無法排除掉流感病毒的感染有很大的關(guān)系。現(xiàn)階段的檢測(cè)方法來說, 其中分離培養(yǎng)是檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn), 但是該方法消耗時(shí)間比較長(zhǎng), 不利于早期指導(dǎo)臨床的用藥, 因此其價(jià)值性較低［4］。PCR技術(shù)敏感性比較高, 但是其實(shí)驗(yàn)要求也比較高, 成本相對(duì)較高, 很難進(jìn)行普及應(yīng)用?？乖贵w的檢側(cè)方法應(yīng)用較廣泛, 但是由于IgM抗體一般是呼吸道病毒感染6 d以后才可以檢測(cè)到, 其檢測(cè)的周期也相對(duì)較長(zhǎng), 臨床應(yīng)用比較范圍窄。而直接免疫熒光法抗原檢測(cè)具有簡(jiǎn)便、快速而且檢驗(yàn)的成本比較低, 有利于在臨床上普及應(yīng)用［5］。本文研究發(fā)現(xiàn), 呼吸道病毒檢測(cè)陽(yáng)性者240例, 占34.8%, 說明免疫熒光法檢測(cè)陽(yáng)性率比較確切, 具有一定的療效。其中以合胞病毒(RSV)的陽(yáng)性率最高, 陽(yáng)性人數(shù)169例, 其陽(yáng)性率為70.4%, 其次是副流感病毒(PIV)陽(yáng)性率最高, 陽(yáng)性的例數(shù)為39例, 其陽(yáng)性率占16.3%。而流感病毒B型(InfB)陽(yáng)性率較低, 只有2例陽(yáng)性患者, 其陽(yáng)性率占0.8%。該檢測(cè)結(jié)果和國(guó)內(nèi)外的許多報(bào)道一致。說明直接免疫熒光法病毒抗原檢測(cè)在呼吸道感染疾病的診斷中具有較好的效果, 能較早的指導(dǎo)臨床用藥。

綜上所述, 直接免疫熒光法病毒抗原檢測(cè)是一種簡(jiǎn)便、快速而且實(shí)用的檢查方法, 可以對(duì)呼吸道感染的病毒病原體做出早期的快速的診斷, 進(jìn)而指導(dǎo)臨床的用藥, 從而降低患者抗病毒藥物的應(yīng)用, 縮短住院時(shí)間。

［1］ 陳輝蘭.直接免疫熒光法病毒抗原測(cè)定在呼吸道感染性疾病診斷中的應(yīng)用.中外醫(yī)學(xué)研究, 2013, 11(31):53-54.

［2］ 俞小衛(wèi), 王亞楠, 程寶金, 等.直接免疫熒光法病毒抗原測(cè)定在呼吸道感染性疾病診斷中的應(yīng)用.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué), 2013, 28(01): 76-79.

［3］ 馬燕, 于翠香.273例急性呼吸道感染患兒呼吸道病毒抗原檢測(cè)結(jié)果及分析.山東醫(yī)藥, 2012, 56(15):75-76.

［4］ 雷小英, 彭東紅.2009-2011年重慶地區(qū)兒童呼吸道病毒感染流行特征分析.重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2013, 38(09):1052-1057.

［5］ 金玉霞, 苗正友, 宋勤浩.嘉興地區(qū)呼吸道感染患兒的病毒病原學(xué)分析.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2013, 23(21):5239-5243.

2014-04-10］

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