高麗平 張紅旗

臨床疑難配血常見因素分析及解決辦法

高麗平 張紅旗

目的 分析疑難配血的成因, 探討科學(xué)簡潔的解決辦法。方法 對近幾年遇到的疑難配血病例進(jìn)行原因分析, 并對所采取的處理方法進(jìn)行總結(jié)和歸納。結(jié)果 46例疑難配血病例原因分為5類13種, 其中不規(guī)則抗體占疑難配血病例總數(shù)的39.1%, 冷凝集素和自身抗體占32.6%, 抗原減弱占8.7%,抗體減少占6.5%, 試劑因素占4.3%, 其它如類B、亞型、操作錯(cuò)誤等各占2.2%。結(jié)論 將ABO疑難血型三步分析法思路與微柱凝膠卡法新技術(shù)結(jié)合起來, 應(yīng)用于臨床疑難配血簡便快速、科學(xué)實(shí)用。

血型鑒定；不規(guī)則抗體；交叉配血

輸血現(xiàn)已成為臨床治療疾病的重要手段之一, 尤其在急性大出血, 出血性疾病, 慢性貧血等疾病的治療中更為突出。血型鑒定和交叉配血是臨床輸血安全的重要保障措施, 而疑難配血又是輸血科工作人員經(jīng)常遇到的棘手問題?，F(xiàn)將本科室2008年3月~2013年11月間46例疑難配血病例進(jìn)行回顧性分析, 報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 標(biāo)本來源于2008年3月~2013年11月在本院輸血的住院及門診患者, 部分有輸血史及妊娠史。

1.2 試劑與儀器 抗-A、抗-B和RhD(IgM)單克隆血型定型試劑由長春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供；人ABO血型反定型用紅細(xì)胞試劑、紅細(xì)胞血型抗體篩選細(xì)胞及紅細(xì)胞血型抗體鑒定譜細(xì)胞由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供；凝聚胺試劑由珠海生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)；微柱凝膠卡包括ABO、RhD血型檢測卡、Rh血型分型卡、抗人球蛋白檢測卡, 由長春博迅生物技術(shù)有限公司提供； TD-3A型血型血清學(xué)用離心機(jī)、FYQ型免疫微柱孵育器為長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司生產(chǎn)。

1.3 方法 本實(shí)驗(yàn)室開展有鹽水介質(zhì)法、凝聚胺法與微柱凝膠卡法。ABO血型正反定型、RhD血型鑒定首先按照文獻(xiàn)［1］的方法進(jìn)行操作, 發(fā)現(xiàn)正反定型不符或結(jié)果難以判定時(shí), 加做吸收放散試驗(yàn)和用微柱凝膠卡法進(jìn)一步驗(yàn)證；交叉配血試驗(yàn)也先用鹽水介質(zhì)法和凝聚胺法, 遇有不配合需要做Coombs試驗(yàn)、新生兒溶血病診斷、紅細(xì)胞亞型、不規(guī)則抗體篩選及鑒定、Rh血型分型等用微柱凝膠卡法, 均按試劑及儀器說明書嚴(yán)格操作并判斷結(jié)果。

2 結(jié)果

46例疑難配血病例不同的原因分類及其處理方法見表1。

2.1 不規(guī)則抗體 不規(guī)則抗體陽性者共18例, 占46例疑難配血的39.1%, 其中抗-D 1例(2.2%), 抗-E 10例(21.7%),抗-M 6例(13.0%), 抗-P11例(2.2%)；分別占不規(guī)則抗體陽性總數(shù)的5.6%, 55.6%, 33.3%和5.6%。處理措施是篩選相應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞進(jìn)行輸注。

2.2 抗原減弱 抗原減弱4例, 均為白血病患者, 占46例疑難配血的8.7%。4℃條件下延長正定型反應(yīng)時(shí)間, 吸收放散試驗(yàn)確定血型后同型輸注。

2.3 抗體減少 抗體減少3例, 占46例疑難配血的6.5%。其中1例為白血病患者, 2例為老年患者。處理方法是增加反定型血清量, 4℃條件下延長反定型反應(yīng)時(shí)間, 確定血型后同型輸注。

2.4 冷凝集素 冷凝集素干擾交叉配血試驗(yàn)10例, 占46例疑難配血的21.7%。簡單的處理方法選用微柱凝膠卡法配血,可避免冷抗體的干擾?；蛴脺佧}水洗滌患者紅細(xì)胞, O型紅細(xì)胞4℃條件下吸收患者血清中冷抗體, 后在37℃條件下進(jìn)行血型鑒定與交叉配血試驗(yàn)。

表1 46例疑難配血原因分析及處理方法(n, %)

2.5 自身抗體 自身抗體陽性者5例, 占46例疑難配血的10.9%。處理方法是選擇交叉配血凝集最弱者進(jìn)行輸注。

2.6 A2B亞型 A2B亞型1例, 占46例疑難配血的2.2%。處理方法是選擇不含A1抗原的紅細(xì)胞進(jìn)行輸注。

2.7 類B 獲得性B 1例, 占46例疑難配血的2.2%。處理方法有：唾液血型物質(zhì)鑒定、ABO血型吸收放散試驗(yàn)、使用抗-A+B、抗-H做正定型試驗(yàn), 再重做ABO正反定型試驗(yàn)和交叉配血試驗(yàn)。

2.8 標(biāo)本因素 患者血清蛋白紊亂1例, 占46例疑難配血的2.2%。處理方法有：唾液血型物質(zhì)鑒定、溫鹽水洗滌紅細(xì)胞再重做ABO正反定型試驗(yàn)、反定型觀測結(jié)果時(shí), 用生理鹽水稀釋后凝集散開。正確定型后交叉配血。

2.9 試劑因素 試劑因素2例, 占46例疑難配血的4.3%。檢查試劑質(zhì)量并更換合格試劑。

2.10 人為因素 人為誤判1例, 占46例疑難配血的2.2%。處理方法再次培訓(xùn)SOP, 重新規(guī)范操作。

3 討論

由表1可見本次調(diào)查46例疑難配血原因分布在5大類共13種, 不規(guī)則抗體和自身抗體分別占疑難配血病例總數(shù)的39.1%和32.6%與文獻(xiàn)［1］報(bào)道的50.0%和33.3%比較,不規(guī)則抗體比例稍低, 自身抗體所占比例相近。

疑難配血主要難在血型鑒定和抗體的篩查與鑒定, 這兩個(gè)問題解決后即可以同型或相容性輸注。欲解決好疑難配血, 首先應(yīng)具備相當(dāng)數(shù)量的高素質(zhì)專業(yè)技術(shù)人員, 以ABO疑難血型三步分析法［2］為技術(shù)路線, 以血型血清學(xué)操作規(guī)程［3］和凝聚胺技術(shù)、微柱凝膠免疫檢測技術(shù)為依托, 建立并持續(xù)改進(jìn)臨床輸血質(zhì)量管理體系, 認(rèn)真編寫并嚴(yán)格執(zhí)行輸血技術(shù)操作規(guī)程(SOP), 據(jù)文獻(xiàn)［4］報(bào)道占疑難配血病例29.3%屬于人員誤操作和試劑質(zhì)量因素, 通過強(qiáng)化培訓(xùn)并嚴(yán)格執(zhí)行SOP,即可糾正并預(yù)防此類情況的再次發(fā)生。其次在編寫SOP時(shí)考慮到不同患者的臨床資料, 適時(shí)指導(dǎo)操作人員哪些患者需做抗體篩查, 用什么方法；哪些情況需按照ABO正反定型不一致分類表［5］提示逐項(xiàng)排除不可能引起正反定型不一致的原因, 并對還無法排出的原因設(shè)計(jì)一組有針對性的試驗(yàn)和方法來驗(yàn)證患者的血型。在本實(shí)驗(yàn)室中, 微柱凝膠免疫檢測技術(shù)以其具有簡單方便、不需洗滌、陰性結(jié)果不須確認(rèn)試驗(yàn)、適用于大量標(biāo)本檢測、解決了Coombs試驗(yàn)因?yàn)槌绦驈?fù)雜費(fèi)時(shí)等原因未能在臨床應(yīng)用的問題, 同時(shí)具有結(jié)果準(zhǔn)確、清晰明確、保存時(shí)間長、可重復(fù)性強(qiáng), 對臨床標(biāo)本血型檢測敏感性恰到好處、標(biāo)本用量少約為試管法的1/10~1/5、儀器操作、工作程序和結(jié)果判定等易于規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn), 在解決疑難配血病例工作中發(fā)揮了關(guān)鍵性的作用。

［1］ 董興華, 林正明, 江建鋒, 等.36例疑難配血原因分析及解決方案.中國輸血雜志, 2012, 25(5):481-482.

［2］ 蘭炯采, 陳靜嫻, 馬紅麗, 等.推薦ABO疑難血型三步分析法.中國輸血雜志, 2010, 23(3):165-168.

［3］ 葉應(yīng)嫵, 王毓三, 申子瑜, 等.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.南京：東南大學(xué)出版社, 2006:246-257.

［4］ 苑新.基層醫(yī)院ABO血型正反定型不符常見原因分析.中國誤診學(xué)雜志, 2006, 6(5):869-870.

［5］ 蘭炯采, 贠中橋, 陳靜嫻.輸血免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù).北京:人民衛(wèi)生出版社, 2011:131-146.

2014-03-21］

466300 河南省， 沈丘縣人民醫(yī)院輸血科(高麗平)；周口市中心血站血型室(張紅旗)

高麗平