郭春霞 任擁軍 郭海榮

·臨床研究·

孕產(chǎn)婦HBV-DNA與乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物的相關(guān)性分析

郭春霞 任擁軍 郭海榮

乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物；孕婦；HBV-DNA；酶聯(lián)免疫吸附法；實(shí)時(shí)熒光定量PCR；相關(guān)性

長期以來，我國人群一直呈乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)高感染率，約有1.3億人感染[1]。1979年全國性的大人群抽樣調(diào)查及以后陸續(xù)的小范圍調(diào)查顯示HBsAg 陽性檢出率為9.09%～10%。孕產(chǎn)婦HBsAg 陽性檢出率為11.2%～12.5%。我國每年約有72～80萬名孕產(chǎn)婦婦攜帶HBV。因此，這些孕產(chǎn)婦的孕期保健和母嬰阻斷值得關(guān)注。目前乙肝的診斷主要依賴于血清標(biāo)志物和HBV-DNA水平的檢測。血清HBV-DNA水平對于臨床分析判斷病情，監(jiān)測抗病毒治療效果，估計(jì)急慢性乙肝感染的預(yù)后，是可靠的指標(biāo)。乙型肝炎病毒標(biāo)志物的檢測多采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。該方法快速簡便，試劑穩(wěn)定期長，測試成本低[2]。本文用ELISA檢測患者血清HBsAg、HBeAg、抗HBe，抗HBc，并與HBV-DNA的定量進(jìn)行比較，以探討他們之間的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 篩選收集2011年1月至2012年6月在石家莊婦幼保健院分娩的HBsAg 陽性的1 012例產(chǎn)婦的血清標(biāo)本。產(chǎn)婦初檢HBsAg陽性，肝腎功能正常，甲、丙、丁、戊型肝炎系列檢查陰性，年齡22～35歲。

1.2 檢測方法和儀器 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測患者血清中的乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物(HBsAg，抗HBs，HBeAg，抗HBe，抗HBc)。試劑盒：珠海麗珠生物工程股份有限公司提供。按試劑盒說明書操作，用鄭州安圖酶標(biāo)儀測定記錄結(jié)果。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(read time PCR,PT-PCR)技術(shù)檢測患者血清中的HBV-DNA。儀器名稱Line-Gene(Read-Time PCR Detection System)。 試劑盒由珠海麗珠生物工程股份有限公司提供。檢測范圍(5×10-1.0*108)。

1.3 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) 血清學(xué)標(biāo)志物HBsAg、 HBeAg、 抗HBs的陰性結(jié)果為：樣品A值<臨界值(C.O.)，陽性結(jié)果為：樣品A值≥臨界值(C.O.)。血清學(xué)標(biāo)志物抗HBe、抗HBc陽性結(jié)果為：樣品A值<臨界值(C.O)，陰性結(jié)果為：樣品A值≥臨界值(C.O.)。

2 結(jié)果

HBsAg 陽性+HBeAg 陽性+ 抗HBc陽性和HBsAg陽性+HBeAg陽性一組的HBV_DNA陽性率(99%) 顯著高于HBsAg 陽性 + 抗HBe 陽性+抗HB c 陽性和HBsAg陽性+抗HBc陽性一組的陽性率(20%)(P<0.01)。而且HBeAg 陽性一組的病毒載量集中在高拷貝區(qū)。但HBeAg 陽性一組中仍有1%的陰性率。見表1。

表1 HBeAg 陽性和HBeAg陰性2組HBV_DNA定量與乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物

3 討論

乙型病毒性肝炎是我國常見的傳染病,其傳染性和病死率均居高不下,嚴(yán)重危害人們的健康[3]。乙肝病毒血清標(biāo)志物檢測因操作簡便，價(jià)格便宜，是目前診斷乙型肝炎最常用的指標(biāo),即俗稱的“兩對半”,主要反映人體對HBV的免疫反應(yīng)狀態(tài)。用ELISA檢測HBV標(biāo)志物只能反應(yīng)病毒入侵人體的信息,不能直接反映HBV在患者體內(nèi)的復(fù)制情況,也不能作為判斷患者是否具有傳染性的直接證據(jù)[4]。HBV-DNA定量檢測是病毒復(fù)制最直接可靠的指標(biāo)，但由于HBV-DNA水平的檢測價(jià)格昂貴，對實(shí)驗(yàn)室要求也較高，在我國很多地區(qū)還不能常規(guī)開展。乙肝病毒母嬰傳播是我國及其他亞洲國家病毒感染最主要的傳播途徑，大多數(shù)研究表明HBsAg、HBeAg及HBV-DNA載量是影響母嬰傳播的主要因素。所以了解血清標(biāo)志物及HBV-DNA載量，分析二者之間的關(guān)系，有助于今后對HBsAg 陽性孕婦進(jìn)行快速監(jiān)測，以便采取合理有效的母嬰阻斷策略[5]。

本研究通過對2011年1月至2012年6月在石家莊婦幼保健院分娩的、表面抗原陽性的1 090例產(chǎn)婦的血清標(biāo)本，同時(shí)采用ELISA檢測乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測HBV-DNA。結(jié)果顯示HBsAg 陽性+HBeAg 陽性+ 抗HBc陽性和HBsAg 陽性+HBeAg 陽性一組的陽性率(99%)，大于HBsAg 陽性 + 抗HBe 陰性+HBc陽性和HBsAg 陽性+HBc陽性一組的陽性率(20%)(P<0.01)。并且，HBeAg 陽性一組的病毒載量集中在高拷貝區(qū)。但HBeAg 陽性一組中仍有1%的陰性率。HBeAg 陽性是反映病毒復(fù)制的良好指標(biāo)，但僅依靠乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物檢

測結(jié)果不能準(zhǔn)確的判斷HBV病毒復(fù)制的程度及傳染性的強(qiáng)弱。隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展及檢驗(yàn)技術(shù)的不斷提高，為了減少或避免漏檢誤診，貽誤治療，二者聯(lián)合檢測才能更好的給臨床提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，更全面地反映HBV感染、復(fù)制、傳染性和療效評估，更有利于母嬰阻斷的治療。

1 李金明主編.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù).第1版.北京：人民軍醫(yī)出版社，2009.190.

2 王功遂，王曼曼，明朗，等．HBeAg定量在慢性乙型肝炎診斷和治療中的價(jià)值.中華傳染病雜志,2004,22：255-258.

3 揚(yáng)廣輝，譚明德，謝玉桃，等.干擾素及拉米夫定抗乙型肝炎病毒的體外實(shí)驗(yàn)研究.疾病控制雜志,2004,8:209-212.

4 程鋼，何蘊(yùn)韶，周新宇.熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測乙型肝炎病毒.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1999,22:135.

5 陸向東，孫翔，翟祥軍，等.HBsAg陽性孕婦HBsAg、HBeAg和HBV-DNA關(guān)系探討.江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué),2012,23：3.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.16.046

050011 河北省石家莊市婦幼保健院檢驗(yàn)科

R 512.62

A

1002-7386(2014)16-2506-02

2014-03-19)